2
ОГЛАВЛЕНИЕ
Стр.
ВВЕДЕНИЕ.................................................. 4
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ...................................... 8
1.1. Питательные среды, применяемые для культивирования вакцинных штаммов микобактерий.... 8
1.2. Антигенная взаимосвязь вакцинных и вирулентных штаммов микобактерий туберкулеза.................. 12
1.3. Методы поддержания я контроля вакцинных
штаммов микобактерий............................. 13
1.4. Технология изготовления и контроль ЖИДКИХ и лиофилизированннх вакцин из аттенуированных штаммов микобактерий................................ 19
П. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ............................ 26
2.1. Материалы и методы исследования ................. 26
2.1.1. Изучение оптимальных условий культивирования штаммов БЦЖ и "БК-Харьков" ..................... 27
2.1.2. Изучение антигенной взаимосвязи вакцинных и вирулентных штаммов микобактерий туберкулеза ............................................... 28
2.1.3. Изучение стабильности аттенуированных
свойств вакцинных штаммов микобактерий.... 29
2.1.4. Изготовление и контроль жидких и лиофили-зированных вакцин из штаммов БЦЖ и "БК-Харьков" ............................................. 32
Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.............................. 35
3.1. Оптимизация условий культивирования штаммов
БЦЖ и "БК-Харьков" .............................. 35
3.2. Результаты изучения антигенной взаимосвязи вакцинных и вирулентных штаммов микобактерий 48
3
Стр.
3.3. Стабильность аттенуированных свойств штаммов "ЕК-Харьков" и БЦЖ при длительном культивировании в лабораторных условиях ................................................... 54
3.4. Сухие и жидкие противотуберкулезные вакцины из аттенуированных штаммов ЩЖ и "ЫС-Харьков" ............................................. 71
1У. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ........................ 96
ВЫВОДЫ ....................................................... 110
ПРЕДЛОЖЕНИЯ................................................... 112
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ............................................. ИЗ
ПРИЛОЖЕНИЕ.................................................... 134
13
рое внутривидовое серологическое различие микобактерий бычьего вида.
L.Ryszarda , R.Ludv/lk (1978) сравнивая антигенные структуры таких субштаммов, как БЦЖ Рио-де-Жанейро, БЦЖ - Польша (R -форма) и БЦЖ - Польша (S -форма), выявили характерные антигенные спектры, для каждого из исследованных штаммов.
Приведенные данные свидетельствуют о сложности антигенной структуры микобактерий, изучение ее, как отмечает М.М.Авербах (1976), необходимо для того, чтобы иметь ясное представление об иммунологических сдвигах в сенсибилизированном микобактериями макроорганизме. Антигенные связи различных микобактерий вакцинных штаммов между собой и с микобактериями туберкулеза изучены недостаточно.
1,3. Методы поддержания и контроля вакцинных штаммов микобактерий
Основной задачей исследователя после получения вакцин--ного штамма является сохранение его характеристик по возможности в течение максимального срока в неизмененном состоянии (Н.Н.Гинсбруг, 1966). Большое количество работ посвящено разработке методов культивирования и поддержания в лабораторных условиях вакцинных штаммов в целях сохранения их в определенной степени аттенуации (Пастер Л., 1880; Ценковский Л.С.,
1886 и др.).
Л.Пастер (1885), Д.Ф.Конев (1907), В.М.Жданов и С.Я.Гай-дамович (1966) для поддержания штаммов в определенной степени аттенуации проводили пассаж через кроликов, белых мышей и голубей. Для этих целей использовали также куриные эмбрионы, . . культуры клеток тканей (Смородинцев A.A., 1958; Туманский В.И.
14
к др., 1958) и различные среды (Коробкова Е.И., I960).
А.Кальметт (1921) для культивирования в лабораторных условиях вакцинного штамма БЦЖ наиболее приемлемой считал глицериново-картофельную среду Павловского с последующими пересевами дважды подряд на картофель с бычьей желчью после каждой серии из 10-12 последовательных генераций. Данный способ культивирования обеспечивает устойчивость и сохранение исходных свойств штамма БЦЖ» он широко используется в лабораториях различных стран.
К настоящему времени изучен ряд субштаммов (Suter E.,
Dubos r.j. , 1951), отличающихся по своей вирулентности, по способности размножаться в организме и иммуногенным свойствам.
А.И.Тогунова (I960), изучая 13 субштаммов БЦЖ, в том числе полученных из Франции, Швеции, ГДР, Дании и Бразилии, выявила их отличие между собой по ряду свойств. Аналогичные данные были представлены А.М.Розенберг с соавт. (1965). Ими было показано, что шведский субштамм, культивируемый исключительно на картофельной среде с желчью с пересевами через каждые 14 сут, значительно уступает по приживаемости и иммуногенности советскому субштамму БЦЕ-1, культивируемому на среде Сотона с пассажами на картофельной среде с бычьей желчью. R.E. Dubos,с.Н. Pierce (1956) установили, что штамм БЦЖ, поддерживаемый в лаборатории "Tice" в Чикаго, в значительной степени утратил свою иммунизирующую способность. По данным Ю.К.Вейсфейлера (1975), в Венгрии до 1958 года применяли культуру БЦЖ, которая при внутрикожном введении в дозе 0,1 мг не вызывала местной реакции у привитых животных и обладала значительно пониженными иммунизирующими свойствами.
- Київ+380960830922