СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ...........................................................
ГЛАВА 1. Литературный обзор........................................
1.1. Особенности метаболизма лекарственных средств........
1.1.1. Общие сведения о метаболизме лекарственных средств...............................................
1.1.2. Генетический полиморфизм ферментов метаболизма...........................................
1.1.3. Микросомальные ферменты метаболизма лекарственных средств.........................................................
1.1.4. Индукторы и ингибиторы микросомального окисления.............................................
1.1.5. Подсемейство цитохрома Р-450 СУР1Ю............
1.1.6. Подсемейство цитохрома Р-450 СУРША............
1.2. Методы анализа лекарственных средств и их метаболитов..
Выводы по главе....................................................
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ............................................
2.1. Материально-техническое обеспечение для ВЭЖХ-анализа
лекарственных средств и их метаболитов...............
2.2. Характеристика испытуемых............................
2.3. Схема проведения генотипирования.....................
2.4. Тактика фармакокинетического исследования метаболизма
лекарственных средств................................
2.5. Процедура проведения МЕвХ-теста......................
2.6. Расчет фармакокинетических параметров и статистическая
обработка полученных результатов.....................
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований.......................
3.1. ВЭЖХ-анализ лекарственных средств и их метаболитов...
3.1.1. Условия хроматографирования и количественное определение лекарственных средств и их метаболитов в растворах...............................
3.1.2. Изолирование и количественное определение лекарственных средств и их метаболитов в плазме крови.................................................
3.1.3. Методика ВЭЖХ-анализа для проведения МЕОХ-теста............................................
Выводы по главе....................................................
3.2. Влияние различных факторов на активность СУРЗА4......
3.2.1. Изучение полиморфных маркеров гена СУРЗА4.....
3.2.2. Результаты фенотипирования СУРЗА4............,
3.2.3. Определение влияния флуконазола и карбамазепина на активность СУРЗА4..................................
3
3.2.4. Влияние флуконазола на фармакокинетику лекарственных средств, метаболизирующихся
СУРЗА4......................................... 123
3.2.5. Влияние времени суток на активность СУРЗ А4 165
3.2.6. Влияние различных патологических состояний на активность СУРЗ А4.................................. 168
Выводы по главе................................................. 173
3.3. Генотипирование и фенотипирование СУР2И6........... 174
3.3.1. Изучение полиморфных маркеров гена СУР21)6.. 174
3.3.2. Сопоставление полиморфизма СУР2Е)6 с фармакокинетикой амитриптилина..................... 176
3.3.3. Сопоставление результатов гено- и фенотипирования СУР21)6 с клинической эффективностью метопролола........................................ 184
Выводы по главе................................................ 188
3.4. Изучение фармакокинетики метаболитов лекарственных средств в оценке их эффективности........................ 189
Выводы по главе................................................. 194
Г ЛАВА 4. Обсуждение результатов............................... 195
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ.................................................... 236
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ....................................... 238
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ............................................... 240
ПРИЛОЖЕНИЕ...................................................... 281
32
1.1*5. Подсемейство цктохрома Р-450 СУРНО
Подсемейство цитохрома Р-450 СУРНО включает 1 изофермент -206. Цитохром 206 представляет собой белок, состоящий из 497 аминокислотных остатков. Ген цитохрома 206 находится в 22 хромосоме, локу-се 22ц 13.1. Цитохром 206 обнаружен, в основном, в печени. Цитохром 206 метаболизирует около 20 % всех известных лекарственных средств (таблица 7) [200,203], в том числе нейролептики, антидепрессанты, Р-адреноблокаторы. При этом атом азота субстрата взаимодействует с карбоксильной группой цитохрома 206. Для взаимодействия субстрата с цитохромом 206 расстояние между атомом азота субстрата и атомом кислорода карбоксильной группы должно составлять 5-7 А. Маркерными субстратами, используемыми для фенотипирования цитохрома 206 являются дебризохин, декстрометорфан и спартеин [67,69,74,76,159,206].
Цитохром 206, в отличие от других изоферментов цитохрома Р-450, не имеет индукторов. Ряд ЛС являются ингибиторами цитохрома 206. Наиболее мощным ингибитором цитохрома 206 является пароксетин. Совместное применение субстратов цитохрома 206 с ингибиторами цитохрома 206 приводит к угнетению метаболизма субстратов, следствием чего может быть возникновение побочных эффектов, связанных с применением препаратов - субстратов цитохрома 206, вплоть до интоксикации за счет замедления их клиренса [113,165,254].
Для цитохрома 206 генетический полиморфизм наиболее характерен [62,99,111,144,192,333]. Еще в 1977 году обратили внимание на различие гипотензивного эффекта у больных артериальной гипертензией, применявших дебризохин, препарат из группы а-адреноблокаторов [156]. Тогда же было сформулировано предположение о различии в скорости метаболизма (гидроксилирования) дебризохина у разных индивидуумов [216]. У
»4* 4,4 ■*
33
"медленных" метаболизаторов дебризохина гипотензивный эффект этого препарата был наиболее выражен. Позднее было показано, что у "медленных" метаболизаторов дебризохина замедлен метаболизм и некоторых других ЛС, в том числе фенацетина, нортриптилина, фенформина, спар-теина, энкаинида, пропранолола, гуаноксана, амитриптилина. У "медленных" метаболизаторов по цитохрому 206 наблюдается более выраженный р-адреноблокирукнций эффект антиаритмика пропафенона [199].
Это связано с тем, что пропафенон метаболизируется до 5-гидроксипропафенона, который и обладает р-адреноблокирующим эффектом. 5-гидроксипропафенон метаболизируется цитохромом 206, поэтому у "медленных" метаболизаторов по цитохрому 206 концентрация 5-гидроксипропафенона будет повышена [200].
Таблица 7
Субстраты и ингибиторы цитохрома 206 Субстраты
Алпренолол Имипрамин Морфин Фенацетин
Амитриптилин Карведилол Нортриптилин Фенформин
Амфетамин Клозапин Ондансетрон Флекаинид
Бисопролол Кломипрамин Перексилин Флувоксамин
Буфуролол Кодеин Пропафенон Флуоксетин
Венлафаксин Мапротилин Рисперидон Хлорпромазин
Г алолеридол Мексилетин Спартеин Циклобензаприн
Дебризохин Меперидин Тамоксифен Энкаинид
Дезипрамин Метадон Тимолол
Дексфенфлурамин Метоксиамфетамин Тиоридазин
Доксепин Метопролол Тразодон
Донепезил Минаприн Трамадол
Ингибиторы
Амиодарон Г алоперидол Дезипрамин Кломипрамин Мибефрадил Пароксетин Пропафенон Ритонавир Серталин Тиоридазин Флувоксамин Флуоксетин Флуфеназин Хинидин Циметидин
- Киев+380960830922