Биологические свойства иммуномодуляторов, их эффективность при профилактике экспериментального туберкулеза животных

-2-
O главление Сгр.
Список используемых сокращений.................................6
Введение.......................................................8
Глава 1. Литературный обзор.
Иммунобиологические свойства иммуномодуляторов и механизмы реализации биологических свойств в формировании неспецифического и специфического иммунного ответа.......13
1.1. Биологические свойства иммуномодуляторов.....................13
1.2. Иммуномодуляторы, цитокины...................................14
1.2.1.Роль цитокинов в формировании неспецифического и специфического иммунитета при инфекционном процессе..........18
1.2.2. Интерфероны................................................22
1.2.3.Факторы некроза опухолей (ФНО-а)............................27
1.2.4. Иммуностимулирующие свойства пробиотиков...................28
1.2.5. Диснуклеотидозы и иммунологические расстройства............31
1.2.6. Иммунная природа хронических инфекций......................33
1.2.7. Важность определения иммунного статуса организма...........35
1.2.8. Сочетанное применение иммуномодуляторов и вакцин.
Адьювантные свойства иммуномодуляторов.......................37
1.2.9. Исследование биологических свойств им му но модуляторов in vitro. Побочные эффекты иммуномодуляторов...........................40
1.3. Туберкулез.................................................42
1.3.1. Туберкулез сельскохозяйственных животных.
Общие сведения...............................................42
1.3.2. Восприимчивость животных к туберкулезу.....................45
1.3.3. Патогенез..................................................46
1.3.4. Клиническая картина........................................48
1.4. Туберкулез лабораторных животных...........................50
1.5. Роль первичных иммунодефицитов в формировании
-3-
чувствительности и устойчивости к туберкулезной инфекций.........51
1.6. Эффективная вакцинация как мера борьбы с туберкулезом сельскохозяйственных животных.......................................51
1.7. Заключение по литературному обзору.............................53
Глава 2. Собственные исследования.....................................55
2.1. Материалы......................................................55
2.1.1. Бактериальные штаммы...........................................55
2.1.2. Диагностикумы и вакцины........................................55
2.1.3. Животные.......................................................56
2.2. Методы исследования............................................56
2.2.1. Анализ зараженности морских свинок микобактериями туберкулезного комплекса методом ПЦР...........................56
2.2.2. Изучение пирогенных свойств иммуномодуляторов..................57
2.2.3. Изучение прогективных свойств иммунокоррегирующих препаратов............................................................58
2.2.4.Определение суммарного пула антител.............................59
2.2.5. Исследование факторов клеточного иммунного ответа у экспериментальных животных............................................59
2.2.5.1. Выделение мононуклеарных клеток (МНК)........................59
2.2.5.2. Определение фагоцитирующей активности МНК....................60
2.2.5.3. Реакция бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛф)............61
2.2.6. Исследование факторов неспецифического иммунного ответа у экспериментальных животных............................................62
2.2.6.1. Определение концентрации интерферона в сыворотках крови экспериментальных животных.............................................62
2.2.6.2. Определение активности ИЛ-1 на культуре клеток
мышиных тимоцитов................................................62
2.2.6.3. Определение активности ИЛ-2 в сыворотках крови...............63
2.2.6.4. Определение активности натуральных киллеров..................64
2.2.7. Выделение ДНК из молок лосося................................64
-13-
Глава 1. Литературный обзор. Иммунобиологические свойства иммуномодуляторов и механизмы реализации биологических свойств в формировании неспецифического и специфического иммунного ответа
1.1. Биологические свойства иммуномодуляторов
Данная работа посвящена исследованию иммуномодуляторных
свойств четырех препаратов, два из которых являются рекомбинантными цитокинами реаферон и ФНО-а, третий является рекомбинантным пробиотиком, полученным на основе бактериального штамма-продуцента В. виЫШз, свойства которого во многом обусловлены интерфероном 0-2, который данный микроорганизм секретирует, попадая в макроорганизм-хозяин. Иммуномодуляторные свойства четвертого препарата - ДНК из молок лососевых рыб, изучены очень мало, однако, судя по немногочисленным литературным данным и теоретическим соображениям, он является весьма интересным и перспективным в этом отношении.
Иммуномодуляторные свойства всех препаратов были изучены на модели экспериментальной туберкулезной инфекции у лабораторных животных. Понятно, что в этом случае данные препараты (2 из которых являются цитокинами) вовлекаются в сложные взаимоотношения с целой иммунной системой организма, в процессы, обусловливающие формирование иммунного статуса и резистентности животных к данной инфекции.
Постановка исследования обусловила структуру литературного обзора. В первой его части рассмотрены цитокины и их роль в формировании противоинфекционного иммунитета. Более подробно рассмотрены иммунобиологические свойства интерферонов, факторов некроза опухолей и пробиотиков на основе бацилл, а также рассмотрены вопросы формирования иммунного статуса организма и участия иммунной системы в развитии хронических инфекций. Вторая
-14-
часть обзора посвящена туберкулезной инфекции животных и вопросам эффективной вакцинации с помощью БЦЖ вакцины.
1.2. Иммуномодуляторы, цитокины
Иммуномодуляторы - это вещества белковой и небелковой природы, способные направленно воздействовать на иммунную систему организма и отдельные ее компоненты, усиливая или подавляя их функции. По способности подавлять или усиливать иммунные реакции иммуномодуляторы делятся на иммуностимуляторы и иммуносупрессоры [8,9, 10, 11].
Рис. 1. Классификация иммуномодуляторов по происхождению
[12]
Иммуномодуляторы
Микробные Иммунорегулятор-
ные пептиды
Бактери-
альные
Г рибко вые
Химически чистые и синтезированные
Аналоги
и чму но модуляторов
природного
происхождения
Известные лечебные препараты, обладающие иммуномодулирующими свойствами
Вещества, полученные с помощью направленного химического синтеза
На рис. 1 приведена классификация иммуномодуляторов, представленная в обзоре Хаигова P.M. и Пинегина Б.В. [12]. По