ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ......................................................... 4
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 9 - 41
1.1. Иммунодефицитные состояния и их коррекция с использованием имхмунотропных лекарственных средств................................9
1.2. Пептидные биорегуляторы из органов и тканей иммунной системы 15
1.3. Иммунологически активные факторы тимуса и лечебные препараты на их основе.............................................................24
1.4. Природные цеолиты - основа для биологических активных добавок 35
ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 .Экспериментальные животные....................................42
2.2.Материалы 42
2.3 .Методы........................................................42
2.3.1. Выделение биологически активных фракции тимуса (АФТ).....44
2.3.2. Реакция активного розеткообразования (ЕА-РОК)............45
2.3.3. Определение массы и клеточности центральных и периферических органов иммунной системы.....................................45
2.3.4. Реакция “трансплантат против хозяина” (РТПХ).............46
2.3.5.Реакция гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ).....47
2.3.6. Исследование супрессорной активности Т-лимфоцитов........47
2.3.7. Метод определения антителообразующих клеток..............48
2.3.8. Реакция прямой гемаггл юти нации.............................49
2.3.9. Определение фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов (ПМ) мышей в отношении Saph. aureus.............................49
2.3.10. Метод Е-розеток........................................... 50
2.3.11. Метод ЕАС-розеток...........................................51
2.3.12..Исследование фагоцитарной активности нейтрофилов............51
2.3.13. Морфометрический метод исследования микроанатомии тимуса ................................................................52
2.3.14. Определение бактерицидной активности сыворотки по
О.В.Бухарину 53
2.3.15. Метод “открытое поле”.......................................53
2.3.16. Статистическая обработка результатов........................54
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Сравнительная оценка биологической активности фракции тимуса 55
3.2. Получение кормовой добавки “Цеохол-Т”.............................58
3.3. Изучение иммунобиологической эффективности “Цеохола-Т” в опытах на лабораторных животных при экспериментальной азатиоприновой иммуносупрессии...................1....................................61
3.3.1. Влияние “Цеохола-Т” на фагоцитарное звено иммунного ответа мышей на модели иммунодефицитного состояния, вызванного азатиоприном .................................................61
3.3.2. Экспериментальная оценка эффективности “Цеохола-Т” в рефляции клеточного иммунитета мышей на фоне азатиоприновой иммуносупрессии.................................................63
11
полным отсутствием синтеза антител в первые дни после рождения, что компенсируется поступлением в их организм готовых антител из материнского организма, через молозиво (лошади, жвачные, свиньи) [96].
На сегодняшний день, в современном животноводстве условия содержания и кормления животных отклоняются от оптимальных, в итоге происходит снижение иммунной реактивности молодняка, увеличивается рост числа заболеваний, характеризующиеся как вторичные иммунодефицитные состояния. В связи с этим важное значение приобретают исследования по установлению полноценного иммунного статуса организма животных [64,148].
В настоящее время имеется ряд средств, оказывающих влияние на иммунный ответ, имеющих различный механизм действия и разные точки приложения. Эти соединения объединяют под общим названием “иммунотропные лекарственные средства” (ИТЛС). Прежде всего следует определить, что мы понимаем под этим термином. По М.Д. Машковскому [85], “препараты, корригирующие процессы иммунитета (иммуномодуляторы, иммунокорректоры)”, делятся на препараты, стимулирующие процессы иммунитета, и иммунодепрессивные препараты (иммуносупрессоры). P.M. Хаитов и Б.В. Пинегин [135] считают, что можно выделить и третью группу препаратов этого класса - иммуномодуляторы, то есть вещества, оказывающие разнонаправленное действие на иммунную систему в зависимости от её исходного состояния. При этом подразумевается, что такой препарат повышает пониженные и понижает повышенные показатели иммунного статуса. Таким образом, по эффекту действия на иммунитет ИТЛС можно разделить на иммуносупрессоры, иммуностимуляторы и иммуномодуляторы.
Препараты иммуносупрессивного действия обладают общим свойством подавлять размножение клеток путем блокады или деструкции ядерной ДНК, в результате чего прерывается необходимая для клеточного деления ее репликация. Широкое применение эти препараты получили в
трансплантологии, онкологии, при лечении аутоиммунных заболеваний [53,106,118].
В настоящее время иммуносупрессанты разделяют на следующие группы : а) алкилирующие агенты; б) тиопурины; в) антиметаболиты; г) продукты грибков, включая циклоспорин; д) кортикостероиды; е) антилимфоцитарный глобулин (АЛГ) [118]. Среди них выделяют антиметаболиты (метатрексат, азатиоприн, меркаптопурин), которые в силу своего структурного сходства с физиологическими субстратами или кофакторами тормозят синтез ДНК и РНК, т.е. включаются в синтез нуклеиновых кислот как “ложные нуклеотиды”, и затем блокируют его. Одним из наиболее широко применяемых антиметаболитов является азатиоприн. Азатиоприн представляет собой имидазольное производное меркаптопурина. В организме он подвергается ферментативному расщеплению на меркаптопурин и тиоимидазольное соединение и оказывает иммуносупрессивное действие по-существу за счет меркаптопурина. Тиоимидазольному соединению тоже свойственно подавлять иммунитет.
Известно, что азатиоприн тормозит проявление функциональной активности генов, вызывая необратимые и обратимые изменения в ключевых пунктах митотического цикла, связанных с репрограмированием синтеза белка. Иммуносупрессивное действие азатиоприна состоит в том, что он подавляет пролиферацию иммунокомпетентых клеток. Об этом свидетельствует данные о максимальном иммунодепрессивном действии азатиоприна через 48 часов после его введения, а именно в период первичного иммунного ответа, который в свою очередь характеризуется активной пролиферацией иммунокомпетентных клеток [32]. По данным Bach и Dardenne [152,155] азатиоприн в низких концентрациях препятствует in vitro Т-розеткообразованию за счет блокады поверхностных рецепторов. В результате становится невозможным дальнейший ход иммунной реакции - деление
- Київ+380960830922