РОЗДІЛ II
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
2.1. Гістологічні дослідження шкіри голови людини
3разки шкіри у вигляді готових зрізів були надані нам (на підставі клопотання Міністерства внутрішніх справ України) клінікою Інституту нейрохірургії Академії медичних наук України. Відбір зразків шкіри проводився із трупів, що були в моргу клініки. Вік трупів: 30-35 років, європейська раса, місце проживання - Україна. Експериментальні зразки відбиралися із трупів, у медичних книжках яких було зазначено про їх наркотичну залежність, а за контроль слугували зразки шкіри, відібрані у трупів без наркотичної залежності.
Підготовка зразків проводилася за методикою Н.А. Діомидової, О.П. Панфілова та Є.К. Сусліна (1960). Після промивання у проточній воді зразки поміщали в 18-% розчин желатину на одну добу в термостат при температурі +37 С, потім переносили в 25-% розчин желатину на три години. Після ущільнення в 5-% формаліні шкіру очищали від желатину і промивали в проточній воді 15-20 хв., потім перекладали в дистильовану воду, переносили на столик заморожувального мікротому ПС-2 і готували зрізи.
Дослідження зразків шкіри проведено з використанням оптичного мікроскопа " CARL ZEISS JENA" (світло штучне) при збільшеннях 100х та 400х.
2.2. Морфологічне дослідження волосся людини
Морфологічні дослідження проводили за допомогою мікроскопа CARL ZEISS JENA", окулярного мікрометра МОВ - 1- 15 * та вимірювальної системи ІМБІ-3 з урахуванням відповідних рекомендацій [120]. Також проводилось дослідження зображення волосся у вторинних електронах, отримане за допомогою скануючого електронного мікроскопа "JSM-6060A".
Об'єктом дослідження було волосся жінок та чоловіків, які поступили у 2001 - 2002 рр. на лікування від наркотичної залежності у Київську міську наркологічну лікарню (м. Київ, пров. Деміївський, 5а). 3разки волосся ми відбирали на підставі клопотання МВС України щодо сприяння у відборі зразків волосся із дозволу головного лікаря лікарні та за згоди хворих.
Для експерименту відбирали волосся осіб (по 10 волосин від кожної особи: 67 чоловіків, 36 - жінок), віком від 17 до 35 років, термін вживання наркотиків від шести місяців до трьох років.
За контроль слугувало волосся, відібране серед знайомих осіб, котрі не вживали наркотичні засоби та психотропні речовини (по 10 волосин із кожної особи): чоловіків - 18 , жінок - 11 такого ж віку,
Вживані дози наркотиків (екстракційний і ацетильований опій та героїн) становили від 0,5 - 2 г сухої речовини на добу. Героїн (діацетилморфінгідрохлорид) - біла кристалічна речовина. Без запаху, гірка на смак, яка розчиняється у воді (1:6), етиловому спирті (1:12), хлороформі (1:6), не розчинна в діетиловому ефірі і хлороформі. Опій - це висушений молочний сік, який виділяється з недостиглих головок маку снодійного. В опії міститься понад 20 алкалоїдів. Головними алкалоїдами опію є морфін, кодеїн, папаверин, наркотин, нарцеїн, тебаїн та ін. Опійні алкалоїди містяться не лише в молочному соку неспілих коробочок маку снодійного, у значно менших кількостях вони є в коробочках та соломі доспілого маку [65].
Відбір зразків волосся проводився з допомогою продезинфікованих ножиць із тім'яної частини голови, якомога ближче до шкірного покриву. Відібрані зразки поміщались у паперові пакети із зазначенням: статі, кольору волосся, року народження, групи крові, виду наркотиків та тривалості їх вживання. Першим етапом проведення дослідження був огляд волосся з метою виявлення нашарувань (крові, мастил, хімічних речовин та ін.). Вивчення проводили за допомогою мікроскопа "МБС-10". З метою видалення пото-жирових речовин, можливої наявності різних нашарувань та забруднень зразки волосся промивали в теплій воді 2% розчином господарського мила. Промиті зразки послідовно тричі оброблялися надлишком дистильованої води і підлягали обезжиренню сумішшю діетилового ефіру та етанолу (1 : 1). Для зняття пилу з волосся його промивали спиртом із наступним випаровуванням. Досліджуване волосся умовно поділяли на два кольори: темне і світле. Форму волосся визначали візуально: пряме, хвилясте або кучеряве. Довжину волосся вимірювали міліметровою лінійкою. Товщину вимірювали за допомогою мікроскопа "CARL ZEISS JENA" з окуляр-мікрометром при збільшенні 400х (вимір проводився на однаковій відстані від кореня волосини). Кутикулу оцінювали при скануванні на електронному мікроскопі JSM-6060A, напиливши зразки золотом і по негативних її відбитках на нітроцелюлозному лаку з подальшим переглядом їх під мікроскопом "CARL ZEISS JENA".
Коркову речовини та серцевину досліджували на просвітлених препаратах у краплі дистильованої води в прохідному світлі мікроскопа при збільшеннях 250х - 400х. Для опису серцевини волосину продивлялися під мікроскопом "CARL ZEISS JENA" по всій довжині. У зв'язку з можливою наявністю повітря підготовку волосини проводили за допомогою методики М.А. Броннікової [28]. Волосину поміщали в ксилол і розрізали гострою бритвою в поперечному напрямку (ксилол витісняє повітря). У деяких випадках волосину кип'ятили в ксилолі. За літературними даними [128], тяж серцевини може бути безперервним, перервним, фрагментарним або серцевина відсутня, а також рівномірним по довжині або вузловим (при різкій зміні товщини серцевини). Як відомо, серцевина людського волосся складається з двох різноманітних структурних компонентів: волокнуватий каркас (кератин) і гомогенний матеріал, розміщений у "проміжках" цього каркасу.
Колір вмісту класифікували як: світло-коричневий, жовтий, сірий, сіро-жовтий, світло-жовтий, сіро-коричневий, світло-коричневий. Кількісний вміст пігменту визначали промиванням у медичному ефірі, підсушуванням та кип'ятінням упродовж 15 хвилин у концентрованій НСl. Після чого пігмент у вигляді дрібних гранул випадав в осад (упродовж трьох діб). Для дослідження форми пігментних гранул фрагмент волосини упродовж доби витримували у ксилолі, після цього розтирали у ступці й готували