РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ
2.1. Матеріали
В роботі використовували тіамін хлорид гідрохлорид (Sigma), тіамінмонофосфат хлорид гідрохлорид тригідрат (Serva), тіаміндифосфат тетрагідрат (Fluka), тетрагідротіамін, піритіамін (Sigma), 5,5?-дитіобіс-2-нітробензойну кислоту (Sigma), цитохром С із серця коня (Serva), K3Fe(CN)6, K4Fe(CN)6, KCl марки ч.д.а., бензил (Chemarol), 4-метилтіазол (Lancaster), 4,5-диметилтіазол (Lancaster), 4-метил-5-(2-гідроксиетил)тіазол (Sigma), 4-амі-но-2,2,6,6-тетраметилпіперидин-1-оксил (Aldrich), додецилсульфат натрію (Sigma), бромистий цетилтриметиламоній (Chemarol).
Солі тіазолію було синтезовано, як описано нижче. Структуру нових сполук доведено даними елементного аналізу, ПМР-спектроскопії або ІЧ-спектроскопії (парамагнітні солі тіазолію). Спектри ЯМР 1Н знято на приладі "Varian VXR-300", (300 мГц), стандарт - ГМДС, ІЧ-спектри - на спектрометрі Specord M-80. При аналізі продуктів методом ВЕРХ використовували рідинний хроматограф та інтегратор CI 100A (Laboratorni pristroje, Чехія) зі спектрофотометричним детектором (254 нм) LCD 2553 (Laboratorni pristroje, Чехія). Електронні спектри і УФ- спектри реєстрували на спектрофотометрі Specord M-40.
3-[(1-Оксил-2,2,6,6-тетраметилпіперидиніл-4)амінокарбонілметил]-4,5-диметилтіазолій хлорид одержано взаємодією 2,2,6,6-тетраметил-4-хлорацетамідопіперидин-1-оксилу (синтезовано за методикою [101]) з 4,5-диметилтіазолом. Суміш 0,31 г (1,8 ммоля) 2,2,6,6-тетраметил-4-хлорацетамідопіперидин-1-оксилу і еквімолярної кількості тіазолу витримували при 110-115оС 1,5 години. Тверду масу, що утворилася, промивали бензолом, діетиловим етером і ацетоном. Продукт реакції очищали на колонці з Silicagel L 40-100. Рухлива фаза: хлороформ-метанол (3:1). ІЧ-спектр 3-[(1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпіперидиніл-4)амінокарбонілметил]-4,5-диметилтіазолій хлориду реєстрували в системі розчинників метанол - хлороформ (1:15), УФ-спектр - в етанолі. Вихід 27%. Т. пл. 167оС (розкл.). ІЧ (n, см-1): 1680 (С=О). УФ [lmax, нм (lge)]: 260 (3,55). Знайдено, %: С 53,04; Н 7,39; N 11,81. C16H26CI N3O2S. Обчислено, %: С 53,37; Н 7,29; N 11,68.
3-[(1-Оксил-2,2,6,6-тетраметилпіперидиніл-4)амінокарбонілметил]-4-метил-5-[2-(адамантил-1-карбонілокси)етил]тіазолій хлорид одержано взаємодією 2,2,6,6-тетраметил-4-хлорацетамідопіперидин-1-оксилу [101] з 4-метил-5-[2-(адамантил-1-карбонілокси)етил]тіазолом. Суміш 0,31 г (1,25 ммоля) 2,2,6,6-тетраметил-4-хлорацетамідопіперидин-1-оксилу і еквімолярної кількості 4-метил-5-[2-(адамантил-1-карбонілокси)етил]тіазолу витримували при 110-115оС 1,5 години. Тверду масу, що утворилася, промивали бензолом, діетиловим етером і ацетоном. Продукт реакції очищали на колонці з Silicagel L 40-100. Рухлива фаза: хлороформ-метанол (3:1). Вихід 33%. Т. пл. 124оС (розкл.). ІЧ (n, см-1): 1769 (С=О). УФ [lmax, нм (lge)]: 258 (3,99). Знайдено, %: С 60,29; Н 7,63; N 7,61. C28H43CIN3O4S. Обчислено, %: С 60,79; Н 7,84; N 7,60.
