раздел 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Работа проведена на 337 белых половозрелых крысах линии Вистар, массой
180,0-230,0 грамм.
В качестве методического приема для получения психоэмоциональных расстройств, в
настоящее время, используются внутристриатные инъекции дофамина или системное
введение его агонистов (например, апоморфина или амфетамина) [10, 17]. При
таком подходе отмечалось развитие у животных стереотипных форм поведения,
однако, сдвиги процессов памяти оставались еще недостаточно исследованными.
Пониженное внимание к этому вопросу усугублялось представлениями о
стимулирующем воздействии на мнестические реакции однократного применения
непрямых симпатомиметиков (кокаина, амфетамина и др.). В связи с этим,
представлялось целесообразным определить изменения формирования и извлечения ЭП
в условиях устойчивого патологического состояния мозга, вызванного воздействием
различных факторов. Данную модель УПС головного мозга у крыс создавали путем
внутрижелудочного введения сиднокарба в дозе 5 мг/кг 2 раза в день на
протяжении 14 суток. Для сопоставления с УПС мозга, вызванными другими
факторами нами были выбраны: двухнедельное внутрибрюшинное введение апоморфина
гидрохлорида в дозе 1 мг/кг дважды в сутки [256] и экспериментальное
невротическое состояние, вызванное по методике “конфликта афферентных
возбуждений” [257].Регистрируемые показатели поведения и памяти у животных
тестировали через 30 минут после последнего введения сиднокарба.
Для изучения фармакологической активности, в условиях УПС, вызванного
сиднокарбом, использовали следующие психофармакологические средства и пептиды
вазопрессинового ряда: аминазин - 5 мг/кг, галоперидол, дроперидол - по 0,25
мг/кг, сульпирид - 100 мг/кг, мелипрамин и амитриптилин - по 2,5 мг/кг,
пирацетам - 500 мг/кг, аргинин-вазопрессин (АВП) - 1 мкг/кг, 2 -
глицин-дезглицинамид-аргинин-вазопрессин (2Г-ДГА-АВП) - 20 мкг/кг. Препараты
вводили в дозах, которые у лабораторных животных, в первую очередь у крыс,
оказывали существенное влияние на условно-рефлекторную деятельность и память
[54,183,258,259]. Исследуемые лекарственные средства ( аминазин, галоперидол,
дроперидол, мелипрамин, амитриптилин, пирацетам, АВП и 2Г-ДГА-АВП) вводили
внутрибрюшинно, а сульпирид - внутрижелудочно через 15-20 минут после
последнего применения сиднокарба. Животным контрольной группы в количестве 1
мл/кг массы вводили изотонический раствор хлористого натрия. Регистрируемые
поведенческие и нейрохимические показатели определяли через 30 - 40 минут после
применения ЛС.
Изменения показателей поведения крыс на фоне действия психофармакологических
средств у интактных животных и при устойчивом патологическом состоянии мозга
определяли в установке «открытое поле» размером 100 на 100 см с расстояниями
между «ложными» норками 10 см. О горизонтальной двигательной активности (ГДА)
судили по количеству полностью пересеченных квадратов в течение 3 минут, об
исследовательской вертикальной двигательной активности (ВДА) - по числу
подъемов на задние лапы, об эмоциональной реактивности – по количеству болюсов
дефекации (КБД), о безусловно-рефлекторной деятельности – по количеству
обследованных норок (КОН). Наряду с этими показателями регистрировали
продолжительность грумминга (Гр) в секундах во время тестирования [231].
Для определения степени агрессивности у каждой пары исследуемых крыс в камере
размером 30 на 25 см с электрифицированным полом определяли порог (в вольтах)
электрокожного болевого раздражения (ПРА) при подаче которого у крыс
развивались вокализация, а затем схватки [235].
Об изменениях памяти судили по условным пассивно- и активно-оборонительной
реакциям. Условную реакцию пассивного избегания (УРПИ) вырабатывали на основе
однократного электрокожного подкрепления. Экспериментальная установка состояла
из двух соединенных круглым отверстием камер: большой освещенной и малой темной
с электрифицированным полом. Для выработки условной реакции (УР) крысу помещали
на середину освещенной камеры хвостом к проходу в темную часть. Исследуя
пространство, животное находило отверстие в темную камеру и проникало в нее.
Латентный период включал время с момента помещения животного в установку до
полного перемещения его в темный отсек. Через 15 сек. на решетчатый пол камеры
подавали переменный ток (50 Гц, 2-3 с., 10 мс), величину которого для каждого
животного подбирали индивидуально. За перебежавшей в освещенный отсек крысой
наблюдали в течение 3 мин. и, если она не пыталась вернуться в темное
помещение, УРПИ считалось выработанной в одном сочетании. Животных, повторно
зашедших в темную камеру в течение 3 минут, исключали из опыта. Спустя 2 часа
после выработки пассивно-оборонительного навыка животное через электроды,
наложенные на ушные раковины подвергали воздействию электротока. Через 72 часа,
когда подвижность обученных крыс не отличалась от поведения интактных животных,
проводилась проверка сохранения условной реакции. По ее результатам выделялись
животные с амнезией навыка и с сохраненной УР [95]. Еще спустя 3 часа обеим
группам (в качестве неспецифического подкрепления) внутрибрюшинно вводили
изотонический раствор хлористого натрия в объеме 1 мл/кг массы тела. Через 30
минут после этой процедуры у крыс вновь тестировали сохранность УРПИ.
Выработку активно-оборонительного условного рефлекса (УРАИ) проводили в
У-образном лабиринте с электрифицированным полом [95]. Для выработки УР крыс
помещали на стартовую площадку ствола лабиринта и в одном из двух других ходов
включали свет. На 5-й секунде на пол подавали электрический ток, по величине
равный болевому
- Київ+380960830922