РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
Для вирішення поставлених завдань використаний комплексний морфологічний підхід до оцінки структурних проявів впливу малих доз радіації.
Експерименти проведені на 125 білих рандомбредних щурах-самцях (Rattus Norvegicus L.) масою 150-180 г та 50 тхорзофретках масою 450-550 г. Тхорзофретки - це гібрид домашнього білого тхоря з чорним (лісовим) тхорем. Тхорзофретки досягають статевої зрілості у віці 10-11 міс. Тривалість їх життя 5 років. Шкірки тхорзофреток використовують у пошитті хутрового одягу.
Вибір тварин обумовлений змішаним характером харчування, що наближає будову їх печінки до такої в людини. У добовий раціон тхорзофреток включають м'ясо-рибні корми, молочні, зернові, овочі, дріжджі і вітамінні додатки [106].
Тобто для роботи використано два ряди тварин класу ссавців (ряд гризуни та ряд хижі) з метою оцінки загальноспрямованості реакцій експериментальних і тварин, які використовуються в звіроводстві, у відповідь на різну тривалість впливу малих доз радіації.
Тварин 1 дослідної групи (15 щурів) піддавали тотальному фракціонованому опроміненню в сумарній дозі 0,5 Гр протягом двох днів по 0,25 Гр (тривалість експозиції 2 хв 10 сек) на рентгенівському апараті РУМ-17, при таких умовах: ампераж - 10 мА, напруга - 180 кВ, основний фільтр Сu - 0,5 см, потужність дози (в м'яких тканинах) - 11,3?10-2 Гр/хв (табл.2.1).
Тварини 3-6 і 8-9 груп піддавались довготривалому впливу малих доз радіації. Тварини проживали в с. Стецева Снятинського району Івано-Франківської області протягом 1 міс (3 група, 20 щурів), 2 міс (4 група, 20 щурів), 6 міс (5 група, 20 щурів) та 12 міс (6 група, 20 щурів), 1 рік (8 група, 15 тхорзофреток), 4 роки (9 група, 15 тхорзофреток). Тварин розміщували в звичайних сільських умовах у клітках, у присадибних господарствах, у сараї.
Таблиця 2.1
Розподіл тварин за групами, кількістю, термінами експерименту і методами дослідження.
Група
Кількість
Термін
дослідуМетоди дослідженняГематок-силін -еозинЗа ЕйнарсономМорфомет-ричний аналізЕлектронна мікроскопіяТотальне опромінення (щурі)1
10:
15:
5Контроль:
7 діб
14 діб
7 діб
14 діб
30 діб
+
+
-Проживання на забрудненій радіонуклідами території (щурі)220:
5Контроль
1 міс
2 міс
6 міс
12 міс
+
-3201 міс+++-4202 міс++++5206 міс++++62012 міс++++Проживання на забрудненій радіонуклідами території (тхорзофретки)720:
10
10Контроль:
1,5 роки
4 роки
-8151,5 роки+++-9154 роки+++- Для харчування тварин 2-9 дослідних груп використовували продукти і воду з даної місцевості. Контролем до кожної попередньої групи тварин були щурі (по 5) - 2 група та тхорзофретки (по 10) - 7 група, які такі ж терміни перебували в передмісті Івано-Франківська, де радіаційний фон не перевищує допустимі значення. Після означених термінів перебування в забрудненому радіонуклідами селі в тварин забирали матеріал для подальшого дослідження. У тхорзофреток печінку забирали в кінці жовтня місяця, тому що в пушних звірів при нормальному відгодовуванні в листопаді-лютому відбувається відкладання жиру не тільки в підшкірній жировій клітковині.
Сумарна площа території України з високим рівнем забруднення цезієм-137 (5-15 Кі/км?) становить 21 тис. км?. Снятинський район Івано-Франківської області належить до зони, де за даними відділу радіаційної медицини обласної санітарно-епідеміологічної станції та збірника 7 "Дозиметрическая паспортизация населенных пунктов Украины, подвергшихся радиоактивному загрязнению после Чернобыльской аварии" [107], паспортна доза опромінення з 1993 р. визначалась як 0,47 мЗв, яка є більшою за нормативну. Забрудненість радіонуклідами цезієм-137 і стронцієм-90 та їх рівні в грунті, у молоці, картоплі були майже в два рази більшими, ніж в інших районах області. У с.Стецева Снятинського району в 1991 році виявили найбільшу щільність забруднення території радіонуклідами. Частка Сs137 становила 5 Кі/км? і більше, а Sr90 - 0,19 Кі/км?. Частина зовнішнього опромінення за рахунок лише цезію-137 складала у с.Стецева в ці роки відповідно 0,40 та 0,36 мЗв, а внутрішнього від окремих джерел опромінення - 0,16 та 0,11 мЗв (для порівняння паспортна доза сумарна в селах Надвірнянського району - від 0,09 до 0,14 мЗв, Богородчанського району - від 0,09 до 0,12 мЗв, Тлумацького району - 0,09 - 0,17 мЗв тощо). Ці дози в Снятинському районі області можна характеризувати як низькі рівні опромінення. За результатами радіологічного дослідження територію Снятинського району Івано-Франківської області було віднесено до 4 зони - зони постійного радіоекологічного контролю.
Івано-Франківська облсанепідстанція щорічно згідно з договорами з відділом у справах захисту населення від наслідків аварії на ЧАЕС облвиконкому проводить паспортизацію населених пунктів. За період 1993 - 1996 рр. (роки виконання експериментів) на вміст цезію і стронцію досліджено 1535 проб молока і 648 проб картоплі. За результатами дослідження встановлено, що вміст цезію в молоці коливався в межах 0,4-4,0 Бк/кг(л), вміст стронцію в досліджених продуктах не перевищував 0,2 Бк/кг(л).
Утримання тварин та маніпуляції проводилися у відповідності до положень "Загальних етичних принципів експериментів на тваринах", ухвалених Першим Національним конгресом з біоетики (Київ, 2001 р.) та вимог Додатку 4 до "Правил проведення робіт з використанням експериментальних тварин", затверджених наказом Міністерства охорони здоров'я №755 від 12 серпня 1977 р. "Про заходи щодо подальшого удосконалення організаційних форм роботи з використанням експериментальних тварин".
Тварини дослідних і контрольних груп утримувались в ідентичних умовах, матеріал забирався і оброблявся паралельно.
При дослідженні тривалого впливу малих доз радіації, об