ГЛАВА 2
ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ БОЛЬНЫХ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Клиническая характеристика обследованных больных
Нами проведено комплексное обследование 234 больных с НСХЦИ, которые включали: начальные проявления недостаточности кровоснабжения мозга (НПНКМ) и дисциркуляторную энцефалопатию (ДЭ I ст.) [2, 187].
В основании распределения лежит существующая в Украине классификация сосудистых поражений головного и спинного мозга. Выделенные группы соотвествуют рубрикам МКБ Х - гипертензивная энцефалопатия (I 67.4), церебральный атеросклероз (I 67.2), другие уточнённые поражения сосудов головного мозга (І 67.8).
Из них обследовано с начальными проявлениями недостаточности кровоснабжения мозга (НПНКМ) 102 чел., с гипертонической дисциркуляторной энцефалопатией I ст. (ГДЭ I ст.) - 60 чел., у 72 больных имела место атеросклеротическая дисциркуляторная АДЭ I ст. Диагноз гипертонической болезни устанавливался согласно критериям ВОЗ (1999): мягкая гипертензия (систолическое АД = 140-159 мм рт. ст., диастолическое АД = 90-99 мм рт. ст.), умеренная гипертензия (систолическое АД = 160-179 мм рт. ст., диастолическое АД = 100-109 мм рт. ст). Согласно данной классификации у 74 (82,2 %) больных дисциркуляторная энцефалопатия была обусловлена мягкой АГ, а у 16 (17,8 %) больных - умеренной АГ.
Для сравнительной характеристики в процессе проспективного лонгитудинального исследования (1997-2003 гг.) изучены показатели 68 больных, в том числе 38 больных АДЭ ІІ ст. и 30 больных ГДЭ ІІ ст. Контролем служили 25 практически здоровых людей в возрасте 39-50 лет (табл. 2.1).
Таблица 2.1Группы обследованных больных и их распределение по полу и возрастуГруппа обследованныхЧисло обследо-
ванныхПол Всегомуж.жен.Контрольная группа25131225Больные НПНКМ102от 39 до 44 лет41261541от 45 до 59 лет61313061Больные с начальной стадией (I ст.) ГДЭ:60от 39 до 44 лет5325от 45 до 59 лет55203555Больные с начальной стадией (I ст.) АДЭ:72от 39 до 44 лет431 от 45 до 59 лет68363268Больные с АДЭ II ст.38231538Больные с ГДЭ ІІ ст.30131730Всего:327168159327
Частота симптомов (Р) вычислялась по формуле (2.1):
, (2.1)
где n - число больных с выявленными нарушениями,
N - общее число больных в группе.
Кроме клинических и инструментальных (ЭЭГ, РЭГ, транскраниальная допплерография, в ряде случаев - ЯМРКТ головного мозга) исследований нами проведено изучение патохимических изменений эритроцитов у больных НСХЦИ, взятых у больных натощак из кубитальной вены. В эритроцитах определяли агрегационную способность, деформируемость, динамику макроэргов (АТP и 2,3-DPG), степень нарушения транспорта ионов (Na+, К+, Са2+), особенности морфологии клеток и соотношение в мембранах холестерина и фосфолипидов, состояние процессов ПОЛ и активность антиокислительных ферментов, содержание циклических нуклеотидов, энтотелина-1, N2O и ФНО-? в сыворотке крови.
2.2. Морфофункциональные методы исследования
2.1.1. Определение агрегации эритроцитов. Агрегацию эритроцитов определяли согласно И.И. Маврову, Б.И. Каруне [131] фотометрическим методом и при помощи фазово-контрастной микроскопии. Качественно (по микрофотографиям) определяли спонтанную агрегацию эритроцитов с использованием микроскопа МБИ-13, при этом учитывали, согласно И.И. Маврову, Б.И. Каруне [131], размеры агрегатов, их формы, качество эритроцитов в состоянии агрегации.
2.1.2. Определение деформируемости эритроцитов. Этот показатель клеток исследовали по методике Г.Я. Левина и Ю.А. Шереметьева [125], основанной на измерении времени фильтрации суспензии через микропористые фильтры. Увеличение времени фильтрации свидетельствует о нарушении деформируемости эритроцитов, о повышении их ригидности.
2.1.3. Электронно-микроскопические исследования эритроцитов. Для исследования в сканирующем электронном микроскопе фиксированные и высушенные образцы эритроцитов напыляли в вакуумной установке слоем угля и серебра, толщиной 30 мм и просматривали в растровом электронном микроскопе "Mini-Sem 5" (Япония) при ускоряющем напряжении 10 kV и углом наклона образца (?) - 20-300.
По микрофотографиям с помощью системы критериев, разработанной с учётом формы, поверхности клеток и характера взаимодействия эритроцитов осуществлялась количественная оценка морфологических свойств эритроцитов и вырабатывался показатель морфологии по критериям В.И. Старикова, Х.К. Жалилова (1981) как описано у И.И. Маврова и Б.И. Каруна [131] (табл. 2.2).
Таблица 2.2
Система критериев оценки морфологии эритроцитов для получения общего показателя морфологии (по В.И. Старикову и Х.К. Жалилову, 1981)
Объект обследованияКритерииГрадация критериевБаллыФормаШиповидные эритроцитыЕдиничные1эритроцитовнормоцитыМножественные2дискоцитыЕдиничные2множественные2эритроциты типаЕдиничные3вздутого мячамножественные4эллипсоидныеЕдиничные4множественные5игольчатые сфероцитыЕдиничные5множественные6АсимметричныеЕдиничные1эритроцитымножественные2ДеформированныеЕдиничные3эритроцитымножественные4ДеструктивныеЕдиничные5эритроцитымножественные6ПоверхностьШероховатаяумеренно выраженная2эритроцитарезко выраженная3Продолжение табл. 2.2Складчатаяумеренно выраженная3резко выраженная4Характер
взаимодействияЧисло эритроцитов1-10 эритроцитов1 в отдельных агрегатах11-20 эритроцитов2Ветвистые агрегатыЕдиничные3множественные4Шаровидные агрегатыЕдиничные5множественные6Плазматическиенитевидные4мостикиМассивные Для изучения ультраструктурных характеристик мембран эритроцитов нами применен электронно-микроскопический метод замораживания-скалывания (криофрактография). Реплики со сколов эритроцитов просматривали и фотографировали с помощью электронного микроскопа ЭМВ-100 БР при ускоряющем напряжении 75 kV.
2.3. Патобиохимические методы исследования