СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗОВАННЫХ В ДИССЕРТАЦИИ
БАС - биологически активные соединения БАД - биологически активная добавка к пище БХ — бумажная хроматография
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ГПМЦ- гидроксипропилметил целлюлоза
ГСО - государственный стандартный образец
ДСК - диазобензол сульфокислота
ЛРС - лекарственное растительное сырье
ЛФ — лекарственная форма
МКЦ- микрокристаллическая целлюлоза
НД - нормативная документация
ОФС - общая фармакопейная статья
РСО - рабочий стандартный образец
ТО - технологическая операция
ТС - технологическая стадия
ТСХ - тонкослойная хроматография
У МО - упаковка, маркировка
УФ-спектр - ультрафиолетовый спектр
ФСП - фармакопейная статья предприятия
3
Оглавление
Введение........................................................... 6
Глава 1. Современное состояние исследований плодов расторопши
пятнистой (Обзор литературы)............................. 13
1.1. Историческая справка..................................... 13
1.2. Ботанико-фармакогностическая характеристика расторопши пятнистой....................................................... 15
1.2.1 Ареал обитания и промышленное возделывание расторопши пятнистой....................................................... 15
1.2.2 Заготовка и переработка плодов расторопши пятнистой 16
1.3. Химический состав плодов расторопши..................... 17
1.4. . Методы контроля качества плодов и препаратов растороп-
ши пятнистой 21
1.4.1. Микроскопический анализ плодов расторопши пятнистой 22
1.4.2. Методы качественного и количественного анализа плодов
расторопши и препаратов на их основе..................... 22
1.5. Фармакологические свойства плодов расторопши пятнистой и препаратов на их основе..................................... 27
1.6. Применение плодов расторопши пятнистой в научной и
народной медицине........................................ 28
1.7. Перспективы создания новых препаратов на основе плодов
расторопши пятнистой..................................... 29
Выводы к главе 1......................................... 31
Экспериментальная часть
Глава 2. Объекты и методы исследования............................ 32
2.1. Объекты исследования..................................... 32
2.2. Методы исследования.........................'................ 33
2.2.1. Методы, использованные для идентификации соединений
в исследуемом сырье...................................... 33
2.2.2. Методы исследования анатомического строения плодов
расторопши пятнистой, культивируемой в Самарской области.................................................... 34
2.2.3. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии
(ВЭЖХ)................................................... 36
2.2.4. Метод тонкослойной хроматографии......................... ^
2.2.5. Метод спектрофотометрии................................
2.2.6. ‘Н-ЯМР-снекгроскопия................................... .
Эо
2.2.7. Методы получение мономолекулярных пленок и изучения
их изотерм сжатия....................................... 38
2.2.8. Метод равновестного диализа для оценки проницаемости
флаволигнанов сквозь полупроницаемую мембрану из лекарственных субстанций плодов расторопши................ 40
17
патопротекторную активность. На основе первоначального экстракта, в настоящее время путём многостадийной очистки получают гепатопротектор-ные препараты - Легалон, Карсил, Силимар [64, 117].
Жирное масло на современном производстве получают в основном методом прессования, однако жмых плодов после отжима всё ещё содержит до 10% жирного масла, что значительно уменьшает сроки его хранения (из-за процесса прогоркания). Кроме того, для повышения выхода масла при прессовании сырье подвергается нагреву до 60°С и более, что отрицательно влияет на качество масла и может повлечь деструкцию термолабильных флаво-лигнанов.
На некоторых предприятиях получение масла ведут методом экстракции, сжиженным газом фреоном. При этом из шрота максимально удаляется жирное масло (в сырье остается менее 2%) [91, 93, 95]. Обезжиренные шрот и жмых таюке используют в качестве БАДов [91, 93, 95].
1.3. Химический состав
Флаволигнаны (флаванолигнаны, флавонолигнаны) - флавоноиды, содержащие в своем составе дополнительный фенилпропаноидный фрагмент (-Сб-Сз-) (в основном кониферилового спирта) - составляют сравнительно немногочисленную новую группу природных соединений [3, 23, 29, 63, 64, 67, 116, 120]. Это дает основание относить флаволигнаны не только к флавонои-дам, но и фенилпропаноидам [2, 47, 48, 49, 64, 65, 66, 114]. Первый представитель флаволигнанов силибин (1) (табл. 1) был выделен рядом авторов из плодов расторопши пятнистой, причем в силу необычности химической структуры на изучение химического строения данного соединения понадобилось более 20 лет [2, 29, 47, 48, 49, 63, 64, 65, 66, 96, 114]. Решающий вклад в решение этой проблемы внесли немецкие ученые, которые доказали химическую структуру с использованием 'Н- и ,3С-ЯМР, УФ-, ИК-спектроскопии, масс-спектрометрии в сочетании с химическими методами исследования [29, 64, 96, 134]. При этом наибольшую сложность представлял анализ в
18
ЯМР-спектрах сигналов алифатических протонов силибина (1), которые хорошо были различимы только в пентаметиловом эфире следующей системы:
Данные масс-спектров показали наличие фрагментов с m/z 180, 162, 137 и 121, характерных для кониферилового спирта. Все это позволило предложить для силибина две возможные структуры (1) и (2) (изосилибин, выделенный из плодов расторопши пятнистой в ходе дальнейших исследований) и высказать мнение, что он образуется в результате окислительного сочетания таксифолина (дигидрокверцетии) и кониферилового спирта [29, 47, 48, 49, 63, 64, 65, 66, 96, 114]. В ходе синтеза цис- и >я/?янс-изомеров 1,4-бензодиоксана и хроман-3,4-диола было подтверждено наличие в силибинс
1,4-бензодиоксанового кольца с трансоидным положением замести гелей. Однако необходимо было выяснить еще два вопроса: положение заместителей в бензодиоксановой части молекулы (т.е. структура 1 или 2) и абсолютную конфигурацию хиральных центров бензодиоксанового фрагмента [29, 47, 48, 49, 63, 64, 65, 66, 96, 114]. Результаты опытов по расщеплению силибина не позволили сделать выбор между двумя возможными структурами. Только в ходе дальнейших синтетических исследований была достоверно доказана структура (1) для силибина [29, 47, 48, 49, 63, 64, 65, 66, 96, 114]. При этом были синтезированы тетра- и пентаметиловые эфиры дегидросилибина и аналогичные производные для его региоизомера, а также получены соответствующие производные из природного силибина [29, 47, 48, 49, 63, 64, 65, 66, 96, 114]. Изучение абсолютной конфигурации силибина сравнением спектров кругового дихроизма (КД) с КД-спектрами других флаванонолов позволило четко установить 2R, ЗК-конфигурацию только для флаваноноловой части: отрицательный эффект Коттона в коротковолновой области (295 им) и положительный эффект при 330 нм [29, 47, 48, 49, 63, 64, 65, 66, 96, 114].
- Киев+380960830922