РОЗДІЛ 2
МАТЕРIАЛИ I МЕТОДИ ДОСЛIДЖЕНЬ
2.1. Об'єкт і матеріал досліджень. Експериментальна частина роботи виконана на поросятах великої білої породи віком від народження до 45 діб, кролях віком від народження до 5 місяців, курчатах віком 1 доба та клітинних лініях К562, U937, THP-1 в лабораторії ендокринної регуляції Українського науково-дослідного інституту фізіології і біохімії сільськогосподарських тварин (Інституту біології тварин УААН) і на кафедрі агроекології і біології Львівського державного аграрного університету протягом 1992-2000 років. Окремі дослідження виконані в лабораторії ендокринології Інституту розведення і живлення тварин Польської Академії Наук та на кафедрі тромбозів і біології судин Віденського університету (Австрія).
Проводились дослідження вікових особливостей процесів гемопоезу і лімфоцитопоезу та метаболізму в клітинах кісткового мозку, лімфоїдних органів і крові поросят в періоді від народження до 45-денного віку, регуляцію гемопоезу гормонами (тироксин, інсулін, гідрокортизон), мікроелементами (іони заліза в складі препарату "Декстрофер-100" і селену в складі селеніту натрію NA2SeO3), регуляцію експресії компонентів системи активації плазміногену за участю HGF (фактор росту гепатоцитів), TNF-б (фактор некрозу пухлин-б), IFN-б (інтерферон-б), PMA (форбол-міристатацетат) в клітинах ліній К562 (еритролейкемічні клітини людини), U937 і THP-1 (моноцитоїдні лейкемічні клітини людини).
В залежності від умов досліджень і віку були сформовані групи тварин (Табл.2.1). Дози гормонів, що використовувалась у дослідженнях, були вибрані на основі попередніх експериментів та даних літератури [54, 76, 129, 140, 141]. Тваринам контрольних груп вводили 0,85% NaCl. Концентрації гормонів у плазмі крові контролювали за допомогою радіологічного методу з використанням наборів фірми "ХОПИБОК-МЕНСК" (Беларусь).
Таблиця 2.1
Схема досліджень і характеристика тварин
Група тваринКількість тварин у групіВікВаріанти дослідженьПоросята1101 годинаКонтроль, тварини до прийому молозива2101 добаКонтроль, підсисні поросята3103 доби"4105 діб"557 діб"61010 діб"7514 діб"8521 доба"91030 діб "10545 дібКонтроль, годівля тварин згідно деталізованих норм [67]1153 добиПочинаючи з 48 год після народження тваринам вводили розчин тироксину "Reanal" в дозі 4 мг/кг двічі через кожні 12 годин. У дослідженнях тварин використовували через 12 год після 2-ї ін'єкції.1255 дібПочинаючи з 2-го дня життя тваринам вводили розчин тироксину "Reanal" в дозі 4 мг/кг через кожні 12 годин. Тваринам цієї групи було зроблено 6 ін'єкцій гормону. У дослідженнях тварин використовували через 12 год після останньої ін'єкції.13510 дібПочинаючи з 2-го дня життя тваринам вводили розчин тироксину "Reanal" в дозі 4 мг/кг через кожні 12 годин. Тваринам цієї групи було зроблено 16 ін'єкцій гормону. У дослідженнях тварин використовували через 12 год після останньої ін'єкції.
Продовження таблиці 2.1
Група тваринКількість тварин у групіВікВаріанти дослідженьПоросята14510 дібПочинаючи з 2-го дня життя тваринам вводили пропілтіоурацил шляхом ін'єкції у дозі 1 мг/кг через кожні 12 годин. У дослідженнях тварин використовували на 10-ий день після народження, через 12 год після останньої ін'єкції препарату.15510 дібПочинаючи з 7-го дня життя тваринам вводили пропілтіоурацил шляхом ін'єкції у дозі 15 мг/кг через кожні 12 годин. У дослідженнях тварин використовували на 10-ий день після народження, через 12 год після останньої ін'єкції препарату.1653 добиПочинаючи з 48 год після народження тваринам вводили інсулін в дозі 0,5 МО/кг через кожні 12 годин. У дослідженнях тварин використовували через 12 год після 2-ї ін'єкції.17510 дібПочинаючи з 7-ї доби життя тваринам вводили інсулін в дозі 2,0 МО/кг через кожні 12 годин. Тваринам цієї групи було зроблено 6 ін'єкцій гормону. У дослідженнях тварин використовували через 12 год після останньої ін'єкції.18510 дібПочинаючи з 7-ї доби життя тваринам вводили гідрокортизон (оцтовокислу сіль) в дозі 10 мг/кг через кожні 12 годин. Тваринам цієї групи було зроблено 6 ін'єкцій гормону. У дослідженнях тварин використовували через 12 год після останньої ін'єкції.19524 годЧерез 1 год. після народження тваринам внутрішньом'язево вводили розчин селеніту натрію (0,075 мг селену/кг маси). Тварин використовували в дослідженнях через 24 год після ін'єкції.
Продовження таблиці 2.1
Група тваринКількість тварин у групіВікВаріанти дослідженьПоросята2055 дібЧерез 1 год. після народження тваринам внутрішньом'язево вводили розчин селеніту натрію (0,075 мг селену/кг маси). Тварин використовували в дослідженнях через 120 год після ін'єкції.21510 дібЧерез 1 год. після народження тваринам внутрішньом'язево вводили розчин селеніту натрію (0,075 мг селену/кг маси). Тварин використовували в дослідженнях на 10-ій добі після ін'єкції.22103 добиЧерез 24 год. після народження тваринам внутрішньом'язево вводили розчин селеніту натрію (0,075 мг селену/кг маси). Тварин використовували в дослідженнях через 48 год після ін'єкції (на 3-ій добі життя).23105 дібЧерез 24 год. після народження тваринам внутрішньом'язево вводили розчин селеніту натрію (0,075 мг селену/кг маси). Тварин використовували в дослідженнях через 96 год після ін'єкції (на 5-ій добі життя).24510 дібЧерез 24 год. після народження тваринам внутрішньом'язево вводили розчин селеніту натрію (0,075 мг селену/кг маси). Тварин використовували в дослідженнях на 10-ій добі життя. 25103 добиЧерез 48 годин після народження тваринам внутрішньом'язево вводили 2 мл препарату "Декстрофер-100". Тварин використовували в дослідженнях через 24 год після ін'єкції.26105 дібЧерез 48 годин після народження тваринам внутрішньом'язево вводили 2 мл препарату "Декстрофер-100". Тварин використовували в дослідженнях на 5-ій добі життя (через 72 год після ін'єкції).
Прод
- Київ+380960830922