РОЗДІЛ 2
МЕТОДИКА І УМОВИ ПРОВЕДЕННЯ ДОСЛІДІВ
Досліди проведені на клінічно здорових тваринах і птиці. Зокрема на великій рогатій худобі (повновікових коровах, 18-місячних телицях і бичках) чорно-рябої породи, на повновікових вівцематках породи прекос (закарпатський тип) і на гусях оброшинської сірої породи.
Досліджували вплив фітоестрогенного тла раціону в поєднанні з парентерально уводимим естроном на вміст та форму цис-18:2 в організмі, молочну продуктивність і відтворювальну здатність корів. Для цього, 2 групи корів (по 16 голів в кожній) в літній період утримували на одних і тих же пасовищах з різною кількістю конюшини білої в травостої (структура і поживність раціонів дана в табл.2.1.1). Для створення таких пасовищ ділянку засівали одинаковою травосумішкою (конюшина біла, райграс пасовищний, вівсяниця лучна і тимофіївка лучна). Однак, на одну половину пасовища одноразово весною вносили фосфорно-калійні добрива - Р90К90, а на другу - азотно-фосфорно-калійні добрива -N60P90K90 плюс азотні -N60 після І, ІІ і ІІІ циклів випасання. В результаті, на першій половині пасовища в травостої значну частку складали бобові (25,2-41,7%), а на другій - травостій складався переважно із злаків (84,3-99,7%). Різна кількість бобових в травостої створювала різне фітоестрогенне тло.
В зимово-стійловий період різне фітоестрогенне тло раціону корів створювали шляхом включення в його склад кормів: одній групі з переважанням бобових, а другій - злакових.
Із кожної групи відібрали 8 корів, у яких проявились симптоми І-ої охоти (характеристика піддослідних тварин дана в табл.2.1.2). На 14-18-й день після прояву таких симптомів чотирьом коровам із кожної групи почали внутрішньом`язово вводити олійний розчин естрону в дозі 10000 мишачих одиниць, а іншим чотирьом - 1 мл оливкової олії. Вводили 15 днів підряд. Корів виділених для досліду в І-у охоту не осіменяли. На 16-й день від початку введення естрону у корів до ранкової годівлі відібрали зразки вмістимого рубця і крові із яремної вени. Крім того, відібрали зразки кормів і середньодобові зразки молока і калу.
Таблиця 2.1.1.
Структура і поживність раціонів з різним фітоестрогенним тлом
Показники
Вміст
Раціон з низьким фітоестрогенним тломСклад раціону :
трава пасовищна (маса конюшини білої в травотої 6,3%), кг
комбікорм, кг
трав'яне борошно конюшинне, кг
В раціоні міститься :
кормових одиниць, кг
перетравного протеїну, г
безазотових екстрактивних речовин, г
клітковини, г
цукру, г
кальцію, г
фосфору, г
каротину, г-3
65,0
3,0
1,5
13,3
1621,4
4982,6
2638,8
1376,4
118,5
44,1
1,930
Раціон з високим фітоестрогенним тломСклад раціону :
трава пасовищна (маса конюшини білої в травотої 29,4%), кг
комбікорм, кг
трав'яне борошно злакове, кг
В раціоні міститься :
кормових одиниць, кг
перетравного протеїну, г
безазотових екстрактивних речовин, г
клітковини, г
цукру, г
кальцію, г
фосфору, г
каротину, г-3
60,0
3,0
2,0
13,3
1605,1
5011,4
2670,2
1446.7
116,0
42,5
1,911
Таблиця 2.1.2.
Характеристика піддослідних корів досліду з різним
фітоестрогенним тлом раціону і парентеральним введенням оливкової олії або олійного розчину естрону
№№
п/п
КличкаІнвентар-ний №
ЛактаціяНадій молока за попередню лактацію, кгДата
розтелуЖива маса, кг
Корови, які утримувались на низькому фітоестрогенному тлі раціону і яким парентерально вводили оливкову олію1
4Аврора
Крапка
Казанка
Сучасниця1352
1296
940
23205
44242
4018
3875
392014.05.82
21.05.82
10.05.82
17.05.82524
517
533
530... олійний розчин естрону5
8Зневага
Сирітка
Фантазія
Колода1350
1897
2712
22934
43835
4106
4208
395713.05.82
17.05.82
20.05.82
12.05.82534
529
515
528Корови, які утримувались на високому фітоестрогенному тлі раціону
і яким парентерально вводили оливкову олію9
10
11
12Ялинка
Капуста
Білочка
Ювілярка1065
1362
1677
9265
44281
3992
4165
390021.05.82
11.05.82
14.05.82
10.05.82542
528
519
535... олійний розчин естрону13
14
15
16Мішанка
Айва
Сваха
Амеба876
960
1474
25094
44138
3918
4007
426918.05.82
20.05.82
10.05.82
11.05.82521
534
526
540
У відібраних зразках визначали вміст та форму цис-18:2. Крім того, в зразках кормів визначали естрогенну активність. У піддослідних корів визначали тривалість періоду від І-ої охоти до запліднення і кількість осіменінь на запліднення.
Досліджували вплив естрогенно активних речовин (стероїду - естрону і фітоестрогена ізофлавонового ряду - геністеїну) на концентрацію та форму цис-18:2 в організмі статевозрілих телиць (характеристика піддослідних тварин дана в табл.3.1.3, а структура і поживність раціону - в табл.2.1.4). Для цього, групу телиць 18-місячного віку (жива маса 350-360 кг) по принципу аналогів розділили на 4 підгрупи (по 4 голови в кожній). Телицям під час фолікулярної фази циклу одноразово парентерально ввели суспензію, приготовлену на основі крохмалю, оливкової олії і гормонів, першій - естрону (10000 мишачих одиниць), другій - геністеїну (1 г), третій - суміш естрону і геністеїну в тих же дозах і четвертій - суспензію без гормонів.
Таблиця 2.1.3
Характеристика піддослідних телиць досліду з
парентеральним введенням естрогенно активних речовин
№№
п/п
Інвентарний №
Дата народження
Жива маса, кгТелиці, яким парентерально вводили суспензію на основі олії,
крохмалю і естрону1
43227
2640
2797
340824.01.82
10.02.82
18.01.82
29.01.82358
352
360
354... олії, крохмалю і геністеїну5
82981
2804
3512
300821.01.82
8.02.82
30.01.82
26.01.82359
358
353
355... олії, крохмалю і естрону + геністеїну9
10
11
122924
2872
3125
284821.01.82
28.01.82
19.01.82
11.02.82353
359
359
354... олії і кро