Фенотипические свойства и эпизоотологическая значимость E.coli O157:H7

2
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 5
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 9
1.1. Исторические данные 9
1.2. Характеристика возбудителя инфекции Е. coli 0157:Н7 11
1.3. Эпизоотологические данные о возбудителе инфекции Escherichia coli 0157:Н7 18
1.4. Патогенез 27
1.5. Клинические признаки заболеваний, вызванных Е. coli 0157:117 30
1.6. Диагностические методы исследований Е. coli 0157:Н7 36
1.7. Профилактика и лечение заболеваний вызванных Е. coli 0157:Н7 40
1.8. Заключение по обзору литературы 42
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 45
3. СОБСТВЕІШЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 49
3.1. Усовершенствование методики выделения и идентификации энтерогеморрагической кишечной палочки Е. coli 0157:117
из биологического материала от сельскохозяйственных и мелких домашних животных 49
3.2. Часгота выделения Е. coli 0157:Н7 из различных экологических ниш 55
3.2.1. Частота выделения Е. coli 0157:Н7 из биологического материала от сельскохозяйственных животны 56
3.2.2. Частота выделения Е. coli 0157:Н7 от мелких домашних животных и пушных зверей 59
3.2.3. Частота выделения Е. coli 0157:Н7 от птицы 60
3.2.4. Частота выделения Е. coli 0157:Н7 от людей 61
3.3. Сезоннсть выделения Е. coli 0157:Н7 62
3.4. Изучение фенотипических свойств 64
3.4.1. Изучение морфологических свойств выделенных изолятов 64
3
3.4.2. Изучение биохимических свойств E. coli Ol 57:Н7 65
3.4.3. Изучение биохимической вариабельности E. coli внутри серотипа0157 69
3.4.4. Изучение патогенных свойств культур E. coli 0157:Н7, выделенных от животных и человека 73
3.4.5. Изучение антибиотикорезистентности изолятов E. coli 0157:Н7, выделенных от животных и птицы 79
3.5. Изучение эпизоотической значимости носительства
E. coli 0157:Н7 у мелких домашних животных * 84
3.6. Изучение патогенности изолятов E. coli 0157:Н7,
выделенных от крупного рогатого скота, для мелких домашних животных 86
4. ОБСУЖДЕНИЕ 88
ВЫВОДЫ 98
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 100
ЛИТЕРАТУРА 101
ПРИЛОЖЕНИЕ 124
11
1.2. Характеристика возбудителя инфекции Е. coli 0157:Н7
Escherichia coli (Е. coli) являются наиболее изученными представителями семейства энтеробактерий, которые обитают в желудочно-кишечном тракте всех теплокровных животных и являются наиболее частыми возбудителями инфекционных заболеваний желудочно-кишечного тракта животных и человека.
Таксономия.
В. coli впервые были выделены в 1885 году в клинике детских болезней в городе Граце (Австрия) из кала больного ребенка с признаками диареи немецким педиатром Т. Эшерихом и названа им Bacterium coli commune (И.В. Голубева и др, 1985). Согласно «Определителю бактерий Берджи» (1997) род Escherichia был включен в состав семейства Enterobac-teriaceae.
По данным современной систематики, род Escherichia включает в себя несколько видов: Е. coli, Е. blatte, Е. ferrusonii, Е. hermanii, Е. vulneris, а также с неустановленным систематическим положением Е. carboxylala.
Морфология.
По морфологическим свойствам Е. coli 0157:117 не отличаются от других видов Е. coli и представляют собой короткие, грамотрицательные палочки шириной 0,5 - 0,7 мкм, длиной 2-4 мкм, подвижные. На поверхности клеток имеются пили. Спор не образуют, некислотоустойчивые (А.И. Улендеев, 1963; Б.И. Антонов, 1986; О.А. Тугаринов, 1987; С.Н. Золотухин, 1994; М.А. Сидоров, 1995).
Культивирование.
Е. coli 0157:117 - аэробы или факультативные анаэробы. Хорошо растут
о
на обычных питательных средах при pH 7,2 - 7,4, при температуре 33 - 37 С. Плохо растут при температуре 44 - 45,5°С (Б.И. Антонов, 1986; С.Н. Золотухин, 1994; С. Krishnan et al., 1987; М.Р. Doyle, 1991).
12
Элективными являются среды Эндо, Левина. Селективной средой для выделения и идентификации E. coli серотипа 0157:Н7 является среда с сор-битолом (сорбитол E. coli 0157:117 агар, Sorbitol MacConkey Agar) (Б.И. Антонов, 1986; A.A. Султанов, 2000; W.U. Ewing, 1986; F. Orskov, 1987).
При культивировании в МПБ E. coli 0157:Н7 вызывает равномерное помутнение среды с образованием беловатого осадка, пристеночного кольца или нежной плёнки на поверхности, легко разбивающихся при встряхивании (Б.И. Антонов, 1986; K.A. Bettelheim, 1994).
На МПА E. coli 0157:Н7 через 18-24 часов формирует круглые, выпуклые колонии средней величины, прозрачные в проходящем свете. Возможно образование мелких прозрачных колоний, напоминающих колонии шигелл или сальмонелл, а также крупных слизистых колоний, похожих на колонии клебсиелл (О. А. Полякова, 1976; Методические указания, 2001).
На среде Эндо E. coli 0157:Н7 образует выпуклые, круглые, сочные малиново-красные колонии средней величины с металлическим блеском, гладкой поверхностью и ровными краями. На среде Левина (агаре с эозином и метиленовой синькой) кишечная палочка растет в виде темно-фиолетовых или черных колоний. Изменяет цвет SDS-бульона с зеленого на желтый (А. А. Султанов и др, 2000).
На среде с сорбитолом E. coli 0157:Н7 образуют круглые, выпуклые, влажные, прозрачные бесцветные или слабо-розовые колонии диаметром 1,5-2,5 мм (Методические указания, 2001).
Биохимические свойства.
Характерной биохимической особенностью энтерогеморрагических кишечных палочек серотипа О 157:Н7, в отличие от других E. coli, является отсутствие способности продуцировать фермент ß-D-глюкуронидазу (95% штаммов) и расщеплять сорбитол (Ю.Г. Степашин, В.В. Гусев и др., 2005; C. Krishnan et al., 1987; J.S. Thompson, 1990; M.P. Doyle, 1991).