РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
Для вирішення задач дослідження провели аналіз (з 1990 р. по 1999 р. - ретроспективний, а з 2000 р. по 2006 р. - проспективний), захворюваності на ГРВІ та НП особового складу військовослужбовців строкової служби одного із навчальних центрів ЗС України. Захворюваність ГРВІ та НП визначалась як кількість випадків захворювання на 1000 військовослужбовців.
Найбільший пік захворюваності на ГРВІ та НП був відмічений у 2000 році під час двох спалахів. Перший, весняно-літній, з травня по серпень, кількістю 367 випадків. Другий, осінньо-зимовий, з жовтня по грудень, кількістю 212 випадків.
Контингент в обох випадках - молоді військовослужбовці одного навчального центру, одного віку - 18-20 років, із спільними, однаковими умовами проживання, харчування, прально-лазневого обслуговування, дозвілля, та різних видів військової праці з цілодобовим контактом.
Для аналізу використовувалися епідеміологічні, клінічні, лабораторні методи етіологічної діагностики.
В епідеміологічному плані досліджувалися епідпрогноз, особливості виникнення і поширення інфекції, її тривалість. В клінічному плані - дослідження симптомів і синдромів хвороби, поширеність і повторюваність їх серед контингентів. В лабораторному плані це бактеріологічні і серологічні методи дослідження, за алгоритмом рис. 2.1.
З метою швидкого (протягом доби) визначення етіології ГРВІ досліджували змиви з носоглотки за домопогою методики імунофлюоресценції у 19 хворих І спалаху і 16 хворих ІІ спалаху.
Бактеріологічні методи дослідження мокротиння проводилися згідно із рис. 1.1, з подальшим посівом на відповідні живильні середовища. Серологічні дослідження проведені в лабораторії Центру Державного санітарно-епідеміологічного нагляду Збройних Сил України, м. Київ. При виконанні серологічних досліджень використовували стандартні діагностикуми, які мають дозвіл МОЗ України на використання на території України.
Рис. 2.1 Алгоритм бактеріологічного і серологічного дослідження етіології пневмоній
Досліджувалися 192 парні сироватки у першому спалаху і 164 парні сироватки у другому - для визначення титрів антитіл до грипу, парагрипу, аденовірусу, РС-вірусу в реакціях РІГА, РЗК.
Перша сироватка забрана в перші дні захворювання, друга - в кінці перебігу хвороби, але не раніше 14 днів від першого забору.
РІГА використовувалася для діагностики грипу і парагрипу. Механізм РІГА грунтується на інгібіції гемаглютинаційної активності вірусу в присутності специфічних антитіл. Це трикомпонентна серологічна реакція, що крім специфічно взаємодіючих антигена і антитіла, має індикатор імунологічної реакції - еритроцити [129].
Використовувалися наступні діагностикуми:
1. Діагностикум вірусу грипу (антигенно актуальний) типу А /Н1 N1/, для РІГА, сухий, випуск - НДІ грипу РАМН, ТОВ "ППДП" С.-Петербург, (введений за разовим дозволом), титр в РГА 1:128, серія №26 к. №244, термін дії до 05.2001 р.
2. Діагностикум вірусу грипу (антигенно актуальний) типу А /Н3 N2/, для РІГА, сухий, випуск - НДІ грипу РАМН, ТОВ "ППДП" С.-Петербург, (введений за разовим дозволом), титр в РГА 1:128, серія №31 ОБТК №272, термін дії до 07.2001 р.
3. Діагностикум вірусу грипу типу В для РІГА, сухий, випуск - НДІ грипу РАМН, ТОВ "ППДП" С.-Петербург, (введений за разовим дозволом), титр в РГА 1:160, серія №15 к. №256, термін дії до 05.2001 р.
4. Діагностикум парагрипозний типу І для РІГА, сухий, випуск - НДІ грипу РАМН, ТОВ "ППДП" С.-Петербург, (введений за разовим дозволом), титр в РГА 1:128, серія №164 к. № 143Д, термін дії до 12.2001 р.
5. Діагностикум парагрипозний типу ІІ для РІГА, сухий, випуск - НДІ грипу РАМН, ТОВ "ППДП" С.-Петербург, (введений за разовим дозволом), титр в РГА 1:128, серія №156 к. № 232Д, термін дії до 12.2001 р.
6. Діагностикум парагрипозний типу ІІІ для РІГА, сухий, випуск - НДІ грипу РАМН, ТОВ "ППДП" С.-Петербург, (введений за разовим дозволом), титр в РГА 1:128, серія №128 к. № 232Д, термін дії до 06.2001 р.
РЗК використовувалася для діагностики аденовірусної та РС-вірусної інфекції. В ній беруть участь дві системи антиген - антитіло: специфічна і гемолітична. Специфічна система являє собою відомий антиген (діагностикум) і сироватку крові хворого, яка містить специфічні антитіла. Якщо антиген і антитіло гомологічні, вони утворюють специфічний невидимий комплекс, що адсорбує на собі комплемент. Адсорбцію комплементу на специфічному комплексі можна виявити лише за допомогою гемолітичної системи, що є індикатором першої фази реакції. Гемолітична система складається з антигена (еритроцити барана) та імунної сироватки до нього. Гемоліз еритроцитів у гемолітичній системі настає лише за наявності вільного комплементу [129].
Використовувалися наступні діагностикуми:
1. Діагностикум аденовірусний для РЗК, сухий, випуск - НДІ грипу РАМН, ТОВ "ППДП" С.-Петербург, (введений за разовим дозволом), титр в РГА 1:64, серія №25 к№ 245Д, термін дії до 12.2001 р.
2. Діагностикум РС-вірусний для РЗК, сухий, випуск - НДІ грипу РАМН, ТОВ "ППДП" С.-Петербург, (введений за разовим дозволом), титр в РГА 1:32, робоче розведення 1:4, серія №32 к№ 237Д, термін дії до 09.2001 р.
Для серологічного підтвердження етіології пневмоній використовувалася реакція латекс-аглютинації для виявлення пневмококових антигенів в сироватці крові хворих. Реактиви набору представляють собою взвісь латексних часток, сенсибілізованих моноклональними антитілами кролика, специфічними до Streptococcus pneumoniae. В присутності достатньо високої концентрації антигену, латекс вступає в реакцію аглютинації з антигеном і утворює агрегати, видимі неозброєним оком. Якщо специфічний антиген відсутній, то агрегати не утворюються, і латекс зберігає свій, дещо молочний вигляд [189].
Основними методами дослідження клінічних про