2
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.............................................................5
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ:
1.1. Классификация микоплазм.................................................9
1.2. Микоплазмы в патологии человека, животных и птиц....................12
1.3. Контаминация микоплазмами клеточных культур.........................16
1.4. Виды микоплазм......................................................18
1.5. Методы обнаружения микоплазм........................................26
1.6. Деконтаминация культур клеток от микоплазм.............................31
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ:
2.1. Материалы и методы..................................................37
2.1.1. Клеточные культуры, питательные среды и растворы....................37
2.1.2. Штаммы микоплазм....................................................41
2.1.3. Питательные среды для выделения и культивирования микоплазм.........41
2.1.4. Препараты для деконтаминации клеточных культур от микоплазм.........43
2.1.5. Методы выявления микоплазм в культурах клеток.......................44
2.1.5.1. Микробиологический метод............................................44
2.1.5.2. Цитохимический метод................................................45
2.1.5.3. Морфологический метод...............................................45
2.1.5.4. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)...................................46
3
2.2. Результаты исследований:
2.2.1. Изучение токсичности фторхинолоновых препаратов
для клеточных культур...................................................47
2.2.2. Изучение ростовых свойств питательных сред для индикации микоплазм
в культурах клеток......................................................61
2.2.2.1 .Изучение бактерицидного действия фторхинолоновых препаратов
HaMarginini G-230 в сыворотке крови животных..........................64
2.2.2.2.Изучение бактерицидных свойств фторхинолоновых препаратов
на M.arginini G-230.....................................................65
2.2.3. Бактерицидное действие на микоплазмы фторхинолоновых препаратов и
поверхностно-активных веществ...........................................72
2.2.4. Изучение контаминации первично-трипсинизированиых и перевиваемых линий
клеток м и коплазмами...................................................74
2.2.5. Возможность деконтаминации перевиваемой линии клеток RK-13
#
препаратами фторхинолонового ряда.......................................78
2.2.6. Деконтаминации перевиваемых линий клеток энрофлоксацином и
поверхностно-ак швным веществом - NP-40.................................87
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.....................................94
4. ВЫВОДЫ.................................................................110
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕ11ИЯ..............................................112
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
114
12
В тоже время Раковская И.В.(1999) считает, что микоплазмы обнаруживаются только в клетках, способных к фагоцитозу, за исключением M.penetrans и некоторых штаммов M.fermentans, активно проникающих в клетки.
Уже открыто более 100 видов микоплазм. Микоплазмы часто встречаются в природе, некоторые виды патогенны для человека, животных, птиц, рыб, насекомых и растений (O’Brien S. et al.,1981; Belton D.,1990; Ишов A.M., 1994; Real F. et al.,1994; Сидоров М.Л. и др.,1995; Барышников П.И.,1997; Козлова В.И. и др..1997; Панин А.И. и др., 1997; Kobayashi П., 1999).
1.2.Микоплазмы в патологии человека, животных и птиц
Широкое распространение микоплазм в природе свидетельствует об их высокой приспособляемости. От человека, животных и птиц выделяются представители различных родов: Mycoplasma, Ureaplasma и Acholeplasma; среди которых
встречаются патогенные виды, однако, есть микоплазмы, не вызывающие симптомов заболевания, они находятся в тесной связи с клетками макроорганизма. Это сапрофитная группа мнкоплазм, свободно живущих во внешней среде (Пусговар А.Я. и др.,1978; Штипкович Л..1987).
Покровский В.И. и др.(1999) сообщают о разнообразных факторах патогенности микоплазм (адгезииы, экзо- и эндотоксины, гемолизины, различные ферменты и продукты метаболизма), которые могут варьировать.
По данным литературы человек является естественным хозяином около 12 видов микоплазм: М.buccale, M.fermentans, M.genitalium, M.lipophilum, M.orale, M.hominis, M.pneumoniae, M.faucium, M.primatum и M.salivarium, U.urealyticum и AJaidlawii (Покровский В.И. и др., 1999).
Помимо вышеперечисленных микоплазм Прозоровский С.В. и др.(1995) выявили у человека еще 2 вида: M.incognitus и M.arthritidis.
Козлова В.И. и др.(1997) и Раковская И.В.( 1999) выделили от человека уже 14 видов микоплазм: М.buccale, M.faucium, M.fermentans, M.genitalium, M.lipophilum, M.orale, M.hominis, M.salivarium, M.penetrans, M.pirum, M.pneumoniae, M.spermatofilium, U.urealyticum и A.laidlawii.
По данным Сидорова М.А. и др.(1995) человек является основным хозяином 9 видов микоплазм (M.buccalc, M.faucium, M.fermentans, M.hominis, M.lipophilum, M.orale, M.pneumoniae, M.primatum, M.genitalium);
13
животные - 48 видов (M.agalactiae, M.alealescens, \l.alvi, M.arginini, M.arthritidis, M.hovigenitalium, M.bovirhinis, M.bovis, M.bovoculi, M.californicum, M.canadcns, M.canis, M.capri, M.capricolum, M.caviac, M.citelli, M.conjunctivae, M.cynos, M.dispar, M.edwardii, M.cquigenitalium, M.equirhinis, M.fastidiosuni, M.feliminutum, M.felis, M.flocculare, M.gateae, M.hyopncumoniae, M.hvorhinis, M.byosiniviac, M.maculosum, M.moatsii, M.molare, M.mycoides sb.mycoides, M.mycoides sb.capri, M.neurolyticum, M.opalescens, M.ovipncumoniae, M.pulmonis, M.putrcfaciens, M.salivarium, M.spunians, M.sualvi, M.subdolum, M.verecundum, M.cricctule, M.muris, M.mustelae); птица - 13 видов (M.anatis, M.columhinasalc, M.columbinum, M.gallinaccum,
M.gallinaruni, M.gallicepticum, M.gallopavonis, M.iners, M.iowae, M.melcagridis, M.pullorum, M.synoviae, M.lipofaciens).
Пустовар А.Я. и др.( 1978> упоминают о выявлении 15 видов микоплазм от крупного рогатою скота, овец, коз; 4 видов - от свиней и 6 видов - от птиц.
Барышников П.И.(1997) считает, что крупный рогатый скот являє гея хозяином более 20 видов микоплазм.
По данным Козловой В.И. и др.(1997) представители некоторых poAOB(U.urealyticum и A.laidlawii) патогенны для людей.
Покровский В.И. и др.(1999) считают, что патогенными для человека являются: М.pneumoniae, M.hominis, M.genitalium, M.incognitus, M.hyorhinis; M.arthritidis; M.synoviae M.fermcntans, типовой вид рода M.mycoides, а не патогенными M.gallisepticum и M.neurolyticum.
Некоторые виды микоплазм, как правило, выявляют только у животных. Так M.primatuni редко выделяют от человека, потому что естественный хозяин - различные виды животных (Прозоровский С.В. и др., 1995; Раковская И.В.,1999).
По данным Foy 11.(1987), Thouvenot Г), et al.(1989), Прозоровского С.В. и др.(1995) этиологическим фактором пневмоний у человека в 10-25% являются микоплазмы.
Такие виды микоплазм, как M.hominis; M.fermcntans; U.urealvtiaem; M.genitalium, обнаруживаются в урогенитальном тракте человека, они вызывают негонококковый уретрит, простатит, вагинит, сальпингит (Козлова В.И.,1997).
Busolo F. et al.(l 985), Korting Н. et al.(1988), Limb D.(1989), Sancher P. et al.( 1990), Курлович Д.В.(1994). Прозоровский С.В. и др.(1995), Козлова В.И. и др.(1997) указывают на микоплазменную инфекцию (M.urealytiacm и M.hominis), в результате которой
- Київ+380960830922