2
СПИСОК СОКРАЩЕН И Й
АПС - алкилмодифицированный полиоксиалкиленсилоксановый сополимер; АЭЭИ-Ы - аминоэтилэтиленимин, димер этиленимина;
БГМ-6М - белое гидрированное масло марки 6М;
ВНА - вируснейтрализирующие антитела;
ВНИЯИ - Всесоюзный научно-исследовательский ящурный институт;
ВНИИЗЖ - Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных;
ВНИИЖ - Всероссийский научно-исследовательский институт жиров;
ВНК - перевиваемая клеточная культура почки хомячка;
ГЛБ - гидрофильно-липофильный баланс;
ГОА - гидроокись алюминия;
Г/см3 - размерность плотности;
ИД51) • пятидесятипроцентная инфекционная доза;
ИмД50- пятидесяти процентная иммунизирующая доза;
ИмД50М - иммунизирующая доза вакцины, защищающая 50% взрослых мышей;
ИмД^МС - иммунизирующая доза вакцины, защищающая 50% морских свинок;
КРС - крупный рогатый скот;
ЛД50 • пятидесятипроцентная летальная доза;
лог:- логарифм при основании - 2;
Масс. % - массовая доля в процентах;
МДУА - масло для универсального адъюванта;
МКГ/мл - микрограмм на миллилитр;
МКМ - микрометр;
М.м. - молекулярная масса;
мм~/с - размерность кинематической вязкости;
мПа.с - размерность динамической вязкости;
НАФ - неполный адъювант Фрейнда;
ПЭГ - полиэтиленгликоль;
ПЭПА - полиэтиленполиамин;
ПФМС-2/5л - полифенилметилсилоксановое масло;
ПЭИ - полиэтиленимин;
ПЭС-2, ПЭС-3 - полиэтилсилоксановое масло;
ПЯВ - противоящурная вакцина;
РСК - реакция связывания комплемента;
pH - показатель концентрации водородных ионов;
Са - ароматические углеводороды;
С.\ - нафтеновые углеводороды;
Ср- парафиновые углеводороды;
СУМ-МЦ - синтетическое углеводородное масло марки МЦ;
ТЦДзд • пятидесятипроцентная цитопатическая доза;
П20р - размерность показателя преломления,
3
СОДЕРЖАНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ......................................................... 6
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Адъюванты и их использование в составе вакцин ............... 12
2.1 Л. Адъюванты в противоящурных вакцинах ..................... 24
2Л .2. Масляные адъюванты в составе противоящурных ............
эмульсионных вакцин ...................................... 28
2.1.2.1. Масляные адъюванты в эмульсионных противоящурных .. вакцинах типа '’вода-масло”................................. 28
2.1.2.2. Масляные адъюванты в эмульсионных противоящурных ..
вакцинах в виде множественной эмульсии типа .........
"вода-масло- вода" ................................... 41
2.1.2.3. Сорбированно-эмульсионные противоящурные вакцины .. 47
2.1.2.4. Безводно-масляные противоящурные вакцины........... 49
2.1.2.5. Синтетические эмульсионные противоящурные вакцины .. 50
2.1.3. Основные принципы изготовления качественных эмульсионных
противоящурных вакцин .................................... 51
2.2. Заключение по обзору литературы .............................. 59
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ .......................................... 63
Материалы
3.1.1. Компоненты масляных адъювантов .......................... 63
3.1.2. Растворы и реактивы ..................................... 64
3.1.3. Приборы и оборудование.................................. 65
3.1.4. Штаммы вируса ящура ......................................65
3.1.5. Подопытные животные...................................... 66
Методы
3.1.6. Приготовление суспензий вируссодержащего материала ...... 67
3.1.7. Очистка вируссодержащей суспензии ....................... 68
3.1.8. Концентрирование антигена................................ 69
3.1.9. Контроль физико-химических свойств масел ................ 70
3.1.10. Контроль биологических свойств масел ................... 72
31
К.Штирбу и В.Попович (202) в опытах на свиньях отметили, что эмульсионная вакцина типа "вода-масло" (доза 1 мл) обеспечивала защиту животных от ящура первые 3 месяца после прививки в 90-100% случаев, до 4-х месяцев-60%, после чего напряженность иммунитета значительно снижалась. Кроме того, животные 2-х месячного возраста проявляли пониженный уровень иммунитета по сравнению со свиньями 4-5 месячного возраста.
