Раздел 2
Основные методы исследования
2.1. Обоснование выбранного направления исследований
Статистические данные свидетельствуют о росте числа наркоманов не только в
нашей стране, но и за рубежом [11, 193, 194]. В литературе достаточно полно
описаны причины возникновения и клинические проявления наркомании [6], однако
механизмы формирования зависимости еще до конца не изучены.
Считается доказанным, что развитие наркотической зависимости у людей
обусловлено стимулирующим влиянием опиатов на эмоционально-аффективную сферу
высшей нервной деятельности [15, 17, 18, 22]. Именно появлением положительных
эмоций, обусловленных психотропным воздействием морфина и других наркотиков
этой группы, объясняется развитие патологического непреодолимого влечения к
этим соединениям.
Положительное эмоциональное состояние определяется врожденными инстинктивными
мотивациями, а именно пищевыми, питьевыми, оборонительными, половыми ( Анохин,
Судаков). Наиболее разнообразной и эмоционально окрашенной является половая
мотивация. Это, а также ряд других косвенных данных литературы, дало основание
сформировать рабочую гипотезу, согласно которой в основе положительного
эмоционального состояния при приеме наркотика лежат ощущения переживания
оргазменного наслаждения. Другими словами наркомания - это мозговая маструбация
, подчеркнутая и окрашенная соматовегетативными ощущениями переживания
оргазменного удовольствия [10]. Поскольку центральным звеном нейро –
гуморальных механизмов рефлекторного акта либидо, эрекции, оргазма являются
половые гормоны, то изучение их влияния на развитие наркозависимости может быть
объективным критерием подтверждения развитой гипотезы.
2.2. Экспериментальные животные
Опыты проведены на белых нелинейных крысах обоего пола разведения Института
фармакологии и токсикологии АМН Украины. Животных содержали в стандартных
условиях вивария при свободном доступе к воде и пище. После окончания опыта
животных умерщвляли путем передозировки эфирного наркоза или декапитацией
[195]. Использовали половозрелых самок и самцов, средняя масса тела которых
составила 150-250 г, новорожденных самок и самцов с массой тела 60-80 г. Всего
в ходе выполнения диссертационной работы было использовано 1115 животных.
2.3. Моделирование экспериментального абстинентного синдрома
При формировании зависимости к морфину и провокации абстинентного синдрома
использовали метод С.К. Судакова и соавт. [196, 197]. Подробное обоснование
выбранного метода формирования зависимости к морфину, используемого при
проведениии научно-исследовательской работы в отделе нейрофармакологии
Института фармакологии и токсикологии АМН Украины, приведено в работе М.А.
Филоненко [198]. Вкратце укажем, что метод является простым, воспроизводимым и
объективным.
Физическую зависимость к морфину (морфина гидрохлорид, субстанция, Харьковская
фармацевтическая фирма “Здоровье народа”) вызывали путем ежедневных двукратных
(в 1000 и 1800) внутрибрюшинных инъекций наркотика на протяжении 13 дней в
возрастающих дозах (на 5 мг/кг массы тела ежедневно) - от 5 до 65 мг/кг.
Экспериментальный абстинентный синдром воспроизводили введением
морфинозависимым животным антагониста опиатных рецепторов налоксона (налоксон,
ампулы по 0,4 мг, 1 мл, Варшавский фармацевтический завод “Польфа”, Польша)
внутрибрюшинно в дозе 1 мг/кг за 30 мин до наблюдения. Тяжесть абстиненции
оценивали по клиническим проявлениям синдрома путем визуального наблюдения на
протяжении 3 мин и выражали индексом абстиненции в баллах. Индекс абстиненции
подсчитывали по сумме специфических симптомов абстиненции и частоты их
проявления за время наблюдения. За симптомы встряхивания “мокрой собаки”,
корчи, диарею, ринорею насчитывали по 4 балла за каждый симптом, по 3 балла -
за птоз, диспноэ, клонус передних лап, по 2 балла за пилоэрекцию, скрежет
зубами, оральный гиперкинез, 1 балл - за встряхивание головой. Симптомы:
диарея, ринорея, птоз, диспноэ, пилоэрекция оценивались по принципу “да/нет”,
остальные - по количеству их проявлений в течение 3 мин наблюдения, баллы
присуждались за каждое проявление [25].
2.4. Формирование и оценка толерантности к анальгетическому
действию морфина
Толерантность к анальгетическому действию морфина вызывает интерес прежде всего
в качестве объективного критерия тяжести физической зависимости от наркотика.
Известно, что при повторных введениях морфина эффективность его
анальгетического действия быстро снижается, а параллельно с развитием
толерантности происходит формирование физической зависимости.
Для оценки анальгетического действия морфина использовали метод иммерсии
хвоста, который позволяет многократно использовать одних и тех же животных без
искажения полученных результатов [199]. Суть метода заключается в том, что
хвост животного погружали в воду температурой 50 ± 0,2 °С на глубину 3 см и
регистрировали латентное время извлечения хвоста из воды (иммерсию хвоста). Под
влиянием веществ с анальгетическими свойствами этот период увеличивается,
поэтому, во избежание неоправданного травмирования животных, экспозиция хвоста
после введения морфина не превышала 15 с. Тестирование крыс проводили всегда в
одно и то же время суток (1100). Животным контрольной группы морфин вводили
внутрибрюшинно в дозе 9 мг/кг ежедневно в течение 11 суток. Животным опытных
групп одновременно с морфином внутрибрюшинно вводили тестостерон (тестостерона
пропионат, 5% в этилолеате, раствор для инъекций, “Фармак”, Киев) самкам – в
дозе 0,1 мг/кг, самцам – в дозе 1 мг/кг. В опытах по определению влияния на
толерантность к анальгетическому эффекту морфина обратимы
- Київ+380960830922