СОДЕРЖАНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ....................................................4
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Туберкулез крупного рогатого скота — проблема инфекционной патологии животных............................................12
2.2. Иммунная система крупного рогатого скота: основные понятия.17
2.3. Механизмы иммунного ответа у животных, ^
инфицированных M.bovis........................................38
2.4. Иммунологические методы диагностики туберкулеза
крупного рогатого скота.......................................40
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Антигены микобактерий......................................47
3.2. Экспериментальные животные.................................47
3.3. Благополучные и неблагополучные по туберкулезу хозяйства, аллергические и лабораторные исследования
на туберкулез................................................48
3.4. у-ИФН ИФА..................................................49
3.5. Электрофорез в ПААГ-ДСН....................................52
3.6.Статистическая обработка результатов.....................53
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
4.1. Отработка постановки у-ИФН ИФА и внесение
дополнений в методику........................................54
4.2. Динамика постинфекционного Т-клеточного иммунного
ответа у экспериментально зараженных M.bovis телят..............66
4.3. Сравнительное изучение диагностической ценности внутрикожной туберкулиновой пробы и метода у-ИФН ИФА в благополучных по туберкулезу хозяйствах.......................76
4.4. Сравнительное изучение диагностической ценности внутрикожной туберкулиновой пробы и метода у-ИФН ИФА в неблагополучном по туберкулезу хозяйстве......................91
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ...................................................96
6. ВЫВОДЫ.......................................................108
7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.....................................110
8. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.............................111
2
ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕННЫХ НАЗВАНИЙ
ИФА - иммуноферментный анализ
ВТП - внутрикожная туберкулиновая проба
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РАЛ - реакция агглютинации латекса
РБТЛ - реакция бласттрансформации лимфоцитов
у-ИФН — у-иитерферон
у-ИФН ИФА - метод иммуноферментного анализа по определению уровня у-интерферона в крови
ППД-туберкулин - очищенный белковый препарат туберкулина, полученный из культуры микобактерий соответствующего вида (от англ. PPD - Purified Protein Derivative)
KAM - комплексный аллерген из атипичных микобактерий ИЛ - интерлейкин
Тц1 -клетки - Т-клетки-хелперы 1-го класса (Т- клетки воспаления)
МкА - моноклональные антитела
ОП - коэффициент оптического поглощения
ОП 450-коэффициент оптического поглощения при длине волны 450 нм п.з. — после заражения
ФБ- фосфатно-солевой буфер (0,01 М фосфатно-буферный раствор, 170 mMNaCl, pH 7,2 - 7,4)
3
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 123 стр. машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка цитированной литературы. Материалы диссертации иллюстрированы 15 таблицами и 7 рисунками. Список литературы включает 175 источников (12 отечественных и 163 зарубежных авторов).
11
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. ТУБЕРКУЛЕЗ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА - ПРОБЛЕМА ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ ЖИВОТНЫХ
Туберкулез - хронически протекающая инфекционная болезнь домашних и диких животных, птиц, а также человека. Характеризуется образованием в различных органах и тканях туберкулов и некротическим распадом их. Этиологическим агентом туберкулеза крупного рогатого скота является Mycobacterium bovis также вызывающий заболевание у многих видов домашних и диких животных.
Туберкулез в ряду инфекционных болезней занимает особое место. Во-первых, потому, что болеют люди, все виды животных и птиц. Во-вторых -эта болезнь значительно распространена и в настоящее время, хотя с момента открытия ее возбудителя Робертом Кохом (1882) прошло более 100 лет. Самым тяжелым последствием распространения туберкулеза у животных является заражение туберкулезом людей. Обычно оно происходит при употреблении в пищу продуктов животноводства, или уходе за больными животными. Поэтому борьба с туберкулезом животных - важнейшая проблема, которой уделяется большое внимание во всех странах мира. Причем, ликвидация туберкулеза животных имеет не только экономическое, но и социальногигиеническое и эпидемиологическое значение.
Источником возбудителя туберкулеза крупного рогатого скота являются больные животные, которые со слюной, мокротой, молоком, мочой и фекалиями - выделяют при интенсивном генерализованном процессе за сутки в среднем 30-40 млн. микобактерий. При этом контаминируются животноводческие помещения, пастбища, предметы ухода, корма, воздух, которые в конечном итоге служат факторами передачи возбудителя инфекции. Как правило, в благополучные хозяйства туберкулез заносится с ввозимыми животными, при нарушении общепринятых правил ввоза (животных не исследуют на туберкулез, не выдерживают в карантине и т.п.). После заноса воз-
12
- Київ+380960830922