ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Экспериментальное исследование проведено на 240 белых беспородных
крысах-самцах, полученных из вивария Луганского государственного медицинского
университета. Во время эксперимента лабораторные животные содержались в
соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите
позвоночных животных, используемых для эксперимента и научных целей (Страсбург,
1986 г.) [[cclxiii],], в соответствии с принципами Хельсинской декларации,
принятой Генеральной ассамблеей Всемирной медицинской ассоциации (1964-2000
гг.), «Общими этическими принципами экспериментов над животными», утверждёнными
І Национальным конгрессом по биоэтике (Киев 2001). Эксперимент проводился в
осеннее-зимний период года. В эксперимент отбирали минимально допустимое для
статистической обработки и получения достоверных результатов общепринятое
количество животных (6 в каждой группе). До и после эксперимента крысы
находились в помещении вивария при температуре воздуха 20-25°С, влажности не
более 50%, световом режиме день/ночь в стандартных пластиковых клетках (не
более 6 особей в каждой), на стандартном рационе. Доступ к воде был свободным.
В ходе эксперимента проводились наблюдения за динамикой массы тела, состоянием
шерсти и двигательной активности подопытных животных каждые десять дней
[[cclxiv]]. При ежедневном наблюдении за общим состоянием и поведением животных
отклонений не выявлено.
Экзогенная гипертермия создавалась при помощи термической камеры,
сконструированной сотрудниками кафедры анестезиологии и реаниматологии
Луганского государственного медицинского университета (авторское свидетельство
№1452526 А1 на изобретение «Тепловая токсикологическая камера» - Можаев
Геннадий Александрович, Гридин Виктор Сергеевич, Чолак Эдуард Олегович, Ивонин
Евгений Александрович, Красовский Олег Юрьевич, Гарькавец Сергей Иванович)
(схема 1).
Схема 1.
Камера была усовершенствованна сотрудниками кафедры анатомии человека
В.В.Овчаренко и Е.Ю. Бибик «Климатическая камера с телеконтролем и
телеуправлением» [[cclxv]]. Камера представляет собой шкаф в виде куба с длиной
ребра 200 мм (Рис. 2.1).
Рис. 2.1.
Стенки камеры состоят из двух слоёв листового железа, пространство между
которыми заполнено термоизолирующим материалом. Камера оснащена герметичными
дверями (1.1), окном наблюдения(1.2) и вентиляционным устройством (1.3).
Нагревающие элементы (1.4) получают ток напряжением 220В через коммутирующие
электронное устройство на базе семистора высокого напряжения. Для контроля
климатических показателей камера оборудована модулем дистанционного контроля,
схема которого базируется на современных электронных приборах: микропроцессоре
PIC и электронных датчиках влажности, температуры воздуха, атмосферного
давления, СО2, а также компьютера с подключенной к ней веб-камерой как
коммутирующего модуля. Датчики (1.5) в виде отдельного блока расположены внутри
камеры, после усиления сигнал поступает к микропроцессорному блоку (1.6) на
базе микропроцессора PIC 16F625, расположенного снаружи. Сигналы с датчиков в
реальном времени переводятся в цифровую форму АЦП микропроцессора и через СОМ
порт передаются на персональный компьютер (1.7). Специально разработанное
программное обеспечение «CameraPower», созданное в среде разработки «Delphi»,
анализирует полученную информацию и через коммутирующее устройство руководит
нагревающими элементами и вентиляционными устройствами (1.3), а также
освещением в камере в зависимости от избранного режима. Объём камеры достаточно
значительный, поэтому температура воздуха измеряется на различных вертикальных
уровнях и при разнице показателей датчиков. После анализа информации через
коммутирующее устройство (1.8) включается вентилятор для смешивания слоёв
воздуха внутри камеры. Кроме этого, по протоколу ТСР/IP, по сети (1.9)
информация о состоянии в камере передаётся на отдалённый компьютер (1.10), с
которого ведётся общий контроль над ходом эксперимента. С помощью программы
«CameraPower» устанавливаются режимы работы камеры, при достижении заданной
температуры включается отсчёт времени экспозиции, при окончании времени
проводится вентиляция для снижения температуры в камере до комнатной. Кроме
температурных режимов устанавливается стандартный световой режим (день/ночь).
Также, к компьютеру, контролирующему работу климатической камеры, подключена
веб-камера (1.11), транслирующая изображение животных, пребывающих в условиях
гипертермии на отдалённый компьютер для контроля состояния, поведения животных
и общего хода эксперимента.
В эксперименте исследовались исключительно половозрелые крысы (таб. 2.1).
Животных этой серии подразделяли на группы в зависимости от действующих на них
агентов.
Таблица 2.1.
Схема эксперимента
Группа
Вид воздействия
Количество животных в группах по срокам реадаптационного периода
Всего
240
15
30
60
Контроль
30
УХГ
30
СХГ
30
ЭХГ
30
СХГ+ФН
30
ЭХГ+ФН
30
СХГ+инозин
30
ЭХГ+инозин
30
Первую группу (1) составили контрольные крысы, которые также находились в
термокамере в течение 5 часов при температуре 21°С. Во вторую группу (2) вошли
животные, перенесшие умеренную хроническую гипертермию (39,6-40,9 °С). В третью
группу (3) вошли животные, подвергшиеся хронической гипертермии средней тяжести
(42,0-43,1°С). Животные, подвергшиеся экстремальной хронической гипертермии
(44,1-45,3°С) вошли в четвёртую групп