СОДЕРЖАНИЕ
Введение......................................................4
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
История открытия циклоспорина.................................9
Циклоспорин А, химическое строение, свойства.................10
Механизм действия циклоспорина А.............................12
Фармакокинетика циклоспорина А...............................13
Фармацевтический анализ субстанции и пероральных лекарственных
форм циклоспорина А......................................... 19
Строение пероральных лекарственных форм циклоспорина А. Характеристика новой иероральной лекарственной формы
циклоспорина А Экорал («Айвэкс», Чешская Республика).........25
Фармакокинетические аспекты применения циклоспорина А.
Циклоспорин как препарат «критичной дозы». Терапевтический
лекарственный мониторинг циклоспорина....................... 30
Аналитические методы, используемые для мониторинга концентрации
циклоспорина А в крови.......................................33
Перспектива использования дженериковых препаратов циклоспорина А...............................................36
И. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА I. Разработка унифицированной методики ВЭЖХ-определения циклоспорина А и родственных соединений в лекарственных формах
1.1.Особенности анализа циклоспорина А с помощью ВЭЖХ....... 41
1.2.Материалы и методы.......................................45
1.3.Результаты и их обсуждение...............................46
1.4. Выводы ................................................ 55
Глава П. Сравнительная оценка капсулнрованных препаратов циклоспорина А по показателю «Посторонние примеси»
2.1. Материалы и методы......................................56
2.2. Результаты и их обсуждение............................. 59
2.3. Выводы...................................................62
Глава III. Изучение высвобождения циклоспорина A in vitro из капсулнрованных лекарственных форм
3.1. Материалы и методы........................................63
3.2. Результаты и их обсуждение............................... 66
3.3. Выводы....................................................69
Глава IV. Определение размера частиц содержимого кансулированных препаратов циклоспорина А
4.1. Материалы и методы........................................70
4.2. Результаты и их обсуждение................................72
4.3. Выводы....................................................74
Глава V. Изучение стабильности капсулнрованных лекарственных форм циклоспорина А
5.1. Материалы и методы........................................75
5.2. Результаты и их обсуждение................................75
5.3. Выводы................................................... 83
ГлаваУГОценка эффективности проведения терапевтического лекарственного мониторинга циклоспорина по точке С2 у пациентов после аллогенной трансплантации почки
6.1. Материалы и методы....................................... 84
6.2. Результаты и их обсуждение................................89
6.3. Выводы................................................... 99
III. ВЫВОДЫ.................................................. 100
IV. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ........................................ 102
3
В настоящее время циклоспорин используется в иммуносупрессивной терапии при органной трансплантации, трансплантации костного мозга и в терапии некоторых аутоиммунных заболеваний. Несмотря на введение в практику новых иммунодепрессантов, циклоспорин до сих пор является агентом первой линии в клинической трансплантологии [103].
Циклоспорин А, химическое строение, свойства.
Молекулярная формула СбгНщЫпО^
Структурная формула
Vй
н
н'с'сн,
/СН, ноч с--н
?н ^
СН, СНа сн сн31 н СН, н сн5
СН3— И-С-СО-Н-С — С-М-С— СО-Ы-С-С-Ы — СН2 ' Л 4 5.- И 6 А 7 II 8 1
сн, н со н но но
ч н'0
со
I
СН-СН,»—'С 3
оС <*>-» 2 , V ?н 8 "» V 9|"СН’
ОС-С-Ы-СО-С—Ы-С-С—N — С-пС-И-СО-С — н У' I / 'и И 1 1 н**1 А
н сн,» “> н ? сн,“» сн*
1.........сн «Ь “» >
/ \ / \
СНз СНз сн, СН3
Рис. 1. Структурная формула циклоспорина А
Относительная молекулярная масса 1202,62 Химическое наименование:
/11-/11*,К*- (Е)//- цикло (Ь-аланил-О-аланил-Ы-метил-Ь-лейцил-Ы-метил-Ь-лейцил-Ы-метил-Ь-валил-3-гидрокси-Ы,4-диметил-Ь-2-амино-6-октеноил-Ь-альфа-аминобутирил-Ы-метилглицил-Ы-метил-Ь-лейцил-Ь-валил-Ы-метил-Ь-лейцил).
Циклоспорин А - циклический пептид, состоящий из 11 аминокислотных остатков, 7 из которых Ы-метилированы; 10 аминокислот алифатического ряда, а одна, в шестой позиции, производная треонина - 4-бутенил-4-метил-треонин (3-гидрокси-Ы,4-диметил-Ь-2-амино-6-октеноевая
10
кислота). Конформация молекулы характеризуется двумя структурными мотивами: антипараллельными бета-плоскостями, состоящими из
аминокислотных остатков от 4-бутенил-4-метил-треонина (6) до метиллейцина (11), стабилизированными тремя внутрициклическими водородными связями, и петлёй от аланина (1) к метилвалину (5). Существует также внециклическая водородная связь между -ЫН группой И-аланина (2) и карбонильным кислородом Ы-метил-Ь-лейцина (11). Метилированная амидная связь между 9 и 10 аминокислотными остатками находится в цис-положении, все остальные - в транс-положении (рис. 1).
При исследовании строения молекулы циклоспорина А с помощью методов дифракции рентгеновских лучей и ядерного магнитного резонанса в неводных растворителях было обнаружено различие в конформации боковой цепи остатка 4-бутенил-4-метил-треонина (6). В кристаллическом состоянии эта цепь вовлечена в бета-складчатую структуру, т.е. загнута внутрь цикла, тогда как в апротонных растворителях она выступает из «тела» молекулы (рис. 2) [123].
Рис.2. Молекулярные модели
конформаций циклоспорина А в
кристаллическом состоянии при исследовании с помощью рентгеновской кристаллографии (А) и в апротонном растворителе при исследовании с
помощью ядерного магнитного резонанса (Б).
11
- Київ+380960830922