2
СОДЕРЖАНИЕ
Список условных обозначений и сокращений..........................4
ВВЕДЕНИЕ.........................................................6
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ..............................................12
1.1. Вирусная диарея крупного рогатого скота.
1.1.1. Таксономическое положение и основные биологические свойства вируса вирусной диареи крупного рогатого скота...................12
1.1.2. Структурная характеристика вируса вирусной диареи крупного рогатого скота.....................................................16
1.2. Аденовирусная инфекция КРС..................................20
1.2.1. Общая характеристика аденовирусов.........................20
1.2.2.Сведения об аденовирусной инфекции крупного рогатого
скота...........................................................20
1.2.3. Структурная характеристика аденовириона, структура вирусного нуклиокаисида....................................................23
1.2.4. Основные структурные белки аденовириона '.................24
1.2.5. Антигенная структура белков.аденовирусов..................26
1.3.Клинико-эпизоотологические особенности и патогенез вирусной диареи КРС.......................................................28
1.4. Клинико-эпизоотологические особенности и патогенез
аденовирусной инфекции КРС.......................................32
1.5. Специфическая профилактика БД КРС...........................34
1.6. Специфическая профилактика аденовирусной инфекции КРС 43
1.7.Иммуномодуляторы, их природа и иммуномодулирутощий эффект..47
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.................................... 52
2.1. Материалы и методы и исследования...........................52
2.2: Результаты исследований.................................... 59
2.2.1. Отработка культивирования аденовируса и вируса вирусной диареи с инфекционными титрами не ниже 106,0 ТЦД^/мл.............59
3
2.2.2. Очистка и концентрирование аденовируса КРС и вируса вирусной диареи КРС.......................................64
2.2.3. Отработка оптимальных условий инактивации полученных вирусов...................................................69
2.2.4. Изготовление экспериментальных серий моно- и ассоциированных вакцин и сравнение их свойств на разных видах животных....72
2.2.5. Оптимизация схемы введения ассоциированной вакцины.80
2.2.6.Влияние срока хранения на антигенную активность ассоциированной инактивированной вакцины против аденовирусной инфекции и вирусной диареи крупного рогатого скота...................88
2.2.7.Исследование влияния иммуномодуляторов на антигенные свойства вакцины..........................................89
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ....................97
4. ВЫВОД1Л...............................................107
5. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ..............................................108
6. РЕКОМЕНДАЦИИ НО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ .........................................................109
7.СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ......................................110
ПРИЛОЖЕНИЕ...............................................140
13
51, 50). Характер цитопатического действия (ЦПД) зависит от качества культуры клеток и выражается в основном мелкозернистой дегенерацией, округлением клеток, отделением их от стекла, истончением и разрывом монослоя. Конечная картина цитопатического эффекта - отгоржение и гибель клеток, отслоение их в культуральную жидкость, наличие отдельных тяжей и фрагментов погибших клеток, которые при встряхивании сосуда отделяются от стекла (190). В первичной культуре клеток накопление вируса, как правило, не превышает 6,0 \% ТЦЛ^/мл, а в перевиваемых культурах клеток ЭКЛ и КСТ активность, штамма ВК-1В1 №28 после серии адаптационных пассажей достигала 7,5 \% ТЦЦ5(/мл (42).
Вирус ВД КРС разделяют на 2 генотипа - ВД1 и ВД2. ВД1 в свою очередь делят на ВД1а, ВД1Ь и ВД1с, которые были выделены в Америке, в Европе и Германии, соответственно (241, 256). В 1998 году опубликованы сообщения о том, что ВД2 разделен на два генотипа - ВД2а и ВД2Ь (ШбрагИ Ш 1998). ВД2 идентифицируют при вспышках заболевания в основном в Америке и иногда в Европе и Японии (241, 256, 229, 295, 283). Различают цитопатогенные (ЦП) и нецитопатогенные (НЦП) штаммы ВД1 и ВД2.
Характерными представителями вируса ВД КРС первого генотипа являются штаммы КАОЬ, Оь1ояз, а ВД2 КРС - штамм 890, выделенный в Южной Америке от коровы с геморрагическим синдромом (241, 259), а также от овец (120, 282).
Пестивирусы разделены исследователями на 3 вида в зависимости от видовой принадлежности пораженных животных: вирусы ВД КРС, вирусы классической чумы свиней и вирусы пограничной болезни овец. В настоящее время обсуждается новая классификация, по которой пестивиру-
__________сы разделяются на 4.генотипа: 1^штаммы.вируса ВД КРС; 2-.изоляты ви=_
руса КЧС; 3- изоляты от овец и свиней с характерными свойствами ви-
14
руса Г1Б0, они имеют меньше 71 % гомологии с другими пести вирусам и; 4- вирусы ВД2 КРС (270, 281).
В основу этой классификации положены знания нуклеотидной последовательности генома, а также результаты изучения отличительных особенностей генотипов с помощью моноклональных антител и гипе-риммунных сывороток (117. 238, 281).
Анализы последовательности генома доказали существование 3 веток песгивирусов: первая содержит генотипы ВД1, ВД2; вторая включает вирусы КЧС и ПВО и вирусы, выделенные от жирафов; в третью относят вирус, изолированный от антилоп (ГШра^ ТБ., 2003). «см. Рис №.1»
Предполагается дополнить перечень еще тремя генотипами псстиви-русов, выделенных от жирафов, северных оленей и вилорог антилопы (270, 118, 279).
В 1960 г. ПагЬуБЫге 1.Н. показал антигенное родство между вирусом классической чумы свиней и вирусом вирусной диареи КРС. После этого были предприняты многочисленные попытки объяснить основу серологических перекрестных реакций. В результате большинство исследователей считают, что каждый вид пести вирусов антигенно гомогенен, и не существует официально признанных ссротипов у вирусов КЧС, ВД КРС, а также вируса пограничной болезни овец (ВПБО) (140). Была доказана восприимчивость свиней к вирусу ВД КРС, исследователям удалось выделить вирус вирусной диареи КРС после экспериментального заражения свиней. (231,232, 166, 238)
Таким образом, исследования с использованием набора стандартных антисывороток в реакциях перекрестной нейтрализации показали наличие антигенных вариаций штаммов внутри каждого вида пестивирусов
_(Ш),__________________________________________________________________
В реакции нейтрализации возможно выявлять различия в антигенной структуре вирусов КЧС, но не между вирусами ВД КРС и пограничной
- Київ+380960830922