Содержание
Стр.
ВВЕДЕНИЕ.......................................................5
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Распространение вирусного лейкоза крупного рогатого скота в Российской Федерации и за рубежом.......................................10
1.2.Характеристика вируса лейкоза крупного рогатого скота...................................................................14
1.3. Диагностика вируса лейкоза крупного рогатого скота...................................................................21
1.4. Генотипическое разнообразие вируса лейкоза крупного рогатого скота...................................................................26
1.6. Заключение по обзору литературы...........................29
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ....................................31
2.1. Материалы и методы исследования...........................31
2.2. Результаты исследований...................................37
2.2.1. Формирование выборок для молекулярно-генетического
анализа...............................................................37
2.2.2. Выделение ДНК из биологических жидкостей в скрининговом формате и возможность ее использования для постановки полимеразной
цепной реакции........................................................39
2.2.2.1. Выделение ДНК из крови животных в скрининговом
формате...............................................................40
2222. Оптимизация условий выделения ДНК из сыворотки
крови.................................................................44
2.2.2.З. Выделение ДНК из молока коров.................48
2.2.3. Влияние условий хранения ДНК на ее качество.............51
2
2.2.4. Генотипическое разнообразие популяции вируса лейкоза крупного рогатого скота на территории Новосибирской области.............53
2.2.4.1. Генотипирование ВЖРС по гену env................53
2.2.4.2. Изучение полиморфизма гена tax..................58
2.2.5. Эпизоотологический мониторинг по лейкозу крупного рогатого скота в Новосибирской области с учетом генотипирования ВЖРС............62
2.2.6. Характеристика гематологических показателей ужвотных инфицированных разными генотипами ВЖРС.........................73
3 .ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ..........................76
ВЫВОДЫ.........................................................83
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.......................................84
БИБЛИОГРАФИЯ...................................................84
ПРИЛОЖЕНИЕ....................................................108
3
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Распространение вирусного лейкоза крупного рогатого скота в Российской Федерации и за рубежом
С открытием вирусной природы заболевания (М. Van der Maaten, 1972; J. Miller, A.L. Bothe, 1974) значительно увеличены объемы исследований с целью изучения эпизоотической ситуации по инфекции ВЛКРС. К настоящему времени ветеринарной практикой получены относительно объективные данные об особенностях распространения лейкоза и инфекции ВЖРС в мире.
Широкомасштабные диагностические исследования, проведенные во всех странах мира, показали, что заболевание регистрируется практически повсеместно, на всех континентах планеты. Распространение болезни неодинаково не только в государствах, но и в различных климатических и географических районах одной и той же страны. Отмечено, что в странах с хорошо развитым племенным животноводством лейкозы регистрируются гораздо чаще (В.М. Бергольц, Н.В. Румянцев, 1966; Л.Г. Бурба, A.A. Кунаков, 1983; Л.Г. Бурба и соавт., 1988; В.М. Авилов, 1990; Г.А. Критский и соавт., 1991; С.И. Джупина, П.Н. Смирнов, 1990; П.Н. Смирнов и соавт., 1992.; В.В. Храмцов,1995; R.B. Azuba, 1994).
Наиболее широко лейкозы распространены в США, уровень инфицированности стад достигает 66% (J. Everman et al., 1980; S. Devare, 1978,1988; M. Burridge,1981; M. Burridge et al.,1982; M. Thurmond, 1987; D. D. Motton, 2003), в ряде стран Центральной Европы, Дании, Швеции (М. Mammerickx et al, 1981,1985; J. Jentilt et.al., 1980;Y. Brattstrom, 1980 A. Bumy et.al., 1980; D.R. Monke, 1986 и др.; M. Coudert etal., 1990 L. Nuotio et al.,2003,).
10
Так, например, в такой стране как Канада, где создан и районирован высокопродуктивный молочный скот, уровень инфицированности стад BJIKPC достигает 19,7% (R. Jhomas et.al., 1980).
На южноамериканском континенте инфекция BJ1KPC зарегистрирована в Венесуэле. При исследовании крупного рогатого скота мясной и молочной породы в 20-ти штатах страны, выявили 37,5% инфицированных животных, причем в равной степени были поражены породы скота браман, гибридов зебу и буффало (C. Maril, 1978).
Инфекция вируса лейкоза крупного рогатого скота зарегистрирована также в Бразилии, Чили, Кубе, Сальвадоре, Ямайке, Сирии, Замбии, Никарагуа и Египте (Morris et.al., 1996; Kurdi A. et al.,1999; Zaghawa A. et al.,2002; Camargos M. et al.,2003;Felmer R. et al.,2005; Meas S. et al.,2004).
В Израиле при исследовании в РИД животных голштино-фризской породы выявили до 56% носителей вируса лейкоза (R. Azuba et.al., 1994).
Максимальные показатели инфицированности были установлены в Польше, где 90-100% крупного рогатого скота дойных стад были поражены вирусом лейкоза (K. Losieczka et. al., 1994).
По данным (Trono K.G. et.al., 2001) инфицированность BJIKPC в Аргентине составляет около 32,85% при поголовье крупного рогатого скота более 60 млн.
В Корее инфицированность BJIKPC молочных коров составляет 54,2%, быков - 0,14%, при общей инфицированности молочных стад в стране 86,8% (Gun-Hyun Suh et al.,2005).
Широкое распространение ВЖРС имеет и в странах Ближнего Зарубежья. Так в республике Беларусь к началу 90-х годов инфекция BJIKPC приобрела характер эпизоотии, поскольку была зарегистрирована в 97,8% хозяйств. Общее количество инфицированных BJIKPC коров, еще содержащихся в серопозитивных группах, снизилось до 18%. (В.М. Лемеш, 1990; A.A. Русинович, 1995).
И
- Київ+380960830922