Вы здесь

Особливості субклітинної локалізації протеїнкіназ S6K1 та S6K2 у тиреоцитах щурів в умовах культури клітин in vitro

Автор: 
Хоруженко Антоніна Іванівна
Тип работы: 
Дис. канд. наук
Год: 
2009
Артикул:
0409U004741
129 грн
Добавить в корзину

Содержимое

ЗМІСТ
ПЕРЕЛІК УМОВНИХ ПОЗНАЧЕНЬ………………………….……………….
ВСТУП…………………………………………………………….……………
РОЗДІЛ 1. ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ
1.1. Структура та функція щитовидної залози. Регуляція функції
щитовидної залози…………………………………………………….
1.2. Показники функціональної активності тиреоцитів……….……………
1.3. Патологія щитовидної залози……………………………………………
1.4. Типи культур клітин щитовидної залози. Методи отримання
культур тиреоцитів……………………………………………………….
1.5. Передача сигналу у тиреоцитах через РІК шлях. Участь SK у
передачі внутрішньоклітинного сигналу у тиреоцитах.……………….
1.6. SK та SK форми кінази рибосомного білка S .……………
1.7. Залучення SK до процесу проліферації клітин.………………………
1.8. Роль SK у регуляції локомоторних властивостей клітин……….……
1.9. Участь SK у процесі диференціювання клітин………………….……
РОЗДІЛ 2. МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ
2.1. Матеріали та реактиви…………………………………………………….
2.2. Зразки тканин
2.2.1. Тканина щитовидної залози щурів……………………………………
2.2.2.Тканина щитовидної залози людини……………………………………
2.3. Отримання культури клітин щитовидної залози
2.3.1. Отримання первинної культури клітин щитовидної залози
людини із післяопераційного матеріалу…………………………….…
2.3. Отримання вторинних культур клітин щитовидної залози
людини…………………………………………………………….………
2.3.3. Отримання культур клітин щитовидної залози щура………….…….
2.4. Цитологічний та гістологічний аналіз препаратів
2.4.1. Цитологічне дослідження культур тиреоцитів…………………………
2.4.2. Гістологічні дослідження тканини щитовидної залози і
тривимірових культур – багатоклітинних сфероїдів та
агрегатів фолікулів…………………………………………………….
2.5. Міграція тиреоцитів через Трансвели………………………………….
2.6. Імуноцитохімічний та імуногістохімічний аналіз
2.6.1. Імуногістохімічний аналіз тканини щитовидної залози та
тривимірових культур тиреоцитів…………………………………
2.6.2. Імуноцитохімічне дослідження моношарових культур клітин
щитовидної залози та мігруючих тиреоцитів на мембранах
трансвелів………………………………………………………………
2.6.3. Подвійна імунопероксидазна/імунофлюоресцентна реакція……….
2.7. Імуноблотинг SK
2.7.1. Отримання лізату тиреоцитів………………………………………….
2.7.2. Електрофорез лізатів клітин щитовидної залози у поліакриламідному
гелі з додаванням додецилсульфату натрію…………………………
2.7.3. Перенесення білків з гелю на мембрану для блотингу………………
2.7.4. Імунодетекція білків з використанням підвищеної
хемілюмінесценції (ECL)……………………………………………….
2.8. Статистична обробка отриманих результатів……………………….….
РОЗДІЛ 3. РЕЗУЛЬТАТИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ
3. Отримання та аналіз первинних культур клітин щитовидної залози
3.1.1. Отримання первинних культур клітин з експлантатів щитовидної
залози. ……………………………………………………………….….
3.1.2. Одержання суспензії ізольованих фолікулів для ініціації
культур тиреоцитів людини із нормальної тканини та
тканини вузлового зоба………………………………………….….…
3.1.3. Культивування тиреоцитів у дво- та тривимірових умовах……….
3.1.4. Підтвердження епітеліального походження клітин у
моношарових, сфероїдних та культурах агрегатів фолікулів………
3.1.5. Визначення функціональної активності тиреоцитів,
що культивуються у вигляді моношару, сфероїдів та агрегатів
фолікулів…………………………………………….……………………
3.2. Дослідження вмісту та локалізації SK у тканині щитовидної
залози та у моношаровій культурі тиреоцитів щурів………………….
3.2.1. Визначення субклітинної локалізації SK у тканині щитовидної
залози щура…………………………………………………………….….
3.2.2. Визначення вмісту тиреоглобуліну у тиреоцитах щурів,
культивованих в умовах моношару…………………………………
3.2.3. Визначення субклітинної локалізації SK та SK у тиреоцитах
фолікулів, що розпластуються на адгезивному субстраті………….…
3.2.4. Визначення вмісту SK/ у проліферуючих тиреоцитах щура….….
3.2.5. Визначення вмісту SK/ методом Вестерн-блот аналізу у
тиреоцитах щурів за умов моношарової культури …………….…
3.2.6. Визначення внутрішньоклітинного розподілу SK/ у
мігруючих тиреоцитах щура……………………………………….….
3.3. Дослідження функціональної активності тиреоцитів та внутрішньо-
клітинної локалізації SK/ на моделі флотуючих агрегатів фолікулів
щурів
3.3.1. Отримання флотуючих агрегатів фолікулів щурів……………………
3.3.2. Дослідження субклітинної локалізації SK та SK у
тиреоцитах флотуючих агрегатів фолікулів……………………….…….
РОЗДІЛ 4. АНАЛІЗ ТА УЗАГАЛЬНЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕНЬ
ВИСНОВКИ…………………………………………………………….………
СПИСОК