ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ
2.1. Характеристика экспериментальных моделей
2.1.1. Характеристика эксперимента на животных. Задачей эксперимента явилось изучение возможности применения гелий-неонового лазерного излучения для профилактики несостоятельности тонкокишечных анастомозов, накладываемых в условиях имеющегося или прогнозируемого перитонита.
Эксперимент выполнен на 95 половозрелых самцах крыс линии Вистар. У животных в условиях воздушно-эфирного наркоза производилась лапаротомия, удаление сальника и жировых образований семенников (для предупреждения развития спаечного процесса), перевязка и отсечение червеобразного отростка, который оставлялся в брюшной полости, чем достигалось моделирование разлитого гнойного перитонита (МРГП) [208]. Задачей в первой серии животных было выяснение адекватности модели, поэтому релапаротомия или другие лечебные мероприятия не производились. По мере их гибели производилось вскрытие для установления изменений в брюшной полости. У животных остальных групп через сутки выполнялась релапаротомия (РЛ) (также в условиях эфирно-воздушного наркоза) червеобразный отросток удалялся - устранялся источник перитонита (УИП), брюшная полость осушивалась марлевыми тампонами, промывалась 0,02 %-ным раствором фурациллина до "чистой воды", чем моделировалась стандартная тактика санации брюшной полости (СБП) при РГП. У животных, которым по задаче эксперимента производилась резекция примерно 1 см тонкой кишки (РТК), восстановление непрерывности ЖКТ выполнялось однорядным внеслизисто-подслизистым швом атравматическими иглами с нитями Supramed 4/0 или обычными колющими иглами с нитями полиамид 2/0 (моноволокно) или нихромовой проволокой диаметром 0,1 мм. Тем животным, которым по плану эксперимента производилось облучение гелий-неоновым лазером (ОГНЛ), последнее выполнялось в течение 5 минут с плотностью мощности 2 мвт/см2.
Объем вмешательства в сериях экспериментальных животных приведен в таблице 2.1.
Таблица 2.1
Объем оперативного вмешательства у подопытных животных
в зависимости от задачи эксперимента
№ серииК-во крысЗадача эксперимента в группеОбъем мероприятий в эксперименте1234115Проверка адекватности моделиМРГП210Оценка эффективности стандартной санации брюшной полости при РГПМРГП
РЛ: УИП+СБП 313Изучение заживления тонкокишечного анастомоза, наложенного в условиях РГП МРГП
РЛ: УИП+СБП+РТК420Изучение влияния низкоинтенсивного лазерного излучения на развитие перитонитаМРГП + ОГНЛ
РЛ: УИП+СБП512Изучение заживления тонкокишечного анастомоза, наложенного в условиях РГП облученного ГНЛМРГП
РЛ:
УИП+СБП+РТК+ОГНЛ
Продолжение таблицы 2.1
1234613Изучение заживления тонкокишечного анастомоза, наложенного при прогнозировании развития РГПМРГП + РТК
РЛ: УИП + СБП712Изучение заживления тонкокишечного анастомоза, наложенного при прогнозировании развития РГП и облучении ГНЛМРГП + РТК + ОГНЛ РЛ: УИП+СБП
Наблюдение за животными проводилось каждые 8 часов. Погибшие до 5-х суток животные вскрывались, при этом забирались для исследования кусочки тканей (печени, тонкой кишки). Зона анастомоза, в случае его наложения, удалялась отступя 5 см в обе стороны вместе с брыжейкой. Исходя из среднего срока развития несостоятельности анастомозов оставшиеся в живых животные выводились из опыта передозировкой эфира на 5 сутки.
Участки кишки с анастомозами подвергались подводной пневмопрессии по разработанной нами схеме (рис.2.1). Для этого один из концов кишки (рис.2.1, поз.1) с испытуемым анастомозом (поз.4) на протяжении 1 см заворачивался на 180? и зажимался металлической клипсой - зажимом Мора (поз.8), который являлась одновременно и грузом. В свободный конец кишки вводилась трубка (поз.2) из жесткого пластика (фторопласт, поливинилхлорид), на которой при помощи лигатуры жестко фиксировалась кишка. К трубке присоединялась система нагнетания и регистрации, состоявшая из резиновой груши с клапаном (поз.6), пружинного манометра (поз.3) и тройника (поз.5), от аппарата для измерения артериального давления.
Рис. 2.1. Схема изучения прочности тонкокишечного анастомоза
1. отрезок кишки с испытуемым анастомозом;
2. трубка для подачи воздуха;
3. пружинный манометр;
4. зона анастомоза;
5. тройник;
6. резиновая груша с клапаном;
7. стеклянный сосуд с водой;
8. зажим Мора;
Затем испытуемый отрезок кишки погружался в стеклянную прозрачную емкость с водой (рис.2.1, поз.7) и в него при помощи груши нагнетался воздух. При появлении просачивания пузырьков воздуха из линии анастомоза фиксировались показания манометра. Во избежание погрешности, наложение груза-клипсы производилось всегда на одном расстоянии от линии анастомоза, а стеклянная емкость (стандартная банка объемом 0,2 л) наполнялась до краев, чем обеспечивалась постоянная глубина погружения анастомоза и, тем самым, постоянное давление столба воды.
Материал для электронно-микроскопического исследования - кусочки печени и участок тонкой кишки в зоне анастомоза - забирали либо после гибели животных, либо после вывода их из эксперимента на 5-е сутки передозировкой эфира.
2.1.2. Характеристика стендового эксперимента. Задачей стендового эксперимента являлось испытание устройств для временного закрытия несформировавшихся кишечных свищей. Основные сложности обтурации заключаются в установлении такого взаимодействия механического устройства (обтуратора) с биологическим объектом (кишка человека), при котором выполнение функции первого не имеет отрицательных последствий для второго. В связи с этим были обобщены механизмы действия на кишечную стенкубольшинства конструкций обтураторов описанных в литературе. При этом оказалось, что большинство подобных устройств можно отнести к трем группам.
Первый тип обтураторов (Рис.2.2) в своей основе имеет обеспечение герметизма киш