2
СОДЕРЖАНИЕ
1. ВВЕДЬНИЕ .....................И»—.............................................3
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. ТОКСНКИНЕТНКА ДИОКСИНОВ В ОРГАНИЗМЕ ТЕПЛОКРОВНЫХ ЖИВОТНЫХ 7 2.1 ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ДЕЙСТВИЯ ДИОКСИНА. КАК МАРКЕРЫ
ПОРОГОВЫХ ДОЗ................................................................ 20
2.3. ПРИНЦИПЫ РАЗРАБОТКИ ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ ДИОКСИНА 30
3. МАТЕРИАЛЫ II МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ----------------------------------------- 33
4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ________________________________________ 40
4.1. БИОХИМИЧЕСКИЕ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ II ПАТОЛОГО,АНАТОМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ПОРОГОВЫХ ДОЗ 2.3,7.8-ТХДД ........................40
4.2. ЭЛЕКТРОННО-МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ ЖИВОТНЫХ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ ДИОКСИНОМ....................................46
4.3. ИЗУЧЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ 2Д.7.8-ТЛДД ДЛЯ ОЦЕНКИ БЕЗОПАСНЫХ УРОВНЕЙ ТОКСИКАНТА................................................. 55
4.4. ИЗУЧЕНИЕ ЭМБРИОТОКСИЧНОСТИ И ТЕРАТОГЕННОСТИ 2ЛД8-ТХДД....................62
4.5. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ МАЛЫХ ДОЗ 2.3,7,8-ТХДД НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ МИТОХОНДРИЙ ПЕЧЕНИ .а, „...........................................64
4.6. ОБОСНОВАНИЕ ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ ДИОКСИНА ДЛЯ
животных .............................. .'.................................то
V'
5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ........................ —.....................-. 73
6. ВЫВОДЫ ____________________________________________ -.................... 79
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ....................................................... 81
ПРИЛОЖЕНИЯ
.95
3
1. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы.
Результаты исследований, выполненных во ВНИВИ и ВНИИВВиМ, показывают, что диоксин (2,3,7,8-ТХДД) является высокотоксичным соединением (отчеты НИР ВНИВИ 1988, 1997 и отчет НИР ВНИИВВиМ 1987). Сотрудниками ВНИИВВиМ (Волков В.Н. и соавт, 1998), ранее установлено, что ежедневное поступление в организм животных от 0,1 до 0,4 мкг/кг диоксина вызывает появление характерных признаков отравления. По данным Жслтова В.А с соавт (1995) и Игнатьева Л.П., с соавт (1998), диоксин в дозах, сопоставимых с гигиеническими требованиями, обладает на тканевом уровне разрушающим ганадо-тропным, эмбриотоксическим, тератогенным и мутагенным действием. По международной классификации УАЯС 2,3,7,8-ТХДД характеризуется как «возможный канцероген».
За последние полвека в мире произошло более 200 аварийных выбросов диоксина (2,3,7,8-ТХДД). В 1976 году в Севезо (Италия) на фабрике, производившей 2,4,5-трихлорфенол, произошел выброс 2,3,7,8-ТХДД в количестве по современным оценкам, до 130 кг. По данным Мерло и соавт (1987), при этом прослеживалась четкая зависимость степени поражения животных и частоты их гибели от близости к эпицентру аварии. Основным путем попадания в организм диоксина является ею поступление с пищей у человека и с кормом у животных. Гак, граждане ФРГ потребляют с пищей в сутки около 15 нг, а с учетом других хлорированных изомеров диоксинов - 80 нг «эквивалентов 2,3,7,8-ТХДД». Одним из методов в оценке риска контактов с диоксином является сопоставление реальной суммарной нагрузки токсиканта на организм с каким-либо проявлением интоксикации, например, хлоракне, которые иногда рассматривают как нозологическая единица - заболевание, связанное с воздействием диоксина. Обоснованность этого принципа вызывает сомнение. Раин с коллегами (1987) оценивает общую нагрузку диоксинами в США лишь в 200 раз ниже того уровня, когда могут возникнуть хлоракне. По данным ВОЗ в 80-е го-
s
ет процесс переноса из липопротсинов или из фосфолипндных везикул (206], хотя полностью этот механизм пока неясен. Желтовым В.А. (200) получены экспериментальные данные показывающие, что применение природных сорбентов снижает поступление диоксина в организм животных.
