Ви є тут

Сравнительная иммунобиологическая характеристика вакцинных штаммов вирусов оспы птиц, адаптированных к культуре клеток

Автор: 
Тарасенко Елена Васильевна
Тип роботи: 
Кандидатская
Рік: 
2003
Артикул:
273065
179 грн
Додати в кошик

Вміст

2
СОДЕРЖАНИЕ Стр.
ВВЕДЕНИЕ........................................................ 4
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ................................................ 8
1 .ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ ОБ ОСЙЕ ПТИЦ.................................. 8
1.1. Историческая справка....................................... 8
1.2. Характеристика вирусов оспы птиц........................... 9
1.2.1. Морфология и репродукция ................................ 9
1.2.2. Устойчивость ............................................ 11
1.2.3. Культивирование.......................................... 12
1.2.4. Диссеминация............................................. 16
1.2.5. Дифференциация и идентификация........................... 18
1.3. Эпизоотология.............................................. 24
1.4. Клинические признаки....................................... 27
1.5. Патологоаиатомические признаки ........................... 29
1.6. Диагностика................................................ 30
1.7. Иммунитет.................................................. 33
1.8. Специфическая профилактика................................. 35
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ........................................ 42
Материалы и методы............................................. 42
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ......................................... 48
1. Адаптация вирусов оспы птиц к культуре клеток КЭК............ 48
1.1. Адаптация штамма «СВ к культуре клеток КЭК................ 48
1.2. Адаптация вируса оспы индеек штамм «21»
к культуре клеток КЭК........................................... 51
2. Сравнительное изучение репродуктивной способности вакцинных вирусов оспы кур и голубей в культуре клеток КЭК
и определение видовой принадлежности штамма «СВ»................ 54
3
3. Иммуногенные свойства вакцинных штаммов
вирусов оспы кур и голубей....................................... 60
3.1. Иммуногенные свойства штамма «СВ» вируса оспы кур, адаптированного к культуре клеток КЭК........................... 60
3.2. Сравнительное изучение иммуногенных свойств
вакцинных штаммов вирусов оспы кур и голубей..................... 66
4. Сравнительное изучение безвредности, реактогенности и вирулентности штаммов «К», «СВ» и «КБД»
вирусов оспы кур и голубей....................................... 69
5. Сравнительное изучение диссеминации вирусов оспы птиц в организме суточных цыплят при интрацеребральном, интраназальном и подкожном их заражении......................... 73
6. Изучение динамики формирования иммунитета у цыплят, вакцинированных внутрикожно культуральными штаммами
вирусов оспы кур и голубей....................................... 78
ОБСУЖДЕНИЕ....................................................... 83
ВЫВОДЫ........................................................... 91
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ................................................ 93
ПРИЛОЖЕНИЯ...................................................... 115
10
Раздевание вирусов оспы с освобождением ДИК протекает в два этапа: в начале происходит частичная транскрипция вирусного генома в сердцевинах с образованием соответствующих иРНК и последующим синтезом раздевающего белка, а затем наступает полная экспрессия и репликация генома (Гуненков В.В.. Сюрин В.Н., 1966; Nevins J., Joklik W., 1975; Ф.Фсннер, Б.Мак-Оспен и др., 1977).
Транскрипция ранних иРНК вируса осуществляется вирионной ДНК - зависимой РНК-транскриптазой на матрице родительской ДНК. В сердцевинах транскрибируется около 14% генома (Лурия С., Дарнелл Дж. и др., 1981).
На поздних стадиях транскрибируется почти весь геном, и синтезируются ранние и поздние структурные белки и фермента (Paoletti Е., Cooper N. et al, 1974, Paoletti E., Grady L.J., 1977; Boone R.F., Moss B., 1978).
Начальные стадии образования вириона происходят в ограниченных гранулярных областях цитоплазмы, расположенных в стороне от клеточных мембран. Происходит накопление вирусных оболочек в этих местах. Далее незрелые вирусные мембраны принимают сферическую форму благодаря проникновению внутрь гранулярного матрикса плотной массы нуклеопротеида непосредственно перед их полным закрыванием (Dales S., Pogo B.G.T., 1981). Не выяснено, как происходит дальнейшее формирование вирусных частиц, в ходе которого возникает сложная организация наружных и внутренних компонентов. Очевидно, оно должно сопровождаться непрерывно идущим синтезом белков (Б.Филдс, Д.Наип и др., 1989). Зрелые вирусные частицы покидают область сборки и перемещаются к периферии клетки. Они отделяются от микроволокои, являющихся частью клеточного скелета, и приобретают двухслойную мембрану, формирующуюся из материала, аппарата Гольджи (Ichihashi G., Matsumoto S. et al., 1971; Hiller G., JuhgwirthC., et al., 1981).
11
Таким образом, после заражения клеток в них существенно увеличивается ДНК-полимеразная активность. Синтез ДНК-иолимеразы идет от 1-1,5 ч. до 4 ч. и она является вирус-специфической. Репродукция вируса осповакцины в клеточных системах также начинается через 1-1,5 ч., достигает пика через 2,5-3 ч. и заканчивается на 90% и более через 4-5 ч. В это время в клетке еще содержится много свободных молекул ДНК, способных служить матрицами для дальнейшей репликации (Гендон Ю.З., Поглазов Б.Ф. и др., 1975).
1.2.2. Устойчивость
Вирусы оспы птиц устойчивы во внешней среде. По сообщениям Лихачева Н.В. (1962), Кадырова У.Т. и Борисович Ю.Ф. (1981) в птичниках вирусы оспы выживают до 158 дней, а на пухе и пере - до 182 дней. В высохших тканевых частицах они сохраняются до 1-1,5 лет.
По данным Лихачева Н.В. (1962), вирусы оспы птиц теряют инфекционные свойства после 8-9 дней пребывания в воде, нагретой до 37 °С, через 30 минут при пребывании в воде, нагретой до 56°С. Низкая температура (замораживание) консервирует вирусы на длительный период - до двух лет и более. Данные Маренниковой С.С. и Мальцевой Н.И. (1964) свидетельствуют о том, что вирусы этой группы обладают различной термоустойчивостью к воздействию температуры, при этом наибольшей устойчивостью к этому фактору обладают штаммы, распространенные в странах с тропическим климатом. Это свойство характерно для отдельных штаммов и потому может варьировать у одного и того же вируса оспы птиц (Г'уненков В.В., Сюрин В.Н., 1966).
Высушивание в вакуум-аппарате вируса из замороженного состояния позволяет сохранять его до 8 лет (Лихачев Н.В., 1962, Сюрин В.Н., Белоусова Р.В. и др., 1991).