Оптимизация системы контроля эпизоотического процесса некробактериоза крупного рогатого скота

2
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 5
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 13
1.1. Распространение болезней, связанных с хромотой
и некробактсриозом 13
1.2. Экономический ущерб, обусловленный поражениями
конечностей и некробактериозом 19
1.3. Методы диагностики некробактериоза 22
1.4. Основные методы профилактики и борьбы с некробактериозом сельскохозяйственных животных 32
1.4Л. Неспецифические, ветеринарно-санитарные методы 32
1.4.2. Биологические (специфические) профилактические
препараты и их применение 39
1.5. Препараты и методы, применяемые для
лечения больных некробактериозом животных 50
1.6. Заключение по обзору литературы 67
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 73
2.1. Методы исследований и объем работы 73
2.2. Результаты исследований 78
2.2.1. Обоснование необходимости совершенствования системы контроля эпизоотического процесса некробактериоза крупного
рогатого скота в связи с многообразием форм его проявления 78
2.2.2. Совершенствование методов диагностики некробактериоза сельскохозяйственных животных 83
2.2.2.1. Усовершенствование метода отбора биоматериала из пораженной конечности для лабораторного исследования 83
22.2.2. Сравнительная эффективность индикация Fusobacterium necrophorum бактериологическим методом и с помощью гнездовой ПЦР 85
I
2.2.3. Определение роли специфической профилактики в системе контроля эпизоотического процесса некробактериоза крупного рогатого скота
2.2.3.1. Регламент получения антигена Fusobacterium necrophorum и постановка реакции агглютинации
2.2.3.1.1. Выбор культуры (изолята) в качестве антигена
2.2.3.1.2. Методика приготовления антигена F necrophorum
2.2.3.1.3. Техника постановки РА
2.2.3.2. Изготовление и апробация вакцины ГОА ИЭВСиДВ
2.2.3.2.1. Определение иммунизирующей дозы вакцины
2.2.3.2.2. Испытание вакцины в неблагополучных по некробактериозу хозяйствах
2.2.3.3. Сочетанное применение вакцинации и неспецифических мероприятий при оздоровлении от некробактериоза
2.2.3.4. Одномоментное испытание разных разрабатываемых противонекробактериозных вакцин в однотипных условиях
2.2.4. Оздоровление неблагополучных по некробактериозу хозяйств с разной эпизоотической ситуацией неспецифическими методами
2.2.4.1. Естественная резистентность организма крупного рогатого скота - как условие эффективности неспецифических методов оздоровления
2.2.4.2. Применение неспецифических мероприятий в неблагополучных хозяйствах
2.2.5. Разработка и испытание препаратов для лечения больных некробактериозом животных
2.2.5.1. Новый лекарственный препарат некрогель местного действия
2.2.5.1.1.Состав препарата и доклинические исследования
2.2.5.1.2. Изучение острой токсичности некрогеля для белых мышей при введении в желудок
2.2.5.1.3. Изучение острой токсичности некрогеля для белых крыс
Д.А. Хузин (2001), Д.А. Хузин с соавт. (2002) указывали, что первичный диагноз на некробактериоз устанавливают на основании клинического осмотра животных, обращая внимание на массовый характер гнойно-некротических поражений тканей наружных покровов со специфическим, гнилостным запахом. В то же время разработка специфичных и быстро выполнимых методов индикации возбудителя некробактериоза, остается весьма актуальной задачей (Д.А. Хузин, Т.Х. Фаизов, 2001).
T. Shibahara et al. (2002) использовали иммуногистохимический и ультраструктурный методы для идентификации Fusobacterium necrophorum subsp. necrophorum, при заболевании 37-дневных телят смертельным некротическим глосситом. Результаты исследований показали, что некротический глоссит вызывает Fusobacterium necrophorum subsp. necrophorum.
M.H. Романенко с соавт. (2003), М.Н. Романенко (2004) впервые в Российской Федерации разработали иммуноферментную, люминесцентную и гистохимическую тест-системы для диагностики некробактериоза крупного рогатого скота на основе очищенного антигена F. necrophorum. Тест-система характеризуется специфичностью, чувствительностью и воспроизводимостью результатов.
И.А. Битов с соавт. (2003) разработали промышленную технологию производства эритроцитарного антигена и экспресс-метод (реакция кровекапельной непрямой гемагглютинации) для диагностики некробактериоза крупного рогатого скота, позволяющий диагностировать пораженный некробактериозом скот и оценить эффективность использованной вакцины и гипериммунной сыворотки для профилактики и лечения данного заболевания.
A. Oelke et al. (2005) изучали последовательность нуклеотидов оперна лейкотоксина F. necrophorum. Ученые использовали метод нозерн-блотирования, который заключается в блотировании РНК из гелей агарозы на
синтетическую мембрану для последующей идентификации путем гибридизации со специфическим зондом и метод вестерн-блотирования. Установлено, что только два биотипа F. necrophorum имеют локус гена, отвечающего за выработку лейкотоксина.
К. Okamoto et al. (2005) исследовали действие по растворению (лизису) коллагена компонентов клеточных стенок Fnecrophorum subsp. necrophorum на клетки культуры тканей кролика. При помощи электронного микроскопа установлено, изменение поверхности клеток гранулоцитов и гепатоцитов. Гранулоциты были гладкие, неправильной формы, гепатоциты -шероховатые с маленькими отверстиями в мембране клеткок. Эти открытия показали, что интоксикация клеток вызывает первоначальные повреждения для приживания в них бактерий Fusobacterium necrophorum subsp. necrophorum как первого шага для развития инфекции.
1.4. Основные методы профилактики и борьбы с некробактериозом сельскохозяйственных животных
1.4.1. Неспецифические, ветеринарно-санитарные методы
Первые меры борьбы с некробактериозом крупного рогатого скота, по сообщениям Н.Носкова (1947), Я.Р. Коваленко (1948), были направлены на улучшение санитарного состояния помещений и выгулов, их дезинфекцию.
И.М. Голосов, А.И. Колмаков., В.И. Ширков (1960); И.М. Голосов, М.И. Климонтов (1963); В. Низовцев (1963), А.М. Силков (1965, 1966) предложили для неспецифической профилактики некробактериоза тканевые биологические стимуляторы.
Для предупреждения заболевания телят оленей некробактериозом Б.Н. Барадиев (1969, 1972, 1975, 1984, 1987); Б.Н. Барадиев, В.П. Слепцов (1986, 1987), рекомендуют двукратно обрабатывать животных взвесями дибиомицина и бициллина -5 на тривитамине.