СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕИ
ГЛАВА 1 .ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Фермент микробного происхождения циклодекстринглюканотрансфераза
1.2. Циклодекстриногенные бактерии.
1.2.1. ii
1.2.2. i i
1.2.3. Алкалофильньте бациллы
1.2.4. Продуценты ЦГТазы, развивающиеся при нормальных
значениях .
1.2.5. Термотолерантные циклодекстриногены.
1.2.6. Продуценты ЦГТаз, не относящиеся к порядку i
1.3. Выбор продуктивного штамма для процессов получения ЦГТазы
1.3.1. Источники культур.
1.3.2. Накопительные среды.
1.3.3. Дополнительный анализ выделенных штаммов
1.4. Питательные среды для культивирования микроорганизмовпродуцентов ЦГТаз.
1.4.1. Источники углерода
1.4.2. Источники азота.
1.4.3. Источники фосфора.
1.5. Физикохимические свойства бактериальных ЦГТаз.
1.6 Структура ЦГТаз.
1.7. Реакции катализируемые ЦГТазами
1.7.1. Реакция циклизации
1.7.2. Реакция диспропорционирования.
1.7.3. Реакция связывания
1.7.4. Гидролитическая декстринизирующая активность.
1.7.5. Суммарная схема реакции
1.8. Методы выделения и очистки ЦГТаз
1.8.1. Ультрафильтрация.
1.8.2. Осаждение органическими растворителями.
1 .Б.З.Высаливание
1.9. Хроматографические методы очистки ЦГТаз.
1.9.1. Гидрофобная хроматография
1.9.2. Ионообменная хроматография.
1.9.3. Металлохелат аффинная хроматография
1.9.4. Аффинная хроматография. Синтез аффинных сорбентов с использованием ЦЦ.
1 Строение, свойства, методы получения ЦЦ и комплексов включений.
11. Строение ЦД.
12. Свойства ЦЦ
13. Методы получения ЦД.
13.1. Типы субстратов для получения ЦД.
13.2. Методы предобработки субстратов
14. Комплексывключения с ЦД
14.1. Получение комплексов в водных растворах ПД.
1 Применение ЦД в пищевой промышленности
ГЛАВА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Объекты, материалы и методы исследований.
2.1.1. Объект исследования
2.1.2. Питательные среды
2.1.3. Крахмал, используемый для циклизации.
2.1.4. Ферментные препараты.
2.1.5. Ароматические вещества, используемые для получения комплексов включений с хЦД.
2.1.6. Препарат аЦД
2.1.7. Приборы
2.1.8. Методы.
2.1.8.1. Определение вязкости растворов крахмала.
2.1.8.2. Определение РВ по методу ШомодьиНельсона.
2.1.8.3. Определение декстрозного эквивалента
2.1.8.4. Определение белка по методу Лоури.
2.1.8.5. Определение содержания влаги в образцах навесок исследуемого вещества
2.1.8.6. Методы определения ферментативных активностей.
2.1.8.6.1. Качественное определение аЦГТазной активности методом Т ильденаХадсона.
2.1.8.6.2. Количественный метод определения активности аЦГТазы
2.1.8.6.3. Определение амилолитической активности
фотоколориметрическим методом.
2.1.8.6.4. Измерение активности РЦГТазы фенолфталеиновым методом.
2.1.8.6.5. Определение протеолитической активности
модифицированный метод Ансона.
2.1.8.7. Концентрирование культуральной жидкости методом ультрафильтрации
2.1.8.8. Осаждение ферментов органическими растворителями
2.1.8.9 Получение лиофилизированных ферментных препаратов
2.1.8 Электрофорез.
2.1.81. Изучение степени чистоты фермента с помощью дискэлектрофореза
2.1.8 Диализ.
2.1.8 Методы определения физикохимических параметров аЦГТазы.
2.1.81. Определение рНстабильносги аЦГТазы
2.1.82. Определение термостабильности аЦГТазы
2.1.83. Определение оптимумов действия аЦГТазы
2.1.84. Определение температурного оптимума действия аЦГТазы.
2.1.85. Определение влияния ЭДТА и ионов металлов на активность аЦГТазы.
2.1.86. Определение аминокислотного состава белка
2.1.8 Хроматографические методы очистки аЦГТазы
2.1.81. Гидрофобная хроматография
2.1.82. Синтез аффинных сорбентов аЦД ссфароза 4В.
2.1.83. Аффинная хроматография аЦГТазы.
2.1.8 Определение ЦЦ методом высокоэффективной жидкостной хроматографи и..
2.1.9. Оптимизация состава питательной среды с использованием метода аддитивнорешетчатого математического описания объекта.
2.1 Рецептура кондитерских изделий конфеты Помадка сахарная и Помадка сливочная, приготовленных с добавлением комплексов
включений.
2.2. Результаты исследований и их обсуждение
2.2.1 Скрининг ЦГТактивных культур микроорганизмов из природных мест обитания.
2.2.2. Исследование фенотипических признаков бактериального штамма ..
2.2.3. Филогенетические особенности штамма
2.2.4. Питательные среды, оптимальные для культивирования, поддержания и хранения микроорганизма РаешЬасШиа тасегапэ .
2.2.4.1.Хранение и поддержание культуры РаешЬасШиэ тасегапБ
2.2.4.2. Выращивание культуры РаепЬасш тасегат на жидких питательных средах.
2.2.4.3. Изучение влияния исходной питательной среды на биосинтез аЦГТазы бактериями РаепЬасш тасегат
2.2.4А Разработка способа получения посевного материала.
2.2.4.5. Изучение динамики биосинтеза фермента аЦГТазы бактериями РаепЬасш тасегат на оптимизированной по составу питательной среде
2.2.5. Определение физикохимических свойств неочищенной аЦГТазы РаепЬасш тасегат
2.2.5.1 .Определение рНстабильности аЦГТазы РаепЬасш тасегат
2.2.5.2.0пределение рНоптимума аЦГТазы РаепЬасш тасегат
2.2.5.3.Определение температурного оптимума действия аЦГТазы РаепЬасиБ ьр. .
2.2.5.4. Определение температурной стабильности аЦГТазы РаепЬасш тасегат
2.2.6. Разработка технологии получения ферментного препарата аЦГТазы ГХ из культуральной жидкости продуцента РаепЬасш тасегат 1АМБ.
2.2.6.1.Подбор условий удаления балластных веществ из культуральной жидкости РаепЬасш тасегат 1АМБ.
2.2.6.2.Разработка условий ультрафильтрации для очистки и концентрирования культуральной жидкости РаепЬасш тасегат 1АМБ.
2.2.6.2.1.Подбор мембраны для проведения процесса
ультрафильтрации культуральной жидкости.
2.2.6.2.2. Влияние рабочего давления на процесс
ультрафильтрации культуральной жидкости РаетЬасШш тасегат 1АМБ
2.2.6.2.3. Влияние степени концентрирования раствора аЦГТазы РаетЬасШш тасегат 1АМБ на процесс ультрафильтрации
2.2.6.3. Разработка условий получения осажденного ФП аЦГТазы РаетЬасШш тасегат 1АМБ
2.2.6.3.1.Исследование влияния концентраций различных органических растворителей на выход препарата аЦГТазы РаетЬасШш тасегат 1АМБ
2.2.6.3.2. Влияние различных концентраций этанола об на выход препарата аЦГТазы из УК.
2.2.6.3.3. Влияние на осаждение аЦГТазы из УК культуральной жидкости РаетЬасШш тасегат 1АМБ.
2.2.6.4. Лиофилизация препарата аЦГТазы
2.2.6.5. Исследование физикохимических характеристик ФП аЦГТазы ГХ
2.2.6.5.1 ГХ
2.2.6.5.2 ГХ.
2.2.6.5.
Определение рНоптимума действия препарата аЦГТазы
Определение рНстабильности препарата аЦГТазы
Определение температурного оптимума действия
препарата аЦГТазы ГХ.
2.2.6.5.4. Определение термостабильности препарата аЦГТазы
2.2.6.6.Изучение динамики изменения аЦГТазной активности в процессе биоконверсии крахмала в аЦЦ
2.2.6.7. Анализ микрофлоры ФП аЦГТазы ГХ
2.2.7. Разработка хроматографических приемов очистки аЦГТазы
2.2.7.1. Влияние ионов металлов и этилендиаминтетраацетата на активность аЦГТазы ii тасегат 1АМБ.
.1.2. Очистка аЦГТазы ii тасегат 1ЛМБ с
использованием гидрофобной хроматографии
2.2.7.3. Очистка аЦГТазы с использованием аффинной
хроматографии.
2.2.1 Л Изучение свойств аЦГТазы ii тасегат 1АМБ
2.2.7.4.1. Определение молекулярной массы фермента
2.2.7.4.2. Определение аминокислотного состава белка
высокоочищениого препарата аЦГТазы
2.2.8. Разработка условий ферментативной конверсии крахмала в альфаЦД
2.2.8.1. Исследование поведения 2 растворов крахмала различного типа в процессе термообработки
2.2.8.2. Определение выхода аЦД из различных видов крахмалов
под действием аЦГТазы ii тасегат 1 АМБ.
2.2.8.3. Исследование поведения картофельных крахмалов различных марок в процессе термообработки.
2.2.8.4.Выбор метода разжижения для приготовления концентрированных растворов картофельного крахмала
2.2.8.4.1. Химический гидролиз крахмала.
2.2.8.4.2. Предобработка крахмала ультразвуком
2.2.8.4.3. Ферментативная предобработка крахмала в биотехнологии ЦД
2.2.8.4.3.1.Предобработка крахмала ферментными
препаратами аамилаз
2.2.8.4.3.2. Предобработка крахмала солодовой
вытяжкой
2.2.8.4.3.3. Предобработка крахмала аЦГТазами
2.2.8.5.0пределение выхода аЦД из картофельного крахмала, прсдобработанного различными методами под действием аЦГТазы РаепЬасш тасегат 1АМБ
2.2.8.6. Интенсификация процесса получения ИД с использованием комплексной предобработки крахмала.
2.2.8.6.1. Последовательная предобработка крахмального клейстера УЗ и аЦГТазами РаепЬасш тасегат и РаепЬасш тасегат 1АМБ
2.2.8.7. Лабораторная двухступенчатая схема получения аЦЦ с использованием УЗ и аЦГТазы ГЮХ РаепЬасш тасегат для предобработки крахмального клейстера и аЦГТазы ГХ РаепЬасш тасегат 1ЛМБ для циклизации
2.2.9. Получение комплексов включений ароматических веществ с аЦД.
2.2.9.1 Получение комплекса включения аЦД с кристаллическим ванилином.
.9.2 Получение комплекса включения аЦЦ с эфирным маслом апельсина
2.2 Апробация комплексов включений ароматообразователей с аЦД в технологии помадных конфет.
2.21 .Приготовление кондитерских изделий по традиционной технологии с применением комплексов включений
2.22. Характеристика кондитерских изделий при хранении
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Київ+380960830922