РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
2.1. Загальна клінічна характеристика хворих і методів
їх обстеження
Матеріалом дослідження служили результати цитологічного скринінгу жінок
Черкаського регіону на рак шийки матки за 1999-2003 рр. і результати
комплексного обстеження 487 жінок віком від 16 до 72 років. Із загальної
кількості хворих у 437 була патологія шийки матки доброякісного і
передракового, у 50 – РШМ 0-1В1 стадії. Крім того обстежено 25 жінок
(контроль), у яких патологія шийки матки при комплексному обстеженні не
діагностована (табл. 2.1.1). Більш детальний розподіл хворих за клінічними
діагнозами і віком буде подано у відповідних розділах дисертації.
Таблиця 2.1.1
Кількість обстежених хворих з різними патологічними процесами
шийки матки
Характер патологічного процесу шийки матки
Кількість жінок
Доброякісні і передракові патологічні процеси
437
Рак шийки матки 0 – ІВ1 стадії
50
Усього
487
Комплексні обстеження хворих включали загальноклінічні методи, гінекологічний
огляд, розширену кольпоскопію, цитологічне дослідження мазків із шийки матки і
ендоцервіксу, гіcтологічне дослідження біоптатів шийки матки і операційного
матеріалу, ідентифікацію бактеріального і вірусного інфікування статевих шляхів
за допомогою ПЛР. У всіх хворих збирали анамнез хвороби, з’ясовували
особливості менструальної і репродуктивної функцій. Крім того, при потребі
проводили ультразвукове дослідження органів малого тазу і черевної порожнини.
Методи дослідження і кількість обстежених жінок наведені у табл. 2.1.2. Більш
детальний опис методичних підходів до дослідження подано у відповідних
підрозділах цього розділу.
Таблиця 2.1.2
Методи обстеження і кількість обстежених жінок
Методи дослідження
Кількість
жінок
Загально клінічні методи, у тому числі імунологічні дослідження
487
Бімануальне дослідження статевих органів
512
Кольпоскопічний метод обстеження
512
Бактеріологічні дослідження
512
Цитологічний метод дослідження мазків із екто- і ендоцервіксу
512
Біомолекулярна діагностика послідовностей ДНК високо онкогенних типів ВПЛ (16,
18, 31, 33, 35),
ВПГ 1-2 типу, ЦМВ, Chlamуdia trachomatis
512
Гістологічний метод дослідження біоптатів шийки матки і операційного матеріалу
78
Метод дослідження мітотичного режиму клітин у біоптатах шийки матки і
операційному матеріалі
38
Імуногістохімічний метод визначення експресії білка р53 на гістологічних зрізах
37
Метод оцінки активності ядерцевих організаторів на гістологічних зрізах
48
Статистичні методи обробки цифрових даних (критерій Стьюдента,
ч-квадрат
Для встановлення розповсюдженості пухлинного процесу користувались
класифікацією РШМ за системою TNM і FIGO, яку наводимо нижче [259] Класифікація
раку шийки матки за TNM і FIGO
TNM Шийка матки FIGO
Tis In situ O
T1 Обмежена маткою I
T1а Діагностується тільки мікроскопічно IA
T1a1 Глибина < 3 мм, IA1
горизонтальне поширення < 7 мм
Т1а2 Глибина 3 мм до 5 мм, IA2
горизонтальне поширення < 7 мм
Т1b Клінічно видиме або мікроскопічне IB
ураження більше, ніж Т1а2
T1b1 < 4 см IB1
T1b2 > 4 см IB2
T2 Поширення за межі матки, але не на II
стінки таза або нижню третину піхви
T2a Без параметрія IIA
T2b З параметрієм IIB
T3 Cтінка таза, нижня третина, гідронефроз III
T3a Нижня третина піхви IIIA
T3b Стінка таза, гідронефроз IIIB
T4 Сечовий міхур, пряма кишка IVA
N1 Регіонарні IIIB
M1 Віддалені метастази IVB
Групування раку шийки матки за стадіями
Стадія 0 Tis N0 M0
Стадія IA T1a N0 M0
Стадія IA1 T1a1 N0 M0
Стадія IA2 T1a2 N0 M0
Cтадія IB T1b N0 M0
Стадія IB1 T1b1 N0 M0
Стадія IB2 T1b2 N0 M0
Стадія IIA T2a N0 M0
Стадія IIB T2b N0 M0
Стадія IIIA T3a N0 M0
Стадія IIIB T1, T2, T3a,T3b Будь-яке N M0
Стадія IVA T4 Будь-яке N M0
Стадія IVB Будь-яке Т Будь-яке N M1
2.2. Кольпоскопічний метод дослідження
Кольпоскопію проводили за допомогою кольпоскопу КС-1 (модель 605)
Ленінградського виробничого об’єднання “Красногвардеец”. Проводили просту
кольпоскопію при стандартному збільшенні шийки матки у 8-10 разів і розширену
кольпоскопію з використанням 3% розчину оцтової кислоти і 2% розчину Люголя
(тест Шиллера). Розширена кольпоскопія давала можливість більш детально
охарактеризували епітеліальний пласт і стан судин шийки матки. Кольпоскопічні
картини оцінювали за класифікацією[65].
2.3. Методи діагностики інфікування статевих шляхів жінок
Для визначення інфекційних збудників у статевих шляхах жінок проводили
молекулярно-біологічні дослідження. Молекулярно-біологічні дослідження включали
проведення ПЛР з відповідними праймерами для виявлення ВПЛ високоонкогенних
типів (16, 18, 31, 33, 35), вірусів родини Herpes Viridae ( ВПГ 1-2 типу і ЦМВ)
і Сhlamуdia trachomatis. Біоматеріалом для проведення ПЛР служив цитологічний
матеріал із екто- і ендоцервіксу, який одержували за допомогою щіточки
Acellon-multi. Принцип дії ПЛР-реакції оснований на використанні процесу
ампліфікації ДНК, внаслідок чого можна розмножити певну послідовність ДНК у
кількості, що перевищує матричне значення у 10 у 9 ступіні раз і вище. ПЛР має
високу чутливість і специфічність для виявлення послідовностей ДНК вір