Ви є тут

Разработка и испытание селективных питательных сред для культивирования Actinobacillus pleuropneumoniae

Автор: 
Карабанова Ольга Владимировна
Тип роботи: 
Дис. канд. вет. наук
Рік: 
2004
Артикул:
170655
179 грн
Додати в кошик

Вміст

СОДЕРЖАНИЕ
. Введение........................................................... 5
1. Обзор литературы............................................ 9
1.1. Роль А.ріеигорпеишопіае в инфекционной патологии
свиней........................................................ 9
1.2. Классификация актинобацилл............................ 11
1.3. Актинобациллезная пневмония свиней......................... 12
1.3.1. Эпизоотологические данные. Клинические признаки и патологоанатомические изменения................................. 12
1.3.2. Краткая характеристика биологических свойств
А.ріеигорпеитопіае 16
1.4. Бактериологическая диагностика актинобациллезной пневмонии свиней................................................. 24
1.5. Серологическая диагностика актинобациллезной
пневмонии свиней.......................................... 31
2. Собственные исследования....................................... 34
2.1. Материалы и методы исследования............................ 34
2.2. Результаты собственных исследований........................ 41
2.2.1. Сравнительная оценка ростовых свойств общеупотребительных коммерческих жидких и плотных питательных сред................................................ 41
2.2.2. Конструирование оптимальной жидкой питательной

среды для А.ріеигорпеитотае............................... 45
2.2.2.1. Влияние дрожжевого экстракта на рост
А.ріеигорпеитопіае в жидкой питательной среде 46
2222. Влияние сыворотки крови на рост А.ріеигорпеитопіае в
жидкой питательной среде................................. 48
2
2.2.2.3. Влияние глюкозы на рост А.ріеигорпеитопіае в жидкой питательной среде............................................... 50
2.2.2.4. Влияние pH на рост А.ріеигорпеитопіае в жидкой питательной среде............................................... 51
2.2.2.5. Оптимизация состава жидкой питательной среды 53
2.2.3. Конструирование жидкой накопительной питательной
среды для А.ріеигорпеитопіае.............................. 55
2.2.3.1. Чувствительность А.ріеигорпеитопіае к антибиотикам її некоторым красителям............................................ 55
2.23.2. Оптимизация количества селективных факторов в
жидкой накопительной питательной среде................... 59
2.2.3.3. Сравнительная оценка ростовых свойств оптимальной жидкой и накопительной питательных сред......................... 61
2.2.4. Конструирование оптимальной плотной питательной ■
среды для А.ріеигорпеитопіае.............................. 65
. 2.2.5. Конструирование плотной селективной питательной
среды..................................................... 67
2.2.5.1. Оптимизация количества антибактериальных веществ в плотной селективной питательной среде.................... 67
2.2.5.2. Сравнительная оценка ростовых свойств оптимальной и селективной плотных питательных сред............................ 69
2.2.6. Конструирование плотной дифференциально-диагностической питательной среды с селективными свойствами...................................................... 73
2.2.7. Изучение селективных свойств сконструированных
жидкой и плотной питательных сред......................... 74
2.2.7.1. Ингибирующее действие жидкой накопительной питательной среды на рост гетерологи чных видов микроорганизмов................................................. 74
3
1.2. Классификация актинобацилл
В руководстве по систематике бактерий Берджи (1984) роды Pasteurelia, Actinobacillus и Haemophilus объединены в семейство Pasteureilaceae (Pohl, 1979). Род Haemophilus включает виды, нуждающиеся для своего развития в ростовых факторах (Х-фактор и V-фактор). Типовой представитель рода - Haemophilus influenzae.
Род Actinobacillus включает виды, нуждающиеся и не нуждающиеся в ростовых факторах (X и V), типовой вид - A. lignieresii.
Род Pasteurella включает, за исключением P.avium, виды, не требующие факторов роста, типовой вид - P.multocida.
Плевропневмония свиней, вызванная предположительно бактерией рода Haemophilus, была описана Pattison и соавторами в 1957 году как свиная лихорадка (Pattison 1957; Riising H.-J., 1981).
В 1963 году Olander описал энзоотическую вспышку аналогичной болезни в Калифорнии (США). НАД-зависимые культуры бактерий с гемолитической активностью, выделенные от свиней, он изначально идентифицировал как Haemophilus parahaemolyticus, найдя наибольшее сходство изолятов с этим видом бактерий (Olander 1963; Riising H.-J.,
1981).
Позднее было установлено, что выделенные от свиней штаммы НАД-зависимых гемолитических бактерий отличаются от Haemophilus parahaemolyticus и предложено их обозначить как новый вид -Haemophilus pleuropneumoniae (Shope R., 1964; Nicolet J., 1968).
В руководстве по систематике бактерий Берджи (1984) свиные НАД-зависимые гемолитические бактерии описаны как вид -Haemophilus pleuropneumoniae.
Несколько позднее была опубликована работа о выделении от свиней Pasteurella — haemolytica-подобных бактерий, не обладающих НАД-зависимостью (Nicolet J., 1988). Эти бактерии вызывают сходную по
клинической картине пневмонию свиней, что потребовало их дифференциации. Nicolet J. (1988) счел возможным отнести эти бактерии к виду Haemophilus pleuropneumoniae как биовар, не обладающий НАД-зависимостью, но при этом нарушалось одно из основных требований для включения в род Haemophilus - потребность в ростовых факторах.
В других работах отмечалась сложность дифференцировки некоторых видов родов Pasteurella - Haemophilus - Actinobacillus (Pohl S., 1981; Kilian М., Frederiksen W., 1981; Olsen L., Brond J., 1985).
В результате последовавших за этим исследований по биологии и систематике представителей указанных родов степень их сходства была признана достаточной для объединения в семейство Pasteurellaceae, что и нашло отражение в Руководстве по систематике бактерий Берджи 1984 года. В этом издании Руководства вопрос таксономического положения Haemophilus pleuropneumoniae не пересмотрен, и он фигурирует как НАД-зависимый представитель рода Haemophilus. Pohl S. и соавторы (1983) предложили перенести вид Haemophilus pleuropneumoniae в род Actinobacillus с наименованием Actinobacillus pleuropneumoniae, а P.haemolytica-подобныс бактерии и типичные культуры Haemophilus pleuropneumoniae предложили рассматривать как биовары данного вида (Pohl S., Bcrtschinger H.U., Frederiksen W., Mannhim W., 1983).
Таким образом, в род Actinobacillus оказались включенными культуры, обладающие НАД-зависимостыо, и свойство НАД-зависимости распространилось на все семейство Pasteurellaceae.
1.3. Актинобациллезная пневмония свиней
1.3,1. Эпизоотологические данные. Клинические признаки и натологоанатомичсские изменения
Источником возбудителя инфекции являются больные и
переболевшие животные, а также клинически здоровые свиньи-
бактсрионоситсли (Сидоров М.А., Скородумов Д.И., 1981; МильковМ.Ф.,
12