РАЗДЕЛ 2
МЕТОДЫ ОБСЛЕДОВАНИЯ И ЛЕЧЕНИЯ
2.1. Общая методология работы
Диссертационная работа проводилась на клинической базе кафедры педиатрии с курсом физиотерапии ФПО (заведующий - доктор медицинских наук, профессор Н.Н. Каладзе) Крымского государственного университета им. С.И. Георгиевского, в Республиканской детской клинической больнице г. Симферополя, в международном детском медицинском центре "Евпатория", г. Евпатория. Экспериментальная часть работы выполнена совместно с очным аспирантом А.Н. Самойловым на кафедре патологической анатомии (заведующий - доктор медицинских наук, профессор А.К. Загорулько) Крымского государственного университета им. С.И. Георгиевского. Научная работа спланирована и выполнена в соответствии с требованиями к осуществлению научных исследований вообще и для случаев медицинских клинических исследований.
Для обоснования назначения препарата естественного экзогенного сурфактанта в терапии БА необходимо знать точки его приложения и, как он воздействует на ультраструктуру респираторного тракта. Между тем, в изучении морфологических изменений дистальных воздухоносных путей при БА имеется ряд существенных трудностей. В частности, исследовать морфологические изменения в бронхиолах у живых пациентов с БА не представляется возможным, поскольку взятие бипсийного материала может быть осуществлено лишь из более или менее крупных бронхов, а на результаты изучения аутопсийного материала оказывают влияние изменения либо посмертного характера, либо изменения дистальных воздухоносных путей, имеющие место у погибших пациентов, но не связанные с БА. В связи с этим было решено провести эксперимент на лабораторных животных, смоделировать у них БА и оценить ультраструктурные изменения, возникающие при БА и после применения сурфактантной терапии.
Экспериментальный материал был получен от 55 половозрелых белых крыс с массой тела от 165 до 300 г. (таблица 2.1.)
Использовались крысы из вивария Крымского государственного медицинского университета.
Таблица 2.1.
Распределение лабораторных животных по группам
Количество крысМодель БАЛечениеЭуфиллинСурфактант1 группа12+--2 группа13++-3 группа12+-+4 группа13+++5 группа5---
В 1-ю группу вошли 12 белых крыс, у которых была смоделирована БА, по J.J. de Bie и соавторов [221]. К крысам 1-й группы лечебные мероприятия не применялись.
Во 2-ю группу вошли 13 белых крыс, у которых была смоделирована БА, и в качестве лечебных мероприятий применяли внутримышечные инъекции 24% эуфиллина из расчёта 100 мг на кг массы тела.
В 3-ю группу вошли 12 белых крыс, у которых была смоделирована БА, а в качестве лечения применяли интратрахеальные инстилляции естественного сурфактанта "Сузакрин" из расчёта 150 мг на 1кг массы тела.
В 4-ю группу вошли 13 белых крыс, у которых была смоделирована БА, а в качестве лечения бронхоспазма применяли внутримышечное введение 24% эуфиллина и интратрахеальные инстилляции препарата естественного сурфактанта "Сузакрин" из расчёта 150 мг на 1 кг массы тела.
В 5-ю группу вошли 5 здоровых белых крыс в качестве контроля.
Забой животных осуществлялся под тиопенталовым наркозом, декапитацией.
Топографическую вырезку материала, его фиксацию для электронной и сканирующей микроскопии, изучение биохимических свойств системы сурфактанта производили, как описано в разделе IV (экспериментальная часть).
Основу клинической работы составил анализ клинико-анамнестических наблюдений и лабораторно-инструментальных исследований 140 детей, страдающих БА, проживающих на Украине. Отбор детей проводился в соответствии с критериями БА, предложенными симпозиумом по усовершенствованию классификации неспецифических болезней легких у детей (Москва 1995) и рабочей группой экспертов по созданию национальной программы "Бронхиальная астма у детей, стратегия лечения и профилактика" (Москва 1997). Из них, 100 детей находились в остром периоде заболевания и проходили курс лечения в пульмонологическом отделении РДКБ г. Симферополя. Остальные 40 детей были в состоянии клинико-лабораторной ремиссии и находились на санаторно-курортном лечении в МДМЦ "Дружба" г. Евпатория. Дети, лечившиеся в стационаре, проживали на экологически благоприятной территории Крыма.
Принцип формирования клинических групп определялся целью предпринятого исследования, суть которого заключалась в установлении характера нарушений в системе СЛ у детей с БА и выяснении возможности коррекции этих нарушений препаратом естественного сурфактанта "Сузакрин". Обследуемые дети были разделены на 4 группы, в зависимости от проводимого лечения. В первую группу вошло 50 детей, находившиеся на стационарном лечении, которым проводился курс общепринятой терапии БА, согласно международному консенсусу. Вторую группу составили 50 детей, в комплексное стационарное лечение которых включали ультразвуковые ингаляции препарата естественного экзогенного сурфактанта. Третью и четвертую группы (40 человек) составили дети, находившиеся на санаторном лечении и получавшие традиционный курс климато-бальнео-терапевтического лечения, разработанный для данной категории больных. Помимо этого, им назначали курс биорезонансной вибростимуляции, состоящий из 8 процедур, ежедневно. Дети четвертой группы (20 человек), на фоне санаторно-курортного комплекса, принимали ультразвуковые ингаляции препарата сурфактанта "Сузакрин" однократно, в дозе индивидуально рассчитанной для каждого ребенка. Контрольную группу составили 30 здоровых детей того же возрастного диапазона. Отбор в контрольную группу здоровых детей осуществлялся в соответствии с признаками нормы, предложенной C. Blackbourn для проведения эпидемиологических исследований по выявлению бронхолегочной патологии у детей: отсутствие в анамнезе хронических заболеваний дыхательной системы и респираторных проявлений аллергии; отсутствии респираторных инфекций в течении 2-х месяцев к моменту обследования; не курившие; дети с нормальн