РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Организация эксперимента
Направление и объем исследований предусматривал применение метода
биохемилюминесценции (БХЛ) при изучении действия ксенобиотиков на организм
теплокровных животных: оценку степени их токсичности и степени кумуляции;
изучение аллергенных, сенсибилизирующих и кожно-резорбтивных свойств;
исследования стабильности и скорости гидролитического окисления водных
растворов ксенобиотиков; действия химических веществ на функциональное
состояние системы СРО рабочих химических производств. Программа исследований
предусматривала:
1. Экспериментальное исследование действия ксенобиотиков на организм
теплокровных животных:
острый опыт – установление количественной связи между смертельными и
среднесмертельными дозами и параметрами динамических кривых БХЛ;
подострый опыт – изучение кумулятивных свойств ксенобиотиков и определение
степени кумуляции по параметрам БХЛ;
морфологическое исследование органов;
изучение сенсибилизирующих и аллергенных свойств ксенобиотиков (постановка
иммунологических тестов и определение интенсивности БХЛ сыворотки крови);
исследование кожно-резорбтивного действия ксенобиотиков (метод БХЛ и
биохимические методы);
2. Экспериментальное изучение воздействия исследуемых химических веществ на
воду осуществлялось по следующим показателям:
стабильность веществ в водных объектах проводилась на основе прямого метода
определения стабильности ксенобиотиков в воде, основанного на измерении
разности показателей преломления исследуемого и стандартного растворов
ксенобиотиков в динамике наблюдения при помощи интерферометра ИТР-1 [62, 63].
стабильность ксенобиотиков оценивалась по показателям интенсивности БХЛ их
водных растворов.
3. Оценку функционального состояния системы свободнорадикального окисления
(СРО) организма рабочих химических производств проводили методами
биохемилюминесценции (БХЛ) сыворотки крови и мочи, фосфоресценции мочи и
электроотрицательности ядер (ЭОЯ) клеток буккального эпителия.
Основные ксенобиотики, используемые в эксперименте, представляли собой
препараты химии органического синтеза: макроциклический эфир - 12 краун-4 ;
неонол- АФ 9-12; метилцеллозольв (МЦ); эпоксидсодержащие простые полиэфиры –
Лд-303, 503, 703; простые полиэфиры – Л-402-2-100, Л-1502, предоставленные НПО
«Капролактам» (г. Шебекино, Россия). Они широко используются в химической
промышленности для получения моющих средств, флотореагентов, антикоррозийных
препаратов, поверхностно-активных веществ, эластичных, полужестких и жестких
пенополиуретанов, синтетической кожи, пластмасс, эпоксидных смол, эмалей,
лаков, тормозных и охлаждающих жидкостей. В наших экспериментах были
использованы результаты по гигиеническому нормированию простых полиэфиров и
макроциклических эфиров, в частности, данные исследований подострого и
хронического токсикологического экспериментов. В этой связи изучению
подвергались отдельные представители из каждой группы веществ – простые
полиэфиры, полиэфиры, содержащие эпоксидную группу и макроциклические эфиры –
наиболее токсичные в остром, подостром и хроническом опытах.
Макроциклический эфир (12 краун-4 – 1, 4 ,7 10 –тетраоксиациклотетрадекан) -
прозрачная вязкая жидкость желтоватого цвета; молекулярная масса 176; плотность
при 20 єС – 1010, при 60 єС - 986 кг/м3; коэффициент поверхностного натяжения
при 25 єС –0,033 Н/м; вязкость при 25 єС - 0,85 Па·с; функциональность – 3;
кислотное число в мг КОН/г – 0,036; рН – 7,02; содержание гидроксильных групп -
1,1 %; хорошо растворим в органических растворителях (спиртах, ацетоне);
растворимость в воде при 12 єС - 0,3%, при 22 єС - 0,02 %, с водой легко
образует стойкую эмульсию; структурная формула имеет вид:
СН2 СН2
Н2С СН2
О О
Н2С О О СН2
Н2С СН2
Неонол АФ 9-12 – оксиэтилированный алкилфенол на основе тримеров пропилена с
общей формулой С9Н19-С6Н40-(С2Н40)nН, где n – степень оксиэтилирования, n = 12;
неионогенное ПАВ, вязкая жидкость светло-желтого цвета, для n=10 и выше –
хорошо растворимая в воде и в органических растворителях. молекулярная масса от
396 до 1320; плотность при 20єС – 1025 кг/м3 . Как примеси вещество может
содержать полиэтиленгликоли, уксусный натрий и воду.
Метилцеллозольв (МЦ) – монометиловый эфир этиленгликоля прозрачная жидкость
светло-желтого цвета, хорошо растворима в воде и органических растворителях;
молекулярная масса 76; плотность при 250С 963 кг/м3; температура кипения -
123,50С, функциональность – 1; РН (метанол : вода = 70 : 30) – 6,5 – 8,0;
температура вспышки - 190єС; вязкость по Хепплеру при 25 єС - 0,18 – 0,19 Па·с;
получается взаимодействием окиси этилена с метанолом в присутствии кислых глин
с последующей ректификацией; структурная формула: СН3-О- СН2- СН2-ОН
Эпоксидсодержащий простой полиэфир – лапроксид Лд-703 – триглицидиловый эфир
полиоксипропилентриола – вязкая прозрачная жидкость соломенно-желтого цвета;
молекулярная масса - 650-700; плотность при 25єС – 1090 кг/м3; вязкость по
Хепплеру при 25 єС - 0,15 – 0,20 Па·с; функциональность – 3; содержание
эпоксидных групп – 13,0 – 16,0 %; гидроксильных групп - 0,5 - 1,2 %;
температура вспышки - 220єС; в воде образует устойчивую эмульсию, в
органических растворителях (спиртах, эфирах, ароматических углеводородах)
растворим неограниченно; структурная формула