ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Соответственно цели и задачам работа была разделена на две части –
экспериментальную и клиническую.
Цель экспериментальных исследований состояла в изучении влияния
свободно-радикальных форм кислорода, а также антиоксидантного препарата
Эмоксипина на степень послеоперационной воспалительной реакции и интенсивность
образования основного белка соединительной ткани – коллагена, по уровню
оксипролина – маркерной аминокислоты. Изучались также состояние функциональных
групп белков корнеосклеральных тканей после экспериментальной склеротомии в
условиях повышения окислительной активности, и стимуляция антиоксидантной
системы тканей глаза.
Основная задача клинической части работы заключалась в исследовании возможного
предупреждения избыточного рубцевания при хирургическом лечении больных ПОУГ на
основе действия активных форм кислорода и фотосенсибилизированного воздействия
на функциональные группы белковых структур склеры. В условиях клиники также
было изучено действие антиоксидантного препарата эмоксипина на гидродинамику
глаза, воспалительную послеоперационную реакцию и показатели клинической оценки
репаративной регенерации в зоне проведения антиглаукоматозной операции.
2.1. Материал исследований
2.1.1. Материал экспериментальных исследований. Исследования проводились на 35
кроликах породы Шиншилла, весом 2,0–2,5 кг, которые находились на общем рационе
вивария института в соответствии с общепринятыми нормами.
2.1.2. Материал клинических исследований. Исследование проведено у 84 пациентов
(84 глаза), страдающих декомпенсированной ПОУГ 2–3 стадиями заболевания. В
связи с высоким внутриглазным давлением и некомпенсацией глаукоматозного
процесса всем больным проведено хирургическое вмешательство: антиглаукоматозная
операция – синусотомия с трабекулотомией и базальной иридэктомией. Сроки
наблюдения составляли в среднем более одного года.
2.2. Методы исследований
2.2.1. Методы экспериментальных исследований. Исследования были проведены со
склерой, полученной у 48 больных ПОУГ 2-3 ст., перенесших в связи с
некомпенсацией глаукоматозного процесса при проведении консервативного лечения
синусэктомию, трабекулотомию с базальной иридэктомией.
Всем больным было проведено общее офтальмологическое обследование, а также ряд
биохимических исследований, для которых использовались образцы ткани,
иссеченной во время проведения операции синусотрабекулотомии.
Образцы ткани подвергали воздействию свободно-радикальных форм кислорода путем
инкубации в смеси, включающей ксантиоксидазу и гипоксантин, перекись водорода,
комбинацию указанных препаратов, а также в отдельной смеси с использованием
ингибитора каталазы аминотриазола. Эксперименты по фотосенсибилизированному
облучению проводили с включением в состав инкубационной смеси 0,5% раствора
рибофлавина с 45 минутным облучением полихромным светом. Длительность всех
инкубаций в растворах, содержащих системы, генерирующие активные формы
кислорода, также составляла 45 мин. Контрольные образцы ткани инкубировались в
смеси, не содержащей активных форм кислорода и находящейся в темноте. После
инкубации в белках ткани склеры производили определение следующих
функциональных групп: сульфгидрильные, дисульфидные, карбоксильные и
аминогруппы. Для определения концентраций указанных групп использовали
высокоспецифические методы спектрофотометрии. Полученные результаты
обрабатывали статистически с использованием критерия Стьюдента.
Примененная методика оперативного вмешательства состояла в следующем: после
проведения акинезии, эпибульбарной и ретробульбарной анестезии, производилась
отсепаровка конъюнктивы глазного яблока от лимба в верхних квадрантах. После
чего, соответственно 12 часам, перпендикулярно лимбу, производились 2
параллельных разреза склеры, отстоящие друг от друга на расстоянии в 5,0 мм.
При помощи ножа-расслаивателя склера между разрезами расслаивалась с
последующим расслоением лимба и склеры в проекции нанесенных разрезов с
образованием квадратного склерального кармана шириной 5,0 мм и длиной 6,0 мм,
глубина расслоения склеры составляла 2/3 ее толщины, что соответствует
параметрам склеротомии, производимой в процессе проведения антиглаукоматозных
операций.
После окончания оперативного вмешательства в конъюнктивальный мешок
оперированного глаза инстиллировали 30% раствор сульфацила натрия, под
конъюнктиву вводился раствор антибиотика. В последующем животные 2–ой основной
группы получали в инстилляциях раствор эмоксипина.
Животные 1-ой основной группы получали инстилляции 2% раствора гипоксантина,
содержащего 0,2% ксантиноксидазы и 0,2% аминотриазола. Как показано в нашем
предыдущем исследовании, указанная смесь, приводящая к образованию
свободно-радикальных форм кислорода, оказывала наиболее сильное воздействие на
функциональные группы белков соединительной ткани склеры больных
открытоугольной глаукомой.
Степень выраженности послеоперационной воспалительной реакции оценивалась
полуколичественно в баллах на основе учета выраженности основных признаков
воспалительного процесса, возникающего в ответ на хирургическую травму склеры.
Оценка степени послеоперационной воспалительной реакции проводилась по
следующей схеме:
1 балл – коньюнктивальная инъекция сосудов, перикорнеальная инъекция сосудов,
ирритация в пределах физиологической нормы.
2 балла – конъюнктивальная инъекция выражена в области склерального разреза и
отсутствует на остальном протяжении конъюнктивы, перикорнеальная инъекция
сосудов умеренно выражена в проекции склерального ра
- Київ+380960830922