Ви є тут

Применение полимеразной цепной реакции для идентификации микобактерий и ее диагностическая значимость при туберкулезе крупного рогатого скота

Автор: 
Осипова Елена Петровна
Тип роботи: 
Дис. канд. биол. наук
Рік: 
2004
Артикул:
170686
179 грн
Додати в кошик

Вміст

2
СОДЕРЖАНИЕ
Стр.
1. Введение 4
2. Обзор литературы
2.1. Общая характеристика заболевания.
Возбудитель, эпизоотологические данные и клиническое проявление туберкулеза у крупного рогатого скота 11
2.2. Методы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота 14
2.3. Методы прижизненной диагностики 14
2.3.1. Туберкулинодиагностика (аллергическая диагностика, внутрикожная туберкулиновая проба) 14
2.3.2. Серологическое исследование 18
2.4. Методы послеубойной (посмертной) диагностики 20
2.4.1. Патологоанатомическое исследование 20
2.4.2. Бактериологическое исследование 24
2.4.2.1. Бактериоскопическое исследование 25
2.4.2.2. Культуральное исследование 26
2.4.2.3. Биологическое исследование (биопроба) 30
2.5. Полимеразная цепная реакция при диагностике
туберкулеза крупного рогатого скота 31
3. Собственные исследования
3.1. Материалы и методы 45
3.1.1. Исследования различных видов культур микобактерий 46
3.1.2. Исследования экспериментально зараженных М. bovis
телок 46
3.1.3. Исследования в благополучных и
неблагополучных по туберкулезу хозяйствах 48
3.1.4 Сбор биоматериала, обработка его и выделение ДНК перед постановкой полимеразной цепной реакции
3.1.5. Методика постановки полимеразной цепной реакции с использованием тест-системы senX3-regX3
4. Результаты исследований
4.1. Исследования полимеразной цепной реакцией различных видов культур микобактерий
4.2. Сравнительное изучение диагностической ценности ПЦР-метода и традиционных методов диагностики туберкулеза на экспериментально зараженных М. bovis телках
4.3. Изучение диагностической ценности ПЦР-метода в благополучных по туберкулезу хозяйствах,
где установлена сенсибилизация животных атипичными микобактериями
4.4. Изучение диагностической ценности ПЦР-метода в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах
5. Обсуадение полученных результатов
6. Выводы
7. Практические предложения
8. Список использованной литературы
13
животные постепенно худеют, стоят сгорбленные; передвигаются с трудом, редко ложатся, поднимаются со стоном. Шерстяной покров взъерошен, теряет блеск, кожа теряет эластичность. Через рот и носовые отверстия иногда выделяется слизисто-гнойное истечение. Если поражена плевра, то животное ощущает боль при надавливании между ребрами.
Лимфатические узлы увеличиваются в размерах, становятся болезненными, малоподвижными.
Туберкулез кишечника протекает хронически и сопровождается прогрессирующим исхуданием и перемежающимися, не поддающимися лечению поносами.
Туберкулез вымени характеризуется местным процессом с поражением одной или обеих задних долей, а иногда и передних. Пораженная доля увеличена, диффузно или гнездно уплотнена. В глубине железистой ткани вымени после сдаивания молока прощупываются туберкулезные очаги различной величины и консистенции. Надвыменные лимфатические узлы увеличены до размеров куриного яйца, на ощупь плотные, бугристые.
Поражение матки и яичников сопровождается абортами, яловостью.
Болезнь может протекать генерализованно, то есть с поражением многих органов и лимфатических узлов.
При проведении плановых профилактических и оздоровительных мероприятий можно предотвратить развитие клинических признаков туберкулеза. Клинически больных животных чаще выявляют в длительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах. Необходимо учитывать, что клинически больные животные часто находятся в состоянии анергии и не реагируют на туберкулин. Поэтому, в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах одновременно с туберкулинизацией необходимо проводить и клиническое обследование животных, выбраковывать старых, истощенных, подозрительных в заболевании туберкулезом животных.
14
2.2. Методы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота
Для успешной борьбы с туберкулезом важное значение имеет своевременное и точное выявление зараженных животных. Сложность постановки диагноза на туберкулез, особенно на ранних стадиях развития инфекционного процесса, объясняется длительностью инкубационного периода (недели, месяцы), медленным его течением, в основном в латентной форме (Лаанес С.Х., Тюри Э.И., 1961; Lucos А., 1972; Ridley D., Ridley М., 1987; Шаров А.Н., Лукава М.А., 1991; Кузин А.И., 1992).
Диагноз на туберкулез у животных устанавливают на основании результатов эпизоотологических данных, клинических признаков болезни, патологоанатомических, бактериологических и аллергических исследований.
Диагностическая ценность каждого метода в отдельности зависит от стадии болезни, ее формы, реактивности организма и других факторов. Заболевание считают установленным, если у животных на вскрытии обнаруживают характерные для туберкулеза поражения органов и тканей, или получены положительные результаты биопробы, а также в случаях выделения микобактерий туберкулеза бычьего или человеческого видов из биоматериала убитых животных (Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. Сборник санитарных и ветеринарных правил, 1996; Наставление по диагностике туберкулеза животных, 2002).
2.3. Методы прижизненной диагностики
2.3.1. Туберкулинодиагностика (аллергическая диагностика, внутрикожная туберкулиновая проба)
В нашей стране, как и в других странах, помимо эпизоотологического и клинического методов, основным прижизненным методом диагностики туберкулеза крупного рогатого скота является внутрикожная туберкулиновая проба. Эта проба применяется при контроле благополучия хозяйств по этой