СОДЕРЖАНИЕ
Введение.
1. Обзор литературы.
1.1. Методы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.
1.2. Методы прижизненной диагностики.
1.2.1. Клинический осмотр.
1.2.2. Аллергическое исследование.
1.2.3. Серологическое исследование.
1.3. Методы послеубойной (посмертной) диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.
1.3.1. Патологоанатомическое исследование.
1.3.2. Бактериологическое исследование.
1.3.2.1. Микроскопия.
1.3.2.2. Культуральное исследование.
1.3.2.3. Биологическое исследование (биопроба).
1.4. Полимеразная цепная реакция в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота.
2. Собственные исследования.
2. 1. Материалы и методы исследования.
2.2. Результаты исследования.
2.2.1.Сравнительная оценка тест-систем ПЦР.
2.2.2 Определение режима тепловой обработки лабораторной посуды для разрушения ДНК возбудителя туберкулеза.
2.2.3.Разработка метода деконтаминации биоматериала от животных с поверхности от возбудителя туберкулеза и его ДНК.
2.2.4.Сравнительная оценка в остром опыте микроскопического,
з
культурального, биологического, серологического, патологоанатомического методов исследований и ПЦР для диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота. 66
2.2.4.1 .Прижизненная диагностика. 66
2.2.4.2 .Послеубойная диагностика. 85
2.2.6.Идентификация культур кислотоустойчивых микроорганизмов.. 92
3. Обсуждение полученных результатов. 98
4. Выводы. 116
5. Практические предложения. 117
6. Список литературы. 118
7. Приложение. 153
15
ции, А.Н. Шаров и М.А. Лукава (198, 199) - реакцию агглютинации с разными антигенами. Л.М. Ходун, Цунекая Н.И. изучали возможность использования иммунофермснтного анализа при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота (190).
Однако Lepper А. (278) считает, что серодиагностика не может заменить туберкулинизацию. Несмотря на это, исследования в поисках серологических методов продолжаются. Для оценки уровня образования антител начали применять метод иммуноферментного анализа (ИФА, ELISA) (319,
320).
C. Thoen et al (329) предложили этот метод для обнаружения микобак-териальных антигенов в тканях больного туберкулезом скота. V. Ritacco et al (307) считает, что этот метод равен по диагностической ценности туберкулиновой пробе.
L. Auer (214) установил, что ELISA с неочищенным антигеном уступает туберкулинизации и непригодна для диагностики туберкулеза.
Однако вес эти разработки остались на стадии эксперимента или производственного испытания. В нашей стране кратковременно использовалась в практике РСК с антигенами УНИИЭВ и СибНИВИ, но и они оказались недостаточно эффективными и не нашли широкого применения.
В настоящее время 3. Г. Воробьева и соавт. (28, 29, 30, 31) предложили для диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота ЛТАД (латексный туберкулезный антигенный диагностикум) в реакции агглютинации латекса (РАЛ), испытание которого показало перспективность использования этого метода прижизненной диагностики болезни.
1.3.Методы послеубойной (посмертной) диагностики туберкулеза
крупної о рогатого скота.
16
1.3.1.Патологоанатомическое исследование.
В соответствии с наставлением по диагностике туберкулеза у животных, наряду с аллергическим, серологическим и бактериологическим, применяют и патологоанатомический метод исследования. К нему прибегают в случаях, когда в благополучном по туберкулезу стаде крупного рогатого скота при плановом исследовании туберкулиновой пробой, выявляют реагирующих животных. С целью подтверждения или исключения диагноза проводят контрольный убой подозреваемого в заболевании животного (129, 153). Обязательному исследованию подвергают: лимфатические узлы - заглоточные, подчелюстные, бронхиальные, средостенные, брыжеечные, надвымянные, а также легкие, печень, селезенку, вымя, плевру, брюшину, кишечник (129, 153).
Как правило, диагностический убой осу ществляют на санитарной бойне и только в некоторых случаях при соблюдении всех ветеринарносанитарных требований - в хозяйстве. Основная задача патологоанатомического исследования - обнаружение типичных для туберкулеза изменений.
В связи с этим важное значение для контроля за благополучием хозяйств, эпизоотической ситуации по туберкулезу, приобрели мясокомбинаты, как источники информации о выявлении при убое больных животных (2, 3, 11, 49, 61,81,211). Своевременная информация о данных ветеринарносанитарной экспертизы туш, органов и тканей животных позволяет своевременно диагностировать заболевание (76, 77, 80,147, 148, 220, 221, 283).
При активном проведении мероприятий по ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота в хозяйстве, у животных обнаруживают на вскрытии обычно только локальные изменения, в основном в лимфатических узлах, а иногда их совсем не выявляют. В стадах, где после проверки туберкулином всех реагирующих животных удаляют, изменения на вскрытии встречаются
- Київ+380960830922