ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Для достижения поставленной цели и решения задач была разработана программа исследований, предусматривающая четыре этапа.
На первом этапе проведен ретроспективный анализ 300 историй родов и амбулаторных карт женщин с диффузным нетоксическим зобом с целью выявления факторов риска возникновения субклинического гипотиреоза.
На втором этапе проведено клинико-лабораторное обследование 160 юных беременных 14-17 лет, находящихся под наблюдением в женских консультациях и акушерских стационарах - Донецкого государственного регионального центра охраны материнства и детства, областной клинической больницы им. Калинина г. Донецка; городских больницах № 24 г. Донецка и № 2, 5 г. Макеевки, из них 120 - с субклиническим гипотиреозом и 40 здоровых юных беременных (контроль).
Юным беременным с субклиническим гипотиреозом были проведены лечебно-профилактические мероприятия с целью снижения акушерских и перинатальных осложнений.
Из 120 юных беременных с субклиническим гипотиреозом в комплексе лечебных мероприятий 65 получили предложенную терапию, которая включает энтеросорбент энсорал и спирулину крымскую йодсодержащую, 40 - L-тироксин, 15 - по различным причинам лечение не получали.
У всех новорожденных оценивали состояние по шкале Апгар и антропометрические показатели.
Тиреоидное состояние оценено у 44 доношенных новорожденных, из них: у 13 детей, матери которых получали предложенную нами терапию, у 11 - L-тироксин, у 10 - от нелеченных и у 10 - от здоровых юных матерей.
Лабораторные исследования проводились в центральной научно-исследовательской лаборатории Донецкого государственного медицинского университета им. М. Горького (руководитель - д.м.н., профессор А.С. Прилуцкий) и биохимической лаборатории Донецкого областного диагностического центра (заведующий - Л.А. Штода).
Перед началом исследования все беременные были информированы о характере клинического испытания, исследуемых препаратах и возможных побочных эффектах. Исследования проводились после получения согласия на участие в испытании.
Обследование пациенток проводилось с учетом соматического, тиреоидного и акушерско-гинекологического статуса при сопоставлении результатов исследования больных и здоровых пациенток. Изучению этиологических факторов помогал тщательно собранный анамнез жизни и анамнез заболевания. Учитывались данные о состоянии здоровья в детском возрасте, частоте и продолжительности инфекционно-воспалительных заболеваний, наличии очагов хронической инфекции.
Обязательной была консультация смежных специалистов: эндокринолога, невропатолога, окулиста, отоларинголога.
Всем юным беременным были проведены стандартные лабораторные методы исследования: клинический анализ крови, общий анализ мочи, бактериоскопическое и бактериологическое исследование отделяемого из влагалища, уретры, цервикального канала, носа и зева.
Исходя из задач диссертационной работы, юным беременным были проведены специальные методы исследования.
Всем беременным основной группы проводили УЗИ щитовидной железы, с помощью аппарата ALOKA-SSD-550-7,5 мГц (Япония) по традиционной методике J. Brunn et al. [129].
Для определения степени увеличения щитовидной железы были использованы критерии, предложенные ВОЗ [13, 84, 176].
У всех юных беременных забор крови осуществляли с 9 до 11 часов утра из локтевой вены натощак, в объеме 7 мл стерильно.
С целью исключения острого периода цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции, вируса простого герпеса (ВПГ) у юных беременных проводилась серологическая диагностика ЦМВ инфекции путем выявления антител Ig M и Ig G в сыворотке крови и определение антител к ВПГ типа I и II при помощи иммуноферментных тест-систем фирм "BIO-RAD" (Франция).
Для оценки выраженности аутоиммунных реакций при заболеваниях щитовидной железы определяли аутоантитела к тиреоглобулину с помощью наборов фирмы "ТироидИФА-атТГ" (Россия) и микросомальной фракции - "EIAgen Anti-TMAb" (Италия).
Изучение тиреоидного статуса беременных проводили с помощью количественного определения свободных фракций тироксина и трийодтиронина (сТ4 и сТ3) и уровня тиреотропного гормона (ТТГ) в сыворотке крови иммуноферментным методом с помощью готовых коммерческих наборов фирмы "Хема-Медика" (Россия) и "Тироид ИФА-ТТГ" (Россия).
Используя полученные показатели, рассчитывали интегральный тиреоидный индекс (ИТИ) - отношение самих гормонов щитовидной железы к их гипофизарному регулятору, по формуле:
В норме ИТИ составляет 7,04-27,21, снижение данного показателя отражает даже начальные стадии гипотиреоза [78]. Мы впервые использовали данный индекс как критерий для назначения предложенной схемы лечения у юных беременных с субклиническим гипотиреозом. Показатели от 3,69 до 7,03 являлись показанием для назначения предложенных лечебно-профилактических мероприятий [108].
Уровень ТТГ в сыворотке крови у новорожденных определялся на 4-5-й день жизни с использованием иммуноферментных наборов фирмы "Sanofi".
Для выявления метаболических эффектов, возникающих под действием гормонов щитовидной железы, мы исследовали четыре основных вида обмена, которые регулирует щитовидная железа: липидный, белковый, углеводный и минеральный.
Концентрации общего холестерина и триглицеридов в сыворотке крови определяли наборами фирмы "Dia Sys" (Германия) с использованием принципа ферментативного колориметрического анализа; холестерин липопротеинов высокой плотности (ЛПВП-ХС) - с использованием осаждающего реактива фирмы "Dia Sys" (Германия) и последующим определением набором для определения общего холестерина; аполипопротеины А1 и В определялись с помощью биохимического анализатора "Vitalab Flexor" (Австрия). Белковые фракции и фракции липопротеинов определялись на электрофоретическом оборудовании фирмы "Helena" (Франция), учет производился на денситометре "Process 24 VISU".
На основании электрофоретической подвижности липопротеин