Оглавление
1. ВВЕДЕНИЕ...................................................4
2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.................. ........... .........6
2.1. Современные представления об этиологии и патогенезе СЭП
У СОБАК..........................................................6
2.2. Роль МИКРООРГАНИЗМОВ В РАЗВИТИИ СЭП У СОБАК...........13
3. ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ E.COLI, ВЫЗЫВАЮЩИХ ПАРЕНТЕРАЛЬНЫЙ ИНФЕКЦИОННЫЙ ПРОЦЕСС....................18
3.1. Факторы патогенности E.coli...........................20
3.1.1. Генетические основы патогенности E.coli...........20
3.1.2. Структурные факторы вирулентности E.coli..........24
3.1.2.1. Капсула (К - антиген) уропатогенных штаммов Е.СОІІ..24
3.1.2.2. Соматические О - антигены (О-АГ) уропатогенных штаммов E.coli..............................................26
3.1.2.3. Адгезивные антигены E.coli....................28
3.1.3. Секретируемые факторы вирулентности E.coli: Токсины.40
3.1.3.1. Эндотоксин....................................40
3.1.3.2. Энтеротоксины.................................40
3.1.3.3. Шигаподобные цитотоксины (веротоксины)........42
3.1.3.4. Гемолизины E.coli.............................46
3.1.3.5. Цитотоксический некротизирующий фактор (CNF) E.coli ...........................................................49
3.1.3.6. Сидерофоры.................................. 53
3.1.3.7. Устойчивость E.coli к антибактериальным препаратам.55
4. ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА СЭП............................... 58
5. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ .............................. 60
5.1. Материалы и методы....................................60
5.2. Результаты собственных исследований...................82
5.2.1. Анализ анамнестических данных, клинических признаков и лабораторных исследований при СЭП у собак..................82
5.2.2. Результаты бактериологического исследования гнойного содержимого матки при СЭП у собак..........................84
5.2.3. Морфология, тинкториальные и биохимические свойства E.coli при СЭП у собак.....................................93
5.2.4. Чувствительности к антибиотикам E.coli при СЭП у собак ..........................................................103
5.2.5. Адгезивная способность культур E.coli при СЭП у собак.. 115
5.2.6. Серовариабельностъ культур E.coli при СЭП у собак.130
5.2.7. Определение токсигенной активности культур E.coli при СЭП у собак...............................................133
5.2.7.1. Определение LT и ST энтеротоксинов............133
5.2.7.2. Плазмидноый профиль культур E.coli при СЭП у собак .....................................................135
5.2.7.3. Постановка полимеразной цепной реакции (ПЦР) с целью обнаружения LT, STa и STb энтеротоксинов, SLT1/VT1, SLT2/VT2 цитотоксинов у культур E.coli при СЭП у собак......139
5.2.7.4. Определение CNF1 E.coli при СЭП у собак.......144
5.2.7.5. Вирулентность культур E.coli при СЭП у собак..149
5.2.7.6. Гемолитическая активность E.coli при СЭП у собак.... 156
6. КОРРЕЛЯЦИОННАЯ СВЯЗЬ МЕЖДУ ФАКТОРАМИ ПАТОГЕННОСТИ
E.COLI ПРИ СЭП У СОБАК..................................... ...164
7. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ....................... 164
8. ВЫВОДЫ ................................................. 177
9. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ .................................179
10. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 180
И. ПРИЛОЖЕНИЕ...............................................194
3.1. Факторы патогенности E.coli
3.1.1. Генетические основы патогенности E.coli
В настоящее время геном E.coli полностью расшифрован. E.coli получила почти 20% своих генов горизонтальным путем от других бактерий (Lawrence J.G., 1998).
Носителями ее генетической информации служит от 1 до 4-х (в зависимости от фазы роста) молекул хромосомной ДНК, короткие молекулы тРНК и мРНК, рРНК и плазмиды. Соотношение между ДНК и РНК у E.coli составляет 1:6. Общий размер генома варьирует от 4,6*106 до 5,3*106 пар нуклеотидов (Bergthorsson U., 1998). Линейная хромосомная ДНК
патогенных штаммов содержит не менее 1380 генов.
У выделенных от собак изолятов E.coli в большинстве случаев обнаруживают крупные (30-70 мДА) плазмиды, несущие важные гены, отвечающие за адгезию и другие этапы патогенеза бактерии.
Плазмиды - генетические детерминанты определяющие наличие тех или иных биологических свойств данного возбудителя, насчитываются в большом количестве у бактерий этого рода и относительно легко передаются от одной разновидности эшерихий к другой, а также от энтеробактерий других родов. (Покровский В.И., 1999).
Факторы вирулентности E.coli кодируются ее хромосомой, плазмидами и бактериофагами. Хромосома агента содержит большое количество автономно перемещающихся элементов (фагов, «островов патогенности» и т.д.). E.coli остается комменсалом, пока не приобретет генетических элементов, кодирующих ее факторы вирулентности. Последние передаются бактерией вертикально (дочерним клеткам), горизонтально (другим штаммам агента) или даже бактериям других видов через мобильные генетические элементы (плазмиды, бактериофаги) и острова вирулентности.
В хромосоме энтеропатогенных (ЭПКП) и уропатогенных (УПКП) штаммов агента факторы вирулентности собраны в кластеры, имеющие
размер свыше 10 тыс. пар оснований и называемые «островами патогенности». (Donnenbcrg M.S. (1993), Mc.Daniel. (1997)). Характеристика « островов патогенности» эшерихий представлена в таблице №1.
Таблица №1.
Характеристика «островов» патогенности E.coli
Виды. Название. Размер КД. Гены вирулентности, фенотип. Ассоциированный ген тРНК.
Уропато генные E.coli. РАМ 70 Н1у SelC
У ропатогенные E.coli. РА 1-2 190 Hly, prf LeuX
Уропатогенные E.coli. PAI-3 25 sfa ThrW
Уропатогенные E.coli. РА 1-4 170 Hly, pap AsnT
Уропатогенные E.coli. PAI-2 110 Hly, prf, cnf-1 PheV
Энтеропатоген ные E.coli. LEE-PAI 35 Eae, tir SelC
Энтсротоксигенные E.coli. Tia-PAI 46 tia SelC
Аббревиатуры: Шу - альфа гемолизин; CNF1 - цитотоксически й
некротизирующий фактор 1; prf pap, sfa - гены, контролирующие синтез Р и S фимбриальных адгезииов; Еае (E.coli attaching/effacing) — ген, контролирующий синтез эшерихиями белка-интим ина изменяющего структуру слизистой оболочки кишечника; tir (translocation intimin receptor), протеин, служащий для взаимодействия эшерихий с мембраной эпителиоцшпа.
Наиболее детально острова патогенности изучены у уропатогенных штаммов E.coli, выделенных от человека при инфекциях мочевыводящей системы «Острова» патогенности УПКП могут включать гены, контролирующие синтез фимбриальных адгезинов (типа 1, Р и S фимбрий), альфа-гемолизина (Н1у) и цитотоксического некротизирующего фактора 1
- Київ+380960830922