Внутриклеточное распределение рассмотрено Юшимура с коллегами (1986) на примере 2,3,4,7,8-ПХДФ, основного изомера, обнаруженного в печени и жировых тканей людей с болезнью Юшо и способного вызывать атрофию тимуса. Меченный изотопом углерода (/С/) ПХДФ (полихлорированные дибен-зофураны) аккумулируется в печени крыс, а в крови связывается частично с липопротеинами, но больше с альбумином и такое связывание усиливает включение / С/ ПХДФ в гепатоциты, где ксенобиотик, связанный с цитохромом Р-488, локализован в эидоплазматическом ретикулуме. Формой гемопротеида, связывающей /С/ ПХДФ оказался цитохром P-450d, продует гена P-450IA2.
Внутриклеточное распределение диоксина характерно тем. что в гепато-цнтах крыс до 90% всего содержание радиозонда связывается в микросомной фракции, а в гепатоцитах мышей и золотистых хомячков - до 50%. На втором месте - грубая ядерная фракция, затем митохондрии и растворимая фракция [100]. Видимо, аккумуляцией диоксина в микросомной фракции можно объяснить способность этого ксенобиотика вызывать разрастание мембран гладкого эндоплазматического ретикулума, хотя для 2,3,7,8-ТХДД как индуктора МХ-типа, это качество несвойственно.
Общая растворимость, липидорастворимость и метаболизм в той или иной мере влияют на общую картину распределения диоксинов по органам у животных разных видов. Межтканевое распределение зависит как от структуры ксенобиотика, так и от видовых особенностей (100). В лаборатории Мартина Берга (1987) проведены фармакокинетические исследования показавшие, что после перорально! о введения 1,2,3,7,8-1IXДФ, 2,3,6,7,8-ГХДФ и 2,3,4,7,8-ПХДФ крысам-самкам Sprague-Dawley элиминация из печени этих соединений происходит в течение, соответственно, 28, 42 и 133 дней. Время полувыведения
9
этих галогенированных дибензофуранов составляет, соответственно, 3,61 и 108 дн. После внутривенного введения экстракта из сажи при элиминации из печени крыс время полувыведения для 2,3,7,8-ТХДД составляло 6,4 дня, а для
2.3.7.8-ТХДФ - 0,2 дня [55].
Радиоактивный 2,3,7,8-ТХДД элиминируется у всех животных с калом, а у мышей и хомяков основной путі» выведения - с мочой. Элиминирование
2.3.7.8-ТХДД яатяется процессом первого порядка [100]. Обнаружено, что при однократном введении крысам 1 мкг/кг 2,3,7,8-ТХДД среднее время полувыведения составляет 31 день; почти такое же время полувыведения - 30,3 дня - наблюдается и у сверхчувствительных к токсическому действию 2,3,7,8-ТХДД морских свинок. Таким образом, не обнаружено отчетливой взаимосвязи между способностью животного данного вида к экскреции 2,3,7,8-ТХДД и его острой (летальной) токсичностью для этих животных.
По Васксрн с соавт (1986) у устойчивых к токсическим эффектам диоксина хомячков процесс элиминации ксенобиотика тоже первого порядка, время полувыведения составляет 10.8 дней при внутрибрюшинном введении и 15 дней при введении перорально. Возможно, устойчивость хомячков к диоксину объясняет именно то обстоятельство, что они в 2 - 3 раза быстрее элиминируют его из организма, нежели крысы.
Время полувыведения диоксина для мышей разных линий различно. По данным из лаборатории Томаса Гасиевича (1985, 1984), для линии чувствительных к диоксину, оно равно 17 дням, а у мышей устойчивых - 37 дням. Хотя
2.3.7.8-ТХДФ выводится со значительно большей скоростью, нежели 2,3,7,8-ТХДД, время его полувыведения у мышей чувствительных составляет 2 дня, а у мышей устойчивых - 4 дня [781. Особо стоит вопрос о задержке и элиминации
2.3.7.8-ТХДД у ннбредных мышеи, генетически чувствительных и устойчивых к индукции печеночных бензпиренгидроксилаз. Обнаружены значительные различия в распределении 2,3,7,8-ТХДД в мышах чувствительных по сравнению с мышами не чувствительными; время полувыведения для 2,3,7,8-ГХДД
- Київ+380960830922