2
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 5-14
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 15-97
^ 1.1. Бруцеллез, историческая справка 15-16
1.2. Распространение, источники, пути передачи и течение инфекции 16-22
1.3. Диагностика бруцеллеза животных 22-42
4 1.3.1. Серологические методы диагностики бруцеллеза 22-36
1.3.1.1. Реакция агглютинации (РА) 22-23
1.3.1.2. Реакция связывания комплемента (РСК) 23-25
1.3.1.3. Кольцевая реакция с молоком (КР) 25-27
1.3.1.4. Роз бенгал проба (РБП) 27-28
1.3.1.5. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) 28-31
* 1.3.1.6. Реакция нейтрализации антител (PHА Т) 31-32
1.3.1.7. Реакция иммунодиффузии в агаровом геле (РИД) 32-33
1.3.1.8. Иммуноферментный анализ (ИФА) 34-37
1.3.2. Аллергическая диагностика бруцеллеза 37-38
^ 1.3.3. Бактериологическая диагностика бруцеллеза 38-39
1.3.4. Молекулярно-генетические методы диагностики
бруцеллеза 39-42
1.3.4.1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 40-42
1.4. Специфическая профилактика бруцеллеза 42-46
щ 1.5. Средства специфической профилактики бруцеллеза 46-46
1.5.1. Живые противобруцеллезные вакцины 47-57
1.5.2 Инактивированные противобруцеллезные вакцины 57-72
1.5.3. Изыскание оптимальных доз и схем применения противобруцеллезных вакцин 72-75
1.6. Инфекционный эпидидимит баранов (ИЭБ)
1.6.1. Распространенность болезни
1.6.2. Диагностика ИЭБ
1.6.3. Специфическая профилактика ИЭБ
1.7. Анализ обзора литературы
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы и методы исследований
2.2. Результаты исследований
2.2.1. Ретроспективное изучение эпизоотического состояния по бруцеллезу животных в Киргизии
2.2.1.1. Бруцеллез крупного рогатого скота
2.2.1.2. Бруцеллез мелкого рогатого скота
2.2.1.3. Инфекционный эпидидимит баранов
2.2.2. Изучение противоэпизоотической эффективности вакцины из штамма 104М В.abortus на крупном рогатом скоте
2.2.3. Изучение противоэпизоотической эффективности вакцины из штамма 19 В. abortus в уменьшенной дозе
2.2.4. Изучение иммуногенных свойств вакцин из штаммов B.abortusKB17/100 и В.abortus 75/79-АВ в опыте на крупном рогатом скоте
2.2.5. Изучение свойств адъювант-вакцин из штаммов В. abortus 45/20 и B.melitensis 53Н38 в опыте на овцах
2.2.5.1. Изучение реактогенности адъювант-вакцин
2.2.5.2. Изучение антигенных свойств адъювант-вакцины
2.2.5.3. Изучение иммуногенных свойств адъювант-
3
75-85
75-77
78-83
83-85
85-97
98-189
98-107
108-189
108-134
108-125
125-132
132-134
134-147
147-153
154-161
161-170
161-165
165-168
168-170
позволяет судить только о наличии специфических антител в сыворотке крови, исключая количественную оценку (147).
1.3.1.5. Реакция непрямой гемагглютинации (РИГА)
В последние годы, отечественные и зарубежные исследователи для диагностики многих бактериальных и вирусных болезней у людей и животных, рекомендуют использовать реакцию непрямой гемагглютинации (РИГА).
Уже в первой четверти 20 века было известно, что эритроциты адсорбируют на своей поверхности продукты распада бактерий, их экзотоксины и антитела (103, 107).
Эти данные послужили предпосылкой для изготовления эрит-роцитарных диагностикумов и разработки реакции непрямой гемагглютинации, которая прочно вошла в последние годы в лабораторную практику диагностики многих инфекционных болезней.
Сущность этой реакции заключается в том, что эритроциты после адсорбции на их поверхности специфических растворимых антигенов различной природы (полисахариды, липополисахариды, различные белки и др.) агглютинируются в присутствии гомологических сывороток или антигена.
Впервые при бруцеллезе РИГА была испытана Carrere L., Roux J. Для сенсибилизации эритроцитов они использовали надосадоч-ную жидкость антигена из В. abortus, применяемого для постановки РА, а также водный экстракт бруцелл (427).
Pressman D. et al. при изготовлении эритроцитарного диагно-стикума использовали для сенсибилизации эритроцитов полисахаридную фракцию В. abortus (526).
О высокой чувствительности РИГА при бруцеллезе сообщают Тульчинская В.П. и Н.И. Ищенко (330).
Несколько позже высокая чувствительность реакции непрямой
гемагглютинации была установлена при исследовании на бруцеллез морских свинок и крупного рогатого скота. С помощью РИГА удалось выявить антитела в титрах 1:640-1280 в сыворотках крови морских свинок на 3-й день после иммунизации вакциной из штамма 19. При исследовании данных сывороток в РА агглютинины в титре 1:20-1:80 были зарегистрированы лишь на 5-7 дни. У крупного рогатого скота антитела в сыворотке крови были также обнаружены на 3-й день после иммунизации. При этом титр РИГА в среднем равнялся 1:25-1:50, а РА- 1:10-40 (279).
Ищенко И.И. предложила РИГА для дифференциации по-ствакцинальных реакций от реакций у больных бруцеллезом животных. Сыворотки крови исследовали РИГА. РА, РСК и в реакции преципитации (РП). Для сенсибилизации бараньих эритроцитов ею был использован антиген, изготовленный по методу В.П Тульчин-ской с помощью диэтилового эфира. У крупного рогатого скота, исследованного в отдаленные сроки после иммунизации противобру-целлезной вакциной (1,5-4 и более лет), результаты РИГА были отрицательными, при положительных показаниях РА, РСК и РП. При исследовании сыворотки крови больных бруцеллезом коров с помощью РИГА было выявлено больше положительно реагирующих животных, чем в других реакциях. В частности, в РИГА реагировало 89,6% животных, в РА -16,4% и в РСК - 56,1% (130).
Канатов Ю. В. и др. исследуя в РИГА, РА и РСК сыворотки крови людей, иммунизированных и больных бруцеллезом сделали вывод о более высокой чувствительности РИГА (139).
Вершиловой П.А. с соавт. в опытах на морских свинках, зараженных подкожно вирулентной культурой В.теїіїепвів, было установлено, что РИГА выявляет положительно реагирующих животных раньше, чем РА. Так, через 10, 15 и 30 дней после заражения, реак-
- Київ+380960830922