2
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.............................................................7
Глава I. Обзор литературы...........................................13
1 Л. Физические свойства нитробензола и его основных
метаболитов............................................ 13
1.2. Получение объектов исследования и их применение..........14
1.3. Токсикологическая характеристика.........................16
1.4. Идентификация объектов исследования......................20
1.5. Количественное определение...............................24
1.6. Изолирование и очистка рассматриваемых соединений........29
1.7. Метаболизм, распределение в теплокровных организмах и
сохраняемость в трупном материале........................30
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...............................34
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Глава 2. ИДЕНТИФИКАЦИЯ НИТРОБЕНЗОЛА И ЕГО ОСНОВНЫХ
МЕТАБОЛИТОВ.................................................37
2.1. Идентификация хроматографическими методами...............37
2.1.1. Идентификация в тонких слоях нормалыюфазиого сорбента.................................................37
2.1.2. Идентификация методом ВЭЖХ с применением нормальнофазного сорбента................................41
2.2. Идентификация спектральными методами.....................56
2.2.1. Электронная спектроскопия.........................56
I
2.2.2. Колебательная спектроскопия.......................56
2.3. Идентификация с помощью хромогениых реакций..............57
2.3.1. Идентификация нитробензола по реакции с гидроксидом натрия в среде ДМФА-вода (98:2)..............57
2.3.2. Идентификация о- и .«-нитрофенола по реакции с гидроксидом натрия в среде ДМФА-вода (99:1)..............66
2.3.3. Идентификация /7-нитрофенола по реакции с
гидроксидом натрия в водной среде...................66
ВЫВОДЫ КО ВТОРОЙ ГЛАВЕ..............................................68
Глава 3. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИ ТРОБЕНЗОЛА И
РЯДА ЕГО МЕТАБОЛИТОВ........................................70
3.1. Определение спектрофотометрическим методом...............70
3.1.1. Определение на основе собственного поглощения.....70
3.1.2. Определение на основе реакции с гидроксидом натрия 72
3.1.2.1. Определение нитробензола в среде ДМФЛ-вода (98:2)..............................................72
3.1.2.2. Определение о- и лыштрофенола в среде ДМФЛ-вода (99:1).........................................74
3.1.2.3. Определение //-нитрофенола в водной среде..76
3.2. Определение методом ВЭЖХ с применением...................77
нормальнофазного сорбента.....................................77
ВЫВОДЫ К ТРЕТЬЕЙ ГЛАВЕ..............................................83
Глава 4. ОСОБЕННОСТИ ОЧИСТКИ ИССЛЕДУЕМЫХ
СОЕДИНЕНИЙ..................................................84
4.1. Экстракционное выделение из водных растворов.............84
4.2. Очистка хроматографическими методами и особенности
хроматографической активности рассматриваемых
соединений...............................................85
4.2.1. Очистка в тонком слое сорбента....................85
4.2.2. Очистка методом колоночной хроматографии..........92
4.3. Оценка степени очистки извлечений из биологического
материала в контрольных опытах...........................94
4.3.1. Оценка эффективности очистки ацетоновых и толуольных извлечений методом тонкослойной хроматографии............................................94
22
деление нитрофенолов с другими основными красителями: астазоном синим, катионным розовым, малахитовым зеленым, родулином синим [56, 94].
Описана возможность обнаружения мононитрофенолов по собственной окраске, на основе их способности к сублимации или по образованию имеющего окраску плава с тиосульфатом натрия [65, 69, 94].
Анилин и другие первичные ароматические амины образуют с азотной кислотой диазосоедииения, которые соединяются с 1-нафтилэтилендиамином, образуя интенсивно окрашенные производные [76].
Для идентификации анилина обычно используются следующие реакции: с белильной известью; с лигнином; изонитрильная реакция; реакция образования триброманилина; реакция с раствором нитропруссида натрия, подвергшимся ультрафиолетовому облучению [35, 63, 71]. Часть предлагаемых реакций отличается малой селективностью и низкой чувствительностью.
В моче //-аминофенол может быть обнаружен с помощью ортокрезолам-мониевого теста по появлению ярко-синего окрашивания. Однако, данная реакция является мало селективной [31, 76, 123].
Ароматические нитросоединения могут быть определены методом бумажной хроматографии после предварительной обработки бумаги красителями или перманганатом калия [45, 89].
Существует метод хроматографического определения нитросоединений на бумаге, которая предварительно обрабатывается раствором флуоресцсина. Детекция пятен возможна путем опрыскивания хроматограммы щелочью или в УФ-светс [65, 97].
В литературе имеются данные о способах определения нитро- и аминопроизводных ароматического ряда методом тонкослойной хроматографии с применением различных полярных фаз [22, 65, 118].
Существует способ разделения нитросоединений в тонком слое силикагеля, где в качестве подвижной фазы авторы предлагают использовать систему
23
растворителей петролсйный эфир-диэтиловый эфир-ледяная уксусная кислота (90:10:1) [109].
Разработана методика анализа с помощью ТСХ продуктов реакций ряда ароматических веществ на пластинках “Силуфол” UV-254 в ряде систем растворителей, обеспечивающих разделение компонентов [7, 8, 13,104].
Известна методика идентификации нитросоединений путем предварительного переведения их в амины, обработки хл оран гидридом N, N-диметил-парааминобензолазо-4-бензолкарбоновой кислоты в среде органических растворителей при кипячении и последующего хроматографического разделения на пластинках “Силуфол” с использованием в качестве подвижной фазы системы растворителей бензол-этилацетат (80:20) [162].
Изучено распределение ароматических нитросоединений между органическими фазами трехфазных экстракционных систем. Полученные результаты способствовали прогнозированию хроматографической подвижности в методе ТСХ на гидроксилированном силикагеле [55].
Предложен тонкослойно-хроматографический метод определения анилина в воде, растворах органических кислот, спиртово-водных смесях, контактировавших с образцами резин, вулканизированных с дифен ил гуанидином [72].
Возможно определение анилина методом ТСХ с использованием в качестве сорбентов, нанесенных на бумагу, аммонийных солей молибдовольфра-мофосфорных гетсропол и кислот различного состава [68, 82].
Рядом зарубежных авторов определена липофильность анилина и его тридцати шести замещенных методом ТСХ с обращенными фазами. Обнаружение проводилось по собственной окраске веществ, либо в УФ-свете. Рассмотрено влияние солей, которые увеличивают подвижность исследуемых веществ при ТСХ тем больше, чем выше валентность катиона [124].
Определение рассматриваемых соединений с помощью бумажной хроматографии как правило характеризуется длительностью по времени, а с помощью тонкослойной хроматографии - недостаточной селективностью.
- Київ+380960830922