2
ОГЛАВЛЕНИЕ
Стр
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ..................... 5
Глава 1 БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА В ОЦЕНКЕ ГЕНЕТИЧЕСКИ ДЕТЕРМИНИРОВАННЫХ СИСТЕМ ОКИСЛЕНИЯ И АЦЕТИЛИРОВАНИЯ (Литературный обзор)................................... 11
1.1 Метаболические процессы окисления и методы определения активности микросомальных оксидаз.................... 14
1.2 Метаболические процессы ацетилирования и методы оценка активности N - ацетилтрапсферазы организма человека 29
1.3 Химико - фармацевтическая регуляция активности ферментных метаболических систем........................ 36
1.3.1 Индукция метаболизма лекарственных веществ...... 37
1.3.2 Ингибирование метаболизма лекарственных веществ. 41
Глава 2 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ....................... 44
2.1 Постановка задач исследования................... 44
2.2 Аппаратура, объекты и техника эксперимента...... 46
Глава 3 МЕТОДЫ БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА
МЕТАБОЛИЧЕСКИХ СИСТЕМ АЦЕТИЛИРОВАНИЯ И ОКИСЛЕНИЯ........................................ 51
3.1 Разработка методов определения тест - препаратов окисления в слюне методом высокоэффективной жидкостной хроматографии .......................................... 52
3.2 Разработка методов определения тест — препаратов ацетилирования в моче методом высокоэффективной жидкостной хроматографии........................................ 65
Глава 4 РЕГУЛЯЦИЯ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ
СИСТЕМ МИКРОСОМАЛЪНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫМ ПРЕПАРАТОМ КСИМЕДОНОМ................... 75
3
4.1 Применение антиииринового теста для исследования индукционного действия лекарственных твеществ
на цитохромы Р450 ................................... 78
4.2 Оценка индукционного действия ксимедона на ферментативную активность систем микросомального окисления 84
4.3 Фармакокинетическая оценка процессов экскреции ксимедона из организма человека............................... 96
Глава 5 БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ФЕРМЕНТНОЙ АКТИВНОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ СИСТЕМ ОРГАНИЗМА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЯХ И ИХ ЦЕЛЕНАПРАВЛЕННАЯ РЕГУЛЯЦИЯ................................................... 104
5.1 Фармакокинетика антипирина и изониазида у больных стрептококковой ангиной на фоне базисной терапии и приеме ксимедона.................................... 104
5.2 Процессы ацетилирования и нсспецифическая резистентность организма у больных гнойно — воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области...................... 121
5.3 Процессы окисления и ацетилирования у больных хроническим вирусным гепатитом С............................... 129
5.4 Оценка активности системы ацетилирования и ее химикофармакологическая коррекция ксимедоном у больных рожей 136
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.......................................... 143
ВЫВОДЫ.............................................. 145
ЛИТЕРАТУРА.......................................... 147
ПРИЛОЖЕНИЯ.......................................... 173
16
структура цитохрома Р450 содержит белковую часть и железопротопорфи-рин-1Х. Строение протеиновой части может варьировать, что обуславливает существование множества изоферментных форм цитохрома (4 семейства), что, в свою очередь, обуславливает широкую субстратную специфичность его в отношении различных химических веществ, включая лекарственные препараты (табл. 1.2) [1, 3, 49].
Каталитическая активность цитохромов Р450 обусловлена наличием фосфолипидов, которые стабиизируют фермент в функционально активной конформации [49].
Наличие в цитохроме двухвалентного железа обеспечивает его способность связывать двухатомные газы, при этом окись углерода и оксид азота ингибируют цитохром, а кислород обладает сродством к Р45 0 [3,49].
Таблица 1.2 Цитохромы Р450 и их субстратная специфичность [44]
Наименование формы цитохрома Субстраты, подвергающиеся метаболизму
СУР1А1 Полициклические ароматические углеводороды, бен-зо[а]пирен
СУР1А2 Кофеин, 2-нафтиламин, фенацетин, теофиллин, арила-мин
СУР2С9/10 Гексобарбитал, толбутамид
СУР2С18 Диазепам, гексобарбитал, омперазол, пропранолол
СУР2Э6 Кодеин, дебризохин, галоперидол, метопролол, тримо-лол и др.
СУР2Е1 Парацетамол, ацетон, анилин, бензол, этанол и др. спирты, дихлорэтан, стирол, винилхлорид, винилбромид, нитрозамины и др.
СУРЗА Диазепам, эритромицин, лидокаин, этинилэстрадиол, тестостерон и др.
Ферменты монооксигеназной системы активируют молекулярный кислород и включают атом кислорода в молекулу субстрата. При этом моноок-сигеназная реакция происходит по следующей схеме [7, 44, 46]:
При этом один атом кислорода включается в молекулу субстрата, другой восстанавливается до воды. Таким образом, фермент выполняет не только оксигеназную, но и оксидазную функцию [3, 44, 46].
Мопооксигеназная система эндоплазматического ретикулума гепатоци-тов образует НАДФ-Н- и НАДН-зависимую редокс - цепь [7]. Каталитический цикл цитохрома Р450 представлен на рисунке 1.3.
RH + 02 + ДН -> ROH + Н20 + Д Где Д- донор электронов, RH - лекарственный препарат
или
ХН + 02+ 2е + 2НҐ —> ХОН + Н20
Продукт ЯОН КН Субстрат
3+
3+ NADPH-P-450-: е"
(ROH)Fe
(RH)Fe
редуктаза
/
(R-)(Fe-OH)"
3+
(RH)Fe‘
(RB)Fe2+(02)
І 3+ 2" 2g+ (RH)Fe (02)
3+ _ (RH)Fe (02)
I.
Oo
e
Рисунок 1.3 Кагалитический цикл цитохрома Р450 [49]
- Київ+380960830922