Ви є тут

Сап : разработка, изготовление, контроль и стандартизация диагностикумов

Автор: 
Букова Наталия Константиновна
Тип роботи: 
Докторская
Рік: 
1999
Артикул:
1000233656
179 грн
Додати в кошик

Вміст

ОГЛАВЛЕНИЕ
Стр.
ВВЕДЕНИЕ 5
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 21
1.1. Возбудитель сапа Pseudomonas (Burk^ilderia)
mallei; штаммы, их свойства и поддержание 21
1.2. Аллергическая диагностика сана 39
1.3. Серологическая диагностика сапа 56
1.4. Профилактика и ликвидация болезни в мировой
практике 67
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 79
2.1. Материалы и методы исследований 79
Результаты исследований 112
2.2. Результаты изучения некоторых штаммов
возбудителя сапа 112
2.2.1 Культуральные, морфологические,
тинкториальные, ферментативные и вирулентные
свойства штаммов 112
2.2.2. Агглютиногенные свойства штаммов и степень
антигенного родства штаммов 118
2.2.3. Разработка системы поддержания производственного
штамма № 5584 возбудителя сапа, применяемого для изготовления диагностикумов 122
2.3. Контроль и стандартизация маллеина 126
2.3.1. Разработка антигена для иммунизации животных 126
2.3.2. Выбор лабораторной модели для контроля активности
129
134
138
155
155
155
160
161
165
166
174
177
177
181
185
з
маллеина
Определение корреляции результатов контроля активност и маллеина на морских свинках и сапных лошадях
Разработка стандартного образца (СО) маллеопротеина и определение его свойств Стандартизация производственных серий маллеина
Контроль и стандартизация антигена сапного для РСК Разработка стандартного образца (СО) полиглобулина сапного и определение его свойств Стандартизация производственных серий антигена сапного для РСК Использование принципа стандартизации антигенов для РСК при других инфекциях Определение видовой специфичности возбудителя сапа
Получение и испытание различных фракций возбудителя сапа штамма № 5584 Изучение антигенного родства возбудителя сапа с другими микроорганизмами Разработка антигена сапного цветного для пласт инчатой РА
Определение параметров технологии изготовления антигена Определение специфичност и антигена Определение диагностической эффективности антигена
31
бакт^иостатического действия. Хлортетрациклин при пероральном введении оказался наилучшим препаратом, обеспечивающим 100%-ное излечение кошек при экспериментальном сапе.
Н.Г.Ипатенко и др. (152) изучали бакгериостатическое и бактерицидное действие четырех препаратов на культуру штамма № 22265, выделенного ими в Монголии от больной сапом лошади с поражениями лег ких. Установлено, что максимальный эффект оказывает дибиомицин, затем в порядке убывания следуют стрептомицин, биомицин и пенициллин.
Если 30-40 лет назад для этой цели предлагались указанные препараты, а также норсульфазол и др., то в последнее десятилетие на смену им приходят новые лекарственные вещества.
Установлено достоверное синергидное взаимодействие сульфаниламидных препаратов (сульфазина, сульфаметоксазола, сульфомонометок-сина) с триметопримом и предложены их сочетания для лечения экспериментальною сана, изучена чувствительность 13 штаммов P. mallei к фтор-хинолонам (циирофлоксацину, офлоксацину, норфлоксацину) in vitro и эффективность их при лечении сапа, моделируемого на морских свинках и золотистых хомячках (30, 213).
Определено, что сочетание бисептола с хинолонами (в том числе с оксолинисвой кислотой) обеспечивает наилучший антибактериальный эффект в опытах in vitro и выживаемость 100% животных при экспериментальном сапе, способствует скорейшей элиминации возбудителя из организма и санации последнего, что позволяет сократить курс лечения. Данное сочетание препаратов служит гарантией невозможности формирования устойчивых к сульфаниламидам и триметоприму мутантов P.mallei у приматов, что с большой долей достоверности можно экстраполировать на организм человека (113, 227, 228). Отмечается также, что обеспечение данного эффекта невозможно при использовании одного бисептола (143).
32
О существовании возбудителя сапа в разных формах по степени вирулентности и в связи с этим об изменении свойств этого микроорганизма известно давно. Возбудитель сапа, но данным A.Stanton et al., 1925, Scherwood et al., 1933 (цит. no 1), подразделяется на две подгруппы, одна из которых имеет антигены, общие с возбудителем мелиоидоза.
j.Fournier (406) разделил возбудитель сапа на три подгруппы - а, Ь, с и выяснил, что штаммы подгруппы а содержат соматические антигены О-и К-, общие с антигенами возбудителя мелиоидоза, и являются вирулентными, а штаммы подгрупп b и с - авирулентными, у которых в результате длительног о культивирования на питательных средах изменилась антигенная структура.
А.К.Адамов и др . (1) также установили, что по антигенной структуре вирулентные штаммы возбудителя сапа отличаются от авирулентных, и делают предположение, что у бактерий авирулентных штаммов не синтезируется антиген, который образуется у вирулентных бактерий сапа и мелиоидоза. Авторы отмечают, что культуры штаммов, у которых в мазках с агара обнаруживаются длинные тонкие нити, были авирулентными при заражении золотистых хомячков. Однако у потерявших вирулентные свойства штаммов №№ 5584 и 815/54 после нескольких пассажей на восприимчивых животных была восстановлена вирулентность и типичная морфология клеток.
О возможности ослабления вирулентности возбудителя сапа упоминал В .Д. Крылов (201), дифференцировать вирулентные и авирулентные культуры этого возбудителя при помощи феномена восстановления метиленовой сини предлагал В.М.Гурвич (102).
Способность культуры возбудителя сапа диссоциировать изучал Е.К.Волик (67), о разной степени вирулентности двух форм (R- и S-) этого микроорганизма и в связи с этим об изменении его свойств писали С.Barber et al. (380), N.Muntiu et al. (458) и S.Oeriu et al. (463). Эти авторы