ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Изучено 263 случая рака желудка на операционном и секционном материале, из них 89 (33,8%) случаев кишечного типа рака, 129 (49,1%) случаев диффузного и 45 (17,1%) случая смешанного или неклассифицированного типа. Распределение материала по полу показало, что чаще раком желудка болеют мужчины (155 случаев - 58,9%), чем женщины (108 случаев - 41,1%). Однако указанное распределение материала по полу было неоднородным среди различных гистологических типов: с одной стороны среди больных раком кишечного и смешанного типов значительно преобладали мужчины (66,5% и 65,9% случаев), с другой - в группе больных раком диффузного типа преобладание мужчин было незначительным (51,6% случаев).
Возраст больных колебался значительно: от 17 до 79 лет, средний возраст среди всех больных составил 54,4 ± 0,5 года. Больные раком кишечного и смешанного типов были несколько старше (58,4 ± 0,5 и 55,1 ± 0,5 года соответственно) по сравнению с больными раком диффузного типа (51,3 ± 0,5 года). Максимальный возраст больных отличался мало у больных разными формами рака (от 74 лет при смешанном типе рака желудка до 79 лет при кишечном типе рака желудка). Минимальный возраст отличался в большей степени: самым молодым больным с диффузным типом рака желудка был 17-летний подросток, в том время как больные раком кишечного и смешанного типов были в возрасте соответственно 32 и 34 года.
Опухоли преимущественно локализовались в пилоро- антральном отделе желудка (139 случаев - 52,9%), значительно реже в фундальном отделе (60 случаев - 22,8%), на границе фундального и антрального отделов (37 случаев - 14,1%), еще реже отмечено поражение кардиального отдела (16 случаев - 6,0%) и тотальное поражение желудка (11 случаев - 4,2%).
Частота случаев с инвазией сосудов и метастазами незначительно отличалась в диффузном и смешанном типе рака желудка: соответственно с инвазией - 66 случаев (51,2%) и 20 (44,4%) случаев, без инвазии 63 случая (48,8) и 25 случаев (55,6%). Однако она резко отличалась в кишечном типе рака желудка: с инвазией 22 случая (24,7%), без инвазии 67 случаев (75,3%). По наличию опухолевых эмболов в сосудах мы судили об инвазивном потенциале опухоли, основываясь на работе T. Mita, T. Shimoda (2001) [154], согласно которой инвазия опухолью лимфатических сосудов при раке желудка была наиболее значимой детерминантой (OR 8,68) для метастазов в лимфатические узлы, которые резко ухудшают прогноз.
Пораженные раком желудки описывали макроскопически по схеме с указанием локализации опухоли, ее формы (узел, язва с валообразными краями, инфильтративно-язвенная форма, инфильтрат) а так же размеров опухоли. В дальнейшем проводили гистотопографическое исследование опухоли. Для этого вырезали и нумеровали кусочки опухоли, которые фиксировали в 10% и 4%-ном растворах (обычного и забуференного) формалина, жидкостях Карнуа и Севки, нефиксированные кусочки быстро замораживали для изготовления криостатных срезов. Кусочки брали из центральных отделов опухоли на всю глубину (если толщина была значительной, то кусочек разрезался на равные части), и через небольшие промежутки к латеральному краю инвазии, и брали кусочки из латерального края инвазии опухоли.
Гистотопографический метод исследования позволил выявлять изменения морфологии опухоли от поверхностных отделов к глубоким слоям стенки желудка и от центра к латеральному краю инвазии, что могло быть следствием ее прогрессии.
Из фиксированного материала изготавливали парафиновые блоки. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Для выявления коллагеновых волокон использовали окраску пикрофуксином по ван-Гизону. Для определения количества митозов использовали выявление нуклеиновых кислот окраской галлоцианином и хромовыми квасцами, количество митозов подсчитывали как среднее число митотических фигур в поле зрения под большим увеличением (400Х) из 10 последовательно взятых полей зрения.
В криостатных срезах методом азосочетания выявляли активность неспецифической эстеразы, кислой и щелочной фосфатазы. Активность неспецифической эстеразы характерна для апудоцитов, а также для кишечного эпителия.
Для оценки характера слизи были использованы гистохимические методы: PAS-реакция, которая позволяет выявлять нейтральные полисахариды, входящие в состав секрета покровно-ямочного эпителия желудка, мукоидных шеечных (добавочных) клеток, клеток пилорических и кардиальных желез; для выявления несульфатированных гликозаминогликанов (ГАГ) применяли окраску альциановым синим при рН 2,5, для выявления сульфатированных ГАГ применяли окраску альциановым синим при рН 1,0.
Каждый из показателей оценивали полуколичественно как слабое, умеренное и высокое окрашивание по визуально-аналоговой шкале [6], проводили морфометрическую оценку по методу Г.Г. Автандилова с использованием окулярной сетки [2, 3].
В оценке выраженности гетерогенности опухоли на тканевом уровне исходили из классификации P. Lauren. Для кишечного типа рака желудка характерна высокодифференцированная аденокарцинома, представленная крупными железами с ровным апикальным краем клеток, четко различимым широким просветом. Умереннодифференцированная аденокарцинома характеризовалась более мелкими железами, часто близко располагающимися друг к другу, с более узкими просветами. К низкодифференцированным аденокарциномам отнесены участки с мелкими железами и железисто-подобными структурами почти без просветов, криброзными, солидными структурами. Рак желудка диффузного типа характеризуется резким снижением или отсутствием связи опухолевых клеток друг с другом, формирующих мелкие группы, тяжи или располагающихся обособлено друг от друга, характеризовался низкой тканевой дифференцировкой. К смешанному типу раку желудка отнесены опухоли, где имело место сочетание очагов кишечного типа рака желудка и диффузного, или опухоль имела строение солидного рака.
Основываясь на выраженности клеточного атипизма, выделены три типа опухолевых клеток. Клетки с
- Київ+380960830922