2
' ВВЕДЕНИЕ...............................................................С.4
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ..............................................С.8
, 1.1. Определение заболевания и его распространение.....................С.8
і
: 1.2. Этиология и физико-химические свойства возбудителя..............С. 10
1.3. Эпизоотологическис данные........................................С.15
1.4. Патогенез и клинические признаки................................С. 18
1.5. Патологоанатомические изменения..................................С.21
1.6. Диагностика......................................................С.24
1.7. Меры профилактики и лечения......................................С.28
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ..............................С.ЗЗ
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ..........................С.45
3.1. Характеристика использованных штаммов вируса ИГП.................С.45
3.1.1. Выделение эпизоотических штаммов вируса ИГП....................С.45
3.1.2. Изучение биологических свойств.................................С.48
3.1.2.1.Культивирование штамма “АДВ” вируса ИГП в культуре клеток................................................................С.48
3.1.2.2.Культивирование штамма “АДВ” вируса ИГП в развивающихся эмбрионах СПФ-кур.....................................................С.49
3.1.2.3.культивирование штамма “АДВ” вируса ИГП в организме птиц..................................................................С.51
3.1.3. Поиск тест-системы для определения биологической активности вируса ИГП...................................................1...............С.62
3.1.4. Применение реакции диффузионной преципитации для диагностики ИГП...................................................................С.64
3.1.5. Изучение антигенных свойств штамма “АДВ” вируса ИГП............С.75
3.1.6. Изучение физико-химических свойств штамма “АДВ” вируса ИГП...................................................................С.77
3.1.7. Изучение морфологических свойств вируса ИГП...............С.84
3.2. Разработка технологии изготовления вакцины..................С.85
3.2.1. Метод получения антигена..................................С.85
3.2.2. Разработка оптимального ингредиснтного состава инактивированной вакцины...........................................................С.87
3.2.3. Разработка схемы иммунизации..............................С.91
3.2.3.1.Определение оптимальной дозы и метода введения
вакцины..........................................................С.91
3.2.3.2.0пределение возраста вакцинируемых цыплят и кратности вакцинации........................................................С.92
3.2.4. Сохраняемость иммуногенной активности инактивированной вакцины в процессе хранения.................................................С.94
3.2.5. Разработка технологии изготовления, биологического контроля и методики применения вакцины.......................................С.95
3.2.6. Испытание инактивированной вакцины против ИГП в экспериментальных
и производственных условиях.......................................С.96
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ........................С.99
Глава 5. ВЫВОДЫ..................................................С.110
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.........................................С.111
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.................................С.112
ПРИЛОЖЕНИЕ.......................................................С. 130
12
A. ct aL, 1996; Бакулин В.A., 1991,1997; Борисов В.В. с соавт., 2003). Нужно отметить, что отечественные исследователи и ранее наблюдали гидроперикардит и асциты при аденовирусной инфекции птиц, но не выделяли их как новую нозологическую единицу (Ибрагимов A.A., Горюнова Т.А.,1987).
При спонтанных вспышках гепатита выделяют различные серотипы аденовирусов 1 группы: серотип 1 (Winterfleld R.W. et al.,1973), серотипы 2,3 и 4 (Grimes Т.М., King D..J., 1977), серотип 5 (Fadly Л.М., Winterfleld R.W.,1973; McFerran J.B. et al.,1976), серотипы 6,7 и 8 (Grimes T.M. et al.,1977; KefFord B. ct a!.,1980; McFerran J.B. et al.,1976), серотипы 7 и 10 (Barr D.A., Scott P.,1988) и серотип 9 (Grimes T.M. et al.,1978). Однако чаще всего к ним причастны штаммы 5-го и 8-го серотипов. Следует отметить, что все известные серотипы аденовирусов 1 группы, а их на сегодняшний день насчитывают 12, при парентеральном введении SPF-цыплятам до 10-дневного возраста вызывают гепатит.
В том, что штаммы одного и того же серотипа вызывают различную патологию, нет ничего удивительного, так как установлено, что штаммы, принадлежащие к одному серотипу, могут различаться по способности вызывать заболеваемость и смертность (Bülow V.v. et al., 1986; Cook
J.K.A.,1974), а также иметь разную способность к росту на органных культурах
*
(Georgiou K. ct al.,1983). Подтверждением гипотезы аденовирусной этиологии ИГП служат результаты экспериментов Nakamura К. с соавт. (1999), которые успешно воспроизвели заболевание не только гомогенатом печени больных цыплят, но и изолированным из этой печени, путем пассажирования на культуре почки цыплят, аденовирусом. Ранее такие попытки были безуспешными - заболевание легко воспроизводилось гомогенатом печени, но при заражении изолированным из этого гомогената аденовирусом вызвать заболевания цыплят не удавалось.
Сторонники другой гипотезы (Akhtar S., 1994; Morales G.A.et а!., 1995; Toro
13
H. ct al.,1999) считают, что, в дополнение к аденовирусам, причиной ИГП являются неизвестные агенты, нуждающиеся в комбинации с аденовирусами для воспроизведения типичных признаков заболевания. Природа этих агентов пока остается неизвестной.
В качестве дополнительного возбудителя рассматривается наличие неизвестного РНК-содержащего вируса, который обладал выраженной устойчивостью к 5-бромдезоксиуридину. Этот агент, по мнению Morales G.A. с соавт. (1995), оказывал стимулирующее действие на формирование в культурах клеток печени и почек цыплят синтициальных структур.
Пока остается неясной и роль аденоассоциированного дефектного парвовируса в этиопатогенезе заболевания, который довольно часто выделяют от больных птиц, либо обнаруживают в ядрах гепатоцитов вместе с аденовирусом, хотя отмечают, что его присутствие может снижать рост аденовирусов в клеточных системах, а также патогенность и онкогенность (McFerran J.B., Adair В.М., 1977).
Возбудитель ИГП обладает высокой устойчивостью к воздействию различных физико-химических факторов. Суспензия печени больных цыплят сохраняла вирