РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Общая характеристика работы
Экспериментальные исследования проведены на 619 крысах линии Вистар обоего
пола, массой 170-210 г. Животные находились в условиях вивария на стандартном
пищевом рационе, утвержденном для вивариев научных учреждений Статусом
Украинской ассоциации с биоэтики и нормативам GLP. За 24 часа до забоя животных
лишали пищи, ограничений в воде не было. Затем под гексеналовым наркозом у
животных отбирали шприцом кровь из сердца и после декапитации извлекали печень.
Все манипуляции проводили на холоде.
Работа выполнена в 18 сериях опытов. Серии опытов представлены в таблице 2.1.
Таблица 2.1
Серии опытов
п/п
Воздействия
Коли-чество живот-ных
Доза фторида натрия в мг/кг мас-сы тела в сутки
Доза
ионизиру-ющей радиации
Коррекция
антиокси-дантами
Длитель-ность опыта
1.
Интактные животные
88
2.
Облучение
42
-
Суммарная доза
0,25 Гр
1 месяц
3.
Облучение
39
Суммарная доза 0,5 Гр
1 месяц
4.
Облучение
60
-
Суммарная доза 7 Гр
3 дня
5.
Введение фторида натрия
45
10 мг/кг
1 месяц
6.
Введение фторида натрия
25
10 мг/кг
-
3 месяца
7.
Введение фторида натрия
59
10 мг/кг
6 месяцев
Продолжение таблицы 2.1
7
8.
Сочетанное воздейст-вие фторида натрия и ионизирующей радиации
33
10 мг/кг
Суммарная доза 0,25 Гр
1 месяц
9.
Сочетанное воздейст-вие фторида натрия и ионизирующей радиации
26
10 мг/кг
Суммарная доза 0,5 Гр
1 месяц
10.
Введение фторида нат-рия в течение одного месяца, а затем воздей-ствие
ионизирующей радиации
46
10 мг/кг
Суммарная доза в течение 3-х дней 7 Гр
33 дня
11.
Введение фторида нат-рия в течение 3-х меся-цев и воздействие ионизирующей
радиации
22
10 мг/кг
Суммарная доза в течение 3-х дней 7 Гр
93 дня
12.
Введение фторида натрия в течение 6-ти месяцев и воздействие ионозирующей
радиации
58
10 мг/кг
Суммарная доза в течение 3-х дней 7 Гр
183 дня
13.
Введение комплекса антиоксидантов на фоне хронического поступления фторида
натрия в организм
13
10 мг/кг
Введение комплекса антиокси-
дантов в те-чение 1-й и 2-й недели каждого месяца
6 месяцев
14.
Введение комплекса антиоксидантов после 6-ти месяцев хронической фтористой
интоксикации
12
10 мг/кг
Введение комплекса антиокси-
дантов в
течение 2-х недель
6,5
месяцев
15.
Введение комплекса антиоксидантов в
течение 2-х недель с последующим облучением
14
-
Суммарная доза в течение 3-х дней 7 Гр
Введение комплекса антиокси-дантов в
течение 2-х недель
15 дней
16.
Введение комплекса антиоксидантов после облучения
13
-
Суммарная доза в
течение 3-х дней 7 Гр
Введение комплекса антиокси-дантов в
течение 2-х недель
15 дней
Продолжение таблицы 2.1.
17.
Введение комплекса антиоксидантов на
фоне хронической фто-ристой интоксикации с последующим облучением
11
10 мг/кг
Суммарная доза в течение 3-х дней 7 Гр
Введение комплекса антиокси-дантов в
течение 2-х недель каж-дого месяца
183 дня
18.
Введение комплекса антиоксидантов после 6-тимесячного введе-ния фторида натрия
и воздействия ионизи-рующей радиации
13
10 мг/кг
Суммарная доза в течение 3-х дней 7 Гр
Введение комплекса антиокси-дантов в те-чение 2-х недель
6,5
месяцев
2.2. Воспроизведение лучевого поражения
При воспроизведении лучевого поражения было использовано фракционированное
облучение животных жестким г-излучением с помощью г-кобальтовой пушки "Агат-2"
(изотоп60 Со). 1-я группа животных подвергалась ежедневному фракционному
облучению в дозе 0,008 Гр. Суммарная доза на протяжении месяца составляла 0,25
Гр. 2-я группа животных подвергалась ежедневному облучению в дозе 0,016 Гр.
Суммарная доза на протяжении месяца составляла 0,5 Гр. 3-я группа – в суммарной
дозе 7 Гр на протяжении трех дней составляли: первый – 2,5 Гр, второй – 2,5 Гр
и третий – 2 Гр. Дозиметрический контроль проводился дозиметрической службой
Полтавского областного диспансера, на базе которого проводили облучение.
2.3. Моделирование фтористой интоксикации
Для воспроизведения фтористой интоксикации в хроническом опыте применяли
фторид натрия.
Фторид натрия вводили животным ежедневно перорально в течение различных сроков
(один, три и шесть месяцев) в виде 0,1 % водного раствора из расчета 10 мг/кг
массы животных. Указанная доза фтора выбрана с целью воспроизведения модели
хронической фтористой интоксикации [1].
Введение раствора фтористого натрия осуществляли с помощью медицинского шприца
объемом 20 мл со специальным наконечником на конце иглы, предупреждающим
травмирование ротовой полости. Такой пероральный способ введения позволял точно
дозировать и без потерь вводить раствор фторида натрия в желудочно-кишечный
тракт животным.
2.4. Применение антиоксидантов
Для коррекции лучевого повреждения и фтористой интоксикации использовали
комплекс АО, включающий в-каротин, который вводился в/м из расчета 5 мг/кг
массы животного; унитиол – в/м из расчета 5 мг/кг; б-токоферол – перорально из
расчета 20 мг/кг; аскорутин – перорально из расчета 50 мг/кг массы.
Комплекс АО вводили в течение первых двух недель каждого месяца на фоне
хронического поступления фторида натрия (шесть месяцев), после 6-ти месяцев
хронической интоксикации, введения АО в течение 2-х недель с последующим
облучением в суммарной дозе 7 Гр, введение – после облучения, введение – на
фоне хронической фтористой интоксикации с последующим облучением и после
6-тимесячного введения фторида натрия и воздействия ионизирующей радиации.
2.5. Обоснование методов исследования
Исходя из задач исследования, для оценки уровня ПОЛ и АОЗ проводили
исследование содержания
- Київ+380960830922