РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исходя из поставленных задач, в качестве объектов исследования взяты
предстательные железы человека в возрасте от 8 недель эмбриогенеза до 75 лет.
Материал брали у лиц, погибших в результате причин, не вызывающих изменений
изучаемых органов. Эмбриологический материал получен в роддомах г. Запорожья
(зародыши и абортивные плоды брали от физически здоровых женщин), а детей,
взрослых и людей пожилого и старческого возраста из морга судебно-медицинской
экспертизы, патологоанатомического областной клинической больницы, пятой
детской больницы, медсанчасти завода «Коммунар» г. Запорожья.
Для определения возраста использовали данные истории болезни или родов,
протоколы вскрытия. Возраст эмбрионов и плодов определяли измерением
крестцово-теменных размеров по А. Шульцу (1926) [9].
Рис. 2.1. Распределение исследуемого материала. Общее количество по возрастным
группам.
Весь исследуемый материал распределен на восемь возрастных групп: период
пренатального онтогенеза, период новорожденности (1-10 дней), детский возраст
(от года до 11 лет), подростковый период (13- 16 лет), юношеский возраст
(17-21год), первый зрелый возраст (22-35 лет), второй зрелый возраст (36-60
лет), пожилой возраст (61- 75 лет), старческий возраст (75-85 лет) (рис. 2.1).
Таблица 2.1
Распределение исследуемого материала.
Возрастные группы
Количество исследованных желез
Всего
Период пренатального онтогенеза:
Зародыши 8-12 недель
Плоды 4-10 месяцев
15
20
35
Новорожденные
Дети:
2 месяца – 1 год
2 - 3 года
4 – 7 лет
8 – 11 лет
18
Подростковый период 13-16 лет
Юношеский возраст 17-21 год
10
10
Зрелый возраст
I период (22-35 лет)
II период (36-60 лет)
25
25
50
Пожилой возраст 61-75 лет
15
15
Старческий возраст 76-85 лет
10
10
Общее количество:
153
153
В основу классификации положены рекомендации, принятые конференцией по
возрастной морфологии, физиологии и биохимии (Москва, 1965) (табл. 2.1).
Кусочки простаты человека и крыс фиксировали в 10% растворе нейтрального
формалина, жидкостях Карнуа и Буэна, а затем заключались в парафин и
изготовлялись серийные срезы по общепринятой методике Э. Пирса (1962).
Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином Карацци и Эрлиха, эозином, азур II
– эозином, ШИК-реакция. Изучение микропрепаратов проводилось на микроскопе
Olimрus BX-41 с цифровой камерой С-4040 zoom и персонального компьютера. Для
измерения морфометрических характеристик лимфоидной популяции использовали
компьютерную систему цифрового анализа с изображением VIDAS-368 (Kotron
Electronik, Германия). Изображения, которые получали на микроскопе AXIOKOP с
помощью высокочувствительной камеры COHU-4722 (CONU Inc., США), были введены в
компьютерную систему цифрового анализа VIDAS-386 (Kotron Elektronik,
Германия).
Для идентификации клеток в лимфоидных образованиях использовали указания [11,
34, 35].
В результате исследования лимфоидных структур было выделено 6 классов клеток:
1-й класс лимфобласты, 2-й класс малые лимфоциты, 3-й класс средние лимфоциты,
4-й класс плазматические клетки, 5- класс макрофаги, 6-й класс клетки с
признаками деструкции.
За лимфобласты принимались клетки – 12- 15 мкм, с ядром округлой формы, с одним
или двумя ядрышками. Хроматин распределялся рыхло и неравномерно. Цитоплазма
слабо базофильна, с отчетливо выраженной перинуклеарной зоной. Малые лимфоциты
имели диаметр 5-6 мкм. Ядро округлой или бобовидной формы, хроматин ядра
компактный или глыбчатой структуры с небольшими просветлениями с одним крупным
ядрышком, эксцентрично расположенным. Вокруг ядра узкий ободок цитоплазмы.
Средние лимфоциты имеют ядро, с хроматином менее плотным в виде скоплений по
периферии, с 1-2 ядрышками. Ободок цитоплазмы более широкий. Размеры средних
лимфоцитов 7-8 мкм.
Плазмобластами и проплазмоцитами считали клетку размером 15-25 мкм в диаметре,
с ядром расположенным либо центрально, либо эксцентрически, занимающим большую
часть клетки и имеющим нежную структуру хроматина и ядрышка. В цитоплазме
определялась перинуклеарная зона просветления.
Плазмоциты- клетки округлой или овальной формы от 7 до 10 мкм. Ядро расположено
эксцентрично. Цитоплазма резко базофильна с выраженной перинуклеарной зоной.
К макрофагам относили крупные клетки диаметром от 20 до 40 мкм, с неровной
цитолеммой, с ядром бобовидной или неправильной формы. Хроматин имеет
сетчато-петлистую структуру, 1-2 ядрышка, центрально или эксентрично
расположенный. В макрофагах обнаруживаются ядерные ферменты лимфоцитов.
Ретикулярные клетки отличались непостоянной формой. Они имеют слабобазофильную
окраску цитоплазмы с одним или несколькими отростками. Клетки тесно
контактируют с тонкими коллагеновыми волокнами.
Клетки с признаками деструкции характеризуются наличием в цитоплазме
вакуолизации, в ядрах глыбки хроматина, локализованные на ядерной оболочке. В
ядрах часто обнаруживаются явления пикноза и кариорексиса. Цитоплазма клеток
нечёткая и слабо окрашивается красителями.
Экспериментальные исследования были проведены на 150 половозрелых крысах-
самцах линии Вистар (полученных из вивария ин-та фармакологии и токсикологии
АМН України г. Киев) массой 220-240г (возраст 5-6 месяцев). Подопытные животные
были разделены на три группы: первая - интактные животные, -20 крыс, вторая
группа - экспериментальная – 110 крыс и третья группа - контрольная – 20 крыс.
Три группы находились в одинаковых условиях. Эксперимент проводился в осенне -
зимний период года (табл. 2.2). При работе с экспериментальными животными
руководствовались «Европейской конвенцией по защите позвоночны
- Київ+380960830922