РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ
2.1. Загальна характеристика обстежених хворих
Для досягнення поставленої мети було обстежено 395 дітей віком 11–15 років
(n=198 – дітей, що проживають в низинній місцевості, та n=197 – школярів
пригірської місцевості). З них було відібрано групу дітей (n=109) з поєднаною
патологією верхніх відділів травного тракту, які складали наступні досліджувані
групи. Було відібрано групу дітей n=70 жителів міста Ужгорода при наявній
йодній недостатності та мінеральному дисбалансі по результатам дослідження сечі
та крові на фоні поєднаної патології травного тракту (хронічний гастродуоденіт
у фазі ремісії зі збереженою секреторною функцією шлунку, хронічний
холецистит у фазі ремісії, реактивний гепатит, дискінезія жовчовивідних
шляхів, реактивний панкреатит). Порівняльну групу склало 39 дітей ЗОШ с.
Чинадійова Мукачівського району віком 11–15 років. Діти добиралися за
принципом «копія – пара» і відрізнялися за місцем проживання – низинний та
пригірський райони Закарпатської області. Контрольну групу складали практично
здорові діти віком 11-15 років (n=25) міста Ужгорода. Дані по результатам
двохетапної мінерально-вітамінної корекції (n=44) у дітей порівнювалися з
даними контрольної групи дітей та даними по результатам одномоментної
вітамінно-мінеральної корекції, яка включала одночасне призначення препарату
калію йодиду 100 мкг/добу та Теравіту в ідентичній дозі та експозиції (n=26).
2.2. Методи дослідження
Для оцінки стану здоров’я дітей раннього віку використовувалися клінічні і
параклінічні методи обстеження. Збір анамнезу проводився за спеціально
розробленими скринінг-картами та з історії розвитку дитини (ф. 112-о). З
лабораторних методів дослідження проводилися загальноклінічні аналізи крові та
сечі, аналіз сечі за Сулковичем, біохімічне дослідження крові
(аланінамінотрансфераза – АЛТ, аспартатамінотрансфераза – АСТ, холестерин,
білірубін, кальцій, фосфор), визначення рівнів, Т3, Т4, ТТГ та СТГ,
визначення йодурії, визначення рівнів мікроелементів сироватки крові
фотометричним та атомно-абсорбційним методами і визначення рівнів нуклеїнових
кислот. Із інструментальних методів використано кардіоінтервалографію та
визначення показника 97-ї перцентилі за допомогою УЗО.
2.2.1. Лабораторні методи діагностики
Визначення мікроелементів сироватки крові у даної групи дітей проводилося
атомно-абсорбційним та фотометричним методами на базі хімічного факультету
УжНУ та Держстандартизації. Матеріал для обох досліджень готувався методом
сухої мінералізації. Суть фотометричного методу полягає у вимірюванні
поглинальної здатності променевої енергії розчинами аналізованих речовин.
Характер спектру поглинання є якісним показником, а ступінь поглинання –
кількісною характеристикою, яка свідчить про вміст цього компоненту, оскільки
поглинання променевої енергії при всіх інших рівних умовах пропорційне
концентрації поглинальної речовини. Таким чином, визначення Р2О5 базується
на фотометричному виявленні Р при утворенні відновленої гетерополікислоти з
молібдатом амонію при частоті променевої енергії л – 590нм. А визначення рівня
Fe з додаванням 1,10 фенонтроліну в слаболужному середовищі при частоті л –
490 нм.
Рівні Сu, Pb, Zn визначалися на атомно-абсорбційному комплексі КАС-120.1 з
електротермічною атомізацією та комп’ютерною реєстрацією аналітичного сигналу
на основній резонансній частоті даних елементів. Для цього методу
використовувалися звичайні графітні кювети, дозування проводилося вручну
(методичні рекомендації – Спектральное определение тяжелых металлов в
биологических материалах и объектах. – М., 1986).
Визначення концентрації тироксину (Т4), трийодтироніну (Т3) і тиротропного та
соматотропного гормонів гіпофізу імуноферментним методом.
Стан гуморального імунітету визначали за допомогою аналізу змін рівнів
імуноглобулінів плазми – імуноглобуліну Е (Ig E), імуноглобуліну А (Ig А) та
імуноглобуліну G (Ig G).
З’ясування Ig А, Ig G проводилося за допомогою тест-системи фірми «Вектор –
Бест» (місто Новосибірськ, РФ), Ig E – за допомогою тест-системи фірми «Алкор –
Біо» (місто Санкт-Петербург, РФ).
Імуноглобуліни є продуктами секреції В-клітин на кінцевій стадії їх
диференціювання, тобто плазматичних клітин. Дефекти, пов’язані з порушенням
метаболізму імуноглобулінів, спостерігаються при багатьох захворюваннях.
Зниження рівня імуноглобулінів свідчить про недостатність гуморальної ланки
імунітету, порушення їх синтезу або посилення катаболізму, адсорбцію на імунних
комплексах.
Підвищення їх рівня характерно для гострих та хронічних запальних процесів, при
аутоімунних захворюваннях та ін.
Вміст Ig А та Ig G визначали за допомогою тест-системи фірми «Вектор – Бест».
Для дослідження використовують свіжу, вільну від домішок сироватку. Принцип
методу ґрунтується на виявлені в сироватці крові імуноглобулінів A, G з
допомогою специфічних антиглобулінових кон’югатів (анти – A, анти – G).
Компоненти, що не зв’язалися, відмиваються, а активність ферменту в складі
імунних комплексів визначають з допомогою субстрат-хромогенної суміші.
Інтенсивність покращення хромогену зворотно пропорційна кількості антитіл у
зразку.
Ig Е у здорових людей перебуває у слідових кількостях. Плазматичними клітинами
виробляються Ig Е з певною специфічністю. До складу цієї фракції входять
реагіни, які беруть участь в алергічних реакціях. Тривалість перебування в
організмі сироваткового Ig Е – 3 доби, мембранозв’язаного – 14 діб.
Рівень соматотропного гормону