1
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 3
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8
ГЛАВА 1. Сапрофитическое существование патогенных бактерий в ** различных экосистемах 8
1.1. Сапрофитическое существование патогенных бактерий в водных экосистемах 9
1.2. Сапрофитическое существование патогенных бактерий в почве и растениях 12
* 1.3. Влияние абиотических и биотических факторов среды обитания на
выживание патогенных бактерий 15
ГЛАВА 2. Адаптация патогенных бактерий в условиях внешней среды 18
2.1. Адгезия и колонизация бактерий на объектах окружающей среды 18
2.2. Гетероморфизм популяции патогенных бактерий в окружающей
щ среде 21
ГЛАВА 3. Классификация сальмонелл и методы их идентификации 25
3.1. Классификация и свойства сальмонелл 25
3.2. Идентификация сальмонелл 32
3.2.1. Классические методы идентификации 32
^ 3.2.2. Ускоренные методы идентификации 34
3.2.3. Методы идентификации сальмонелл, выделенных из внешней среды 37
СОБСТВЕННЫЕ ИСЛЕДОВАНИЯ 39
ГЛАВА 4. Материалы и методы 39
4.1. Методы выделения, культивирования, изучения выживаемости, культурально-морфологических, биохимических и антигенных свойств музейной культуры Salmonella typhimurium в воде при воздействии абиотических факторов, а также сальмонелл из проб р. Ока 39
4.1.1. Методы выделения, культивирования, изучения выживаемости и
2
биологических свойств музейной культуры сальмонелл в воде 39
4.1.2. Методы выделения, культивирования и изучения биологических свойств сальмонелл из проб воды р. Ока 42
4.2. Методы изучения выживаемости, морфологических и антигенных свойств популяции музейной культуры Salmonella typhimurium в воде
* при взаимоотношении с некоторыми гидробионтами 46
4.2.1. Изучение взаимоотношения популяции сальмонелл с водорослями 47
4.2.2. Изучение взаимоотношения популяции сальмонелл с инфузориями 48
А
4.2.3. Изучение взаимоотношения популяции сальмонелл с червями 48
4.2.4. Изучение взаимоотношения популяции сальмонелл с дафниями 49
ГЛАВА 5. Изучение биологических свойств сальмонелл в воде 51
5.1. Изучение биологических свойств популяции музейной культуры Salmonella typhimurium в воде in vitro 51
щ 5.2. Особенности биологических свойств культуры сальмонелл,
выделенной из проб воды р. Ока 64
ГЛАВА 6. Изучение межпопуляционных взаимоотношений сальмонелл с различными гидробионтами 69
6.1. Межпопуляционные взаимоотношения сальмонелл с водорослями 69 ^ 6.2. Межпопуляционные взаимоотношения сальмонелл с инфузориями 74
6.3. Межпопуляционные взаимоотношения сальмонелл с червями 77
6.4. Межпопуляционные взаимоотношения сальмонелл с дафниями 80
ОБСУЖДЕНИЕ 87
ВЫВОДЫ 98
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 100
ПРИЛОЖЕНИЕ 114
выживании в водной среде. В литературе имеется целый ряд сообщений о том, что водоросли способны являться ассоциантами бактерий [21]. Описаны даже случаи увеличения количества острых кишечных инфекций у людей с ростом биомассы пирофитовых, зеленых и сине-зеленых водорослей в водоемах [37]. Количество микроорганизмов, значительно превышающих допустимые нормы, наблюдалось при их совместной контаминации с зоопланктоном питьевой воды [114].
Такие простейшие, как инфузории и амебы также способны поддерживать численность как грамотрицательных, так и грамположительных патогенных бактерий различных семейств. Характер их взаимоотношений не сводится к хищничеству, а имеет сложную симбиотическую природу [66]. Инфузории поддерживают существование разных видов бактерий - иерсиний, псевдомонад, листерий, эризипелотриксов. Особенно ярко это проявляется в нестерильных субстратах (почве, воде), где в отсутствии простейших
бактериальная популяция интенсивно подавляется микробным сообществом, тогда как в ассоциации с инфузориями наблюдается более высокая их численность и устойчивое существование в течение длительного времени. При анализе ультраструктурных механизмов взаимодействия свободноживущих инфузорий с патогенными бактериями, автором установлен ряд общих
закономерностей. Наиболее важная из них - выживание и размножение устойчивых к перевариванию микробных клеток в организме простейших, что определяет незавершенный характер фагоцитоза, вызывая в итоге гибель хозяев [66].
Известны связи патогенных бактерий с водными беспозвоночными. Так, холерные вибрионы в прогретой до 30°С воде интенсивно прикреплялись к веслоногим ракообразным - циклопам [111, 112]. Хитин явно способствует выживанию вибрионов и стимулирует их размножение [116, 130], с чем,
возможно, и связана колонизация вибрионами ракообразных [113].
Неагглютинирующиеся холерные вибрионы были изолированы от креветок [129], в том числе пораженных «слепой болезнью», причем этиологическая
роль вибрионов в этом случае доказана экспериментально. Из устриц изолировали холерных вибрионов, сальмонелл и эшерихий, причем вибрионы обнаружены в 20% устриц, а содержание эшерихий в устрицах было в 7,3 раза выше, чем в воде [103]. Экспериментальными исследованиями в опыте с различными гндробионтами (инфузориями, моллюсками, ракообразными, земноводными и рыбами) было показано, что У.сИо1егае также является автохтонным обитателем солоноватых вод [47].
Таким образом, оценивая возможное эпидемическое распространение заболевания, необходим не просто анализ контаминации окружающей среды, но выявление комплексных биогеоценотических условий водоемов, которые способствуют существованию возбудителя.
1.2. САПРОФИТИЧЕСКОЕ СУЩЕСТВОВАНИЕ ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ
В ПОЧВЕ И РАСТЕНИЯХ
Большое значение для развития основных положений экологии бактерий имели работы в области почвенной микробиологии. Возникновение этой области научного знания связано с работами С.Н. Виноградского, который сформулировал представление об автохтонной микрофлоре почвы, куда входят постоянные се обитатели, использующие гумусовые вещества, и зимогенной микрофлоре, представленной быстро развивающимися микроорганизмами, использующими попадающий в почву легко доступный субстрат.
Естественная микрофлора почвы обладает выраженной антагонистической активностью в отношении других микроорганизмов. Этот факт подтверждает известный постулат о внешней среде как о «кладбище» для патогенных бактерий. Действительно, по данным И.А. Максименковой [43] установлено, что в естественной (нестерильной) почве - как в лабораторных экспериментах, так и в полевых условиях - популяция псевдотуберкулезного микроба сохраняет весьма низкий уровень численности, в то время как в аналогичной стерильной почве иерсинии достигают высоких концентраций.
- Киев+380960830922