На основании экспериментальных данных по изучению иммунитета у свиней ряд авторов (243, 265, 403) пришли к заключению, что
инактивированная противоящурная вакцина из культурального вируса типов А, О, С, приготовленная на основе масляного адъюванта типа "вода-масло"5при введении подсвинкам 2-х месячного возраста в дозе 2 мл с содержанием оптимального количества 146S компонента, обеспечивает защиту животных от ящура до конца откормочного периода (6-9 месяцев).
Общеизвестно, что при ящуре основным показателем иммунитета, от которого зависит устойчивость животных к заражению, является уровень специфических вируснейтрализующих антител в крови. На основании этого, Текерлеков и др. (468) при изучении иммунитета у свиней, привитых эмульсионной вакциной типа "вода-масло", сделали заключение, что через 6-9 месяцев после вакцинации такая вакцина обеспечивает выработку антител в достаточно высоких титрах, чтобы защитить животных от ящура.
Проведя сравнительное изучение ДЕАЕ-декстрановой и эмульсионной вакцин типа "вода-масло", исследователи (178, 250, 313, 367, 377, 379) сообщили о преимуществе последней для иммунизации свиней. Однако, высокая вязкость эмульсионных вакцин делает их трудными для введения, а большие дозы продуцируют нежелательные тканевые реакции в месте введения.
Морган и Мак Керчер (406, 407) провели исследование иммунитета у поросят-сосунов 7-14 дневного возраста, привитых противоящурной вакциной с масляным адъювантом, родившихся от свиноматок, вакцинированных эмульсионной вакциной, и установили, что вируснейтрализующие антитела, приобретенные после скармливания молозива, не препятствовали иммунному ответу поросят-сосунов на вакцину.
32
Совершенно противоположного мнения придерживаются другие авторы (311, 317), которые утверждают, что колостральный иммунитет против ящура у поросят-сосунов оказывает подавляющее влияние на развитие поствакциналь-ного иммунитета.
Из-за повышенной реактогенности для крупного и мелкого рогатого скота в нашей стране производственные противоящурные вакцины, изготовленные на основе масляного адъюванта, применялись лишь для иммунизации свиней.
Масляный адъювант представлял собой смесь минерального масла для эмульгированных вакцин и антигенов, ТУ-38101884-72, основы масла РМ, ГОСТ-15819-70, основы масла АМҐ-10, ГОСТ-6794-75 и масла для биологических препаратов, ТУ-38101884-84. В качестве эмульгатора использовали безводный ланолин ФС-42-2520-88 (40, 105, 115, 170, 171). Такая вакцина представляла собой эмульсию типа "вода-масло" с относительно высокими вязкостью и температурой застывания.
И.А.Пронин и др. (148) при исследовании иммунитета у свиней, привитых в возрасте 1-2-х месяцев эмульсионной вакциной типа "вода-масло" из лапинизированного вируса А22, в различные сроки после прививки, установили, что двукратное (интервал 15 дней) введение вакцины (доза 1 мл) обеспечивает защиту от экспериментального заражения животных, начиная с 4-го дня после повторной вакцинации. Титры антител в сыворотке крови животных составляли 4,23-6,83 лог2, а к 30 дню достигали 5,5-8,33 лог2. Через 3 и 6 месяцев при контрольном заражении гомологичным вирусом после вакцинации все животные противостояли генерализованной форме инфекции.
Исследования проведенные H.A. Еременко и др. (204) при изучении состояния иммунитета у поросят в возрасте 1, 3, 7 и 14 дней после введения эмульсионной проти воя щурной вакцины в дозе 1 мл из лапинизированного вируса Ай и О, показали, что сроки появления и скорость нарастания вируснейтрализующих антител зависели от возраста привитых животных. Чем старше был прививной возраст поросят, тем быстрее появлялись и накапливались специфические антитела. Контрольному заражению гомологичным вирусом через 21 день после вакцинации противостояло от 75 до 100% привитых поросят.
- Київ+380960830922