4-Метил-5-[2-(адамантил-1-карбонілокси)етил]тіазол отримано взаємо-дією 4-метил-5-[(2-гідрокси)етил]тіазолу з хлорангідридом адамантан-1-карбонової кислоти. До розчину 4-метил-5-(2-гідроксиетил)тіазолу з триетиламіном (2 еквіваленти) в бензолі поступово додавали хлорангідрид адамантан-1-карбонової кислоти і витримували 1 год. при кип'ятінні. Осад триетиламоній хлориду відфільтровували, а розчинник випарювали при зниженому тискові. Маслянистий продукт швидко кристалізувався. Вихід 93%. Перекристалізовували з етилацетату. Вихід 84%. Т. пл. 95оС. Знайдено, %: С 36,57; Н 4,15; N 2,27. З17Н23CINО2S. Обчислено, %: С 36,91; Н 4,19; N 2,53. Спектр ЯМР 1Н (CDCI3), ?, м. д.: 1,71-2,0 м (15Н); 2,43 с (3Н); 3,09 т (2Н); 4,22 т (2Н); 8,59 з (1Н).
3-Бензил-4-метил-5-[2-(2-норборноїлокси)етил]тіазолій хлорид одержано взаємодією 4-метил-5-[2-(2-норборноїлокси)етил]тіазолу з хлористим бензилом аналогічно до методики [102, 103] . Суміш вихідних речовин у еквімолярному співвідношенні 1:1,1, відповідно, витримували при 105-110 оС 2,5 год. Продукт реакції промивали ацетоном і діетиловим етером. Очищали нагріванням в метанолі з вугільним порошком. Перекристалізовували з системи розчинників: метанол-ацетон-діетиловий етер (1:20:20) і сушили в пістолеті Фішера над бензолом. Вихід 45%. Т. пл. 168оС. Знайдено, %: С 63,87; Н 7,12; S 8,00; CI 9,25. С21Н26CINО2S. Розраховано, %: С 64,35; Н 6,69; S 8,18; Cl 9,05. Спектр ЯМР 1Н (CD3OD), ?, м. д.: 1,15-1,55 м (10Н); 2,2 c (1H); 2,48 с (3Н); 3,31 т (2Н); 4,32 т (2Н); 5,75 с (2Н); 7,35-7,47 м (5Н).
3-Бензил-4-метил-5-[2-(1-адамантоїлокси)етил]тіазолій хлорид одержано взаємодією 4-метил-5-[2-(1-адамантоїлокси)етил]тіазолу з хлористим бензилом. Реагенти у співідношенні 1:2 (0,02 та 0,04 моля) і 3 мл диметилформаміду витримували при 110оС впродовж 2 год. Продукт висаджували ацетоном та діетиловим етером. Очищали нагріванням в метанолі з вугільним порошком. Перекристалізовували з ацетону (з додаванням метанолу) і сушили в пістолеті Фішера над бензолом. Вихід 36%. Т. пл. 179оС. Знайдено, %: С 66,15; Н 7,43; S 7,12; CI 7,70. С24Н30CINО2S. Розраховано, %: С 66,72; Н 7,00; S 7,42; Cl 8,21. Спектр ЯМР 1Н (DMSO-D6), ?, м. д.: 1,60-1,70 м (12Н); 1,91 с (3Н); 2,37 с (3Н); 3,27 т (2Н); 4,21 т (2Н); 5,85 с (2Н); 7,32-7,42 м (5Н).
3-Бензил-4-метил-5-[2-(2-адамантоїлокси)етил]тіазолій хлорид одержано взаємодією 4-метил-5-[2-(2-адамантоїлокси)етил]тіазолу з хлористим бензилом. 4-Метил-5-[2-(2-адамантоїлокси)етил]тіазол (0,007 моля) і хлористий бензил (0,012 моля) з кількома каплями диметилформаміду витримували при 115оС впродовж 3 год. Маслянистий продукт промивали ацетоном і діетиловим етером. Очищали нагріванням з вугільним порошком. Перекристалізовували з ацетону (з додаванням метанолу та діетилового етеру) і сушили в пістолеті Фішера над бензолом. Вихід 40%. Т. пл. 177оС. Знайдено, %: С 66,50; Н 7,02; S 7,68; CI 8,24. С24Н30CINО2S. Розраховано, %: С 66,72; Н 7,00; S 7,42; Cl 8,21. Спектр ЯМР 1Н (СD3OD), ?, м. д.: 1,5