Глава 2
Материал и методы исследования
Изучено 250 случаев рака желудка на операционном и секционном материале, из них
87 (34,8%) случаев кишечного типа рака, 122 (48,8%) случая диффузного и 41
(16,4%) случай смешанного или неклассифицированного типа. Распределение
материала по полу показало, что чаще раком желудка болеют мужчины (147 случаев
– 58,8%), чем женщины (103 случая – 41,2%). Однако указанное распределение
материала по полу было неоднородным среди различных гистологических типов: с
одной стороны среди больных раком кишечного и смешанного типов значительно
преобладали мужчины (66,5% и 65,9% случаев), с другой – в группе больных раком
диффузного типа преобладание мужчин было незначительным (51,6% случаев).
Возраст больных колебался значительно: от 17 до 79 лет, средний возраст среди
всех больных составил 54,4 года. Больные раком кишечного и смешанного типов
были несколько старше (58,4 и 55,1 года соответственно) по сравнению с больными
раком диффузного типа (51,3 года). Максимальный возраст больных отличался мало
у больных разными формами рака (от 74 лет при смешанном типе до 79 лет при
кишечном). Минимальный возраст отличался в большей степени: самым молодым
больным с диффузным типом рака желудка был 17-летний мужчина, в том время как
больные раком кишечного и смешанного типов были в возрасте соответственно 32 и
34 года.
Опухоли преимущественно локализовались в антральном отделе желудка (133 случая
– 53,2%), значительно реже в фундальном отделе (56 случаев – 22,4%), на границе
фундального и антрального отделов (34 случая – 13,6%), еще реже отмечено
поражение кардиального отдела (16 случаев – 6,4%) и тотальное поражение желудка
(11 случаев – 4,4%).
В диффузном и смешанном типах рака значительно чаще встречаются случаи с
инвазией сосудов и метастазами (44,3% и 43,9% соответственно), чем в кишечном
типе рака (25,3%). По наличию опухолевых эмболов в сосудах мы судили о
инвазивном потенциале опухоли, основываясь на работе T. Mita, T. Shimoda (2001)
[160], согласно которой инвазия опухолью лимфатических сосудов при раке желудка
была наиболее значимой детерминантой (OR 8,68) для метастазов в лимфатические
узлы, которые резко ухудшают прогноз.
Пораженные раком желудки описывались макроскопически, в дальнейшем проводили
гистотопографическое исследование опухоли. Для этого вырезались и нумеровались
кусочки опухоли, которые фиксировали в 10% и 4%-ном растворах формалина,
жидкостях Карнуа и Севки, нефиксированные кусочки быстро замораживались для
изготовления криостатных срезов.
Из фиксированного материала изготавливались парафиновые блоки. Срезы
окрашивались гематоксилином и эозином. Для выявления коллагеновых волокон
использовалась окраска пикрофуксином по ван Гизону. Для определения количества
митозов использовалось выявление нуклеиновых кислот окраской галлоцианином и
хромовыми квасцами, количество митозов подсчитывалось как среднее число
митотических фигур в поле зрения под большим увеличением (400Х) из 10
последовательно взятых полей зрения.
В криостатных срезах методом азосочетания выявлялась активность неспецифической
эстеразы, кислой и щелочной фосфатаз, активность пероксидазы в лейкоцитах
выявлялась диаминобензидином. Активность кислой фосфатазы обнаруживается в
макрофагах стромы, неспецифическая эстераза характерна для апудоцитов, а также
для кишечного эпителия, макрофагов стромы. Определение активности щелочной
форсфатазы необходимо для идентификации эндотелия функционально активного
сосудистого русла, с проведением морфометрической оценки его по методу Г.Г.
Автандилова с использованием окулярной сетки [2, 3]. Длина функционально
активного сосудистого русла ниже 40 мм/мм3 расценивалась как малая, от 40 до
100 мм/мм3 – как умеренная и свыше 100 мм/мм3 – большая.
Для оценки характера слизи были использованы гистохимические методы:
PAS-реакция, которая позволяет выявлять нейтральные полисахариды, входящие в
состав секрета покровно-ямочного эпителия желудка, мукоидных шеечных
(добавочных) клеток, клеток пилорических и кардиальных желез; для выявления
несульфатированных гликозаминогликанов (ГАГ) применялась окраска альциановым
синим при рН 2,5, для выявления сульфатированных ГАГ применялась окраска
альциановым синим при рН 1,0.
Каждый из показателей: количество стромы, степень клеточной инфильтрации ее,
интенсивность слизеобразования опухолевыми клетками оценивался
полуколичественно как слабое, умеренное и высокое по визуально-аналоговой шкале
[4]. О большом количестве стромы говорили тогда, когда ее количество
преобладало над паренхимой, в случае преобладания опухолевых клеток над
соединительной тканью, количество стромы было расценено как малое. Наконец, при
примерно равном количестве двух компонентов опухоли количество стромы
определялось как умеренное.
Для выявления эндокринной дифференцировки использовались методы импрегнации
серебром по Гримелиусу и Масону, окраску по Севки, обнаруживающую биогенные
амины. В ограниченном числе случаев (10) было проведено иммуногистохимическое
исследование с моноклональными антителами к нейронспецифической энолазе (NSE),
гастрину, а также применялись другие моноклональные антитела: к
панцитокератину, виментину, десмину, б-гладкомышечному актину для оценки
особенностей паренхимы и стромы, для оценки выраженности и состава клеточного
инфильтрата стромы антитела к CD45 (общий лейкоцитарный антиген), CD45Ro
(лейкоциты, часть макрофагов), CD20 (В-лимфоциты).
В основу классификации степени выраженности эндокринноклеточной дифференцировки
(ЭКД) были положены критерии E. Tahara [214]. Были выделены эндокр
- Київ+380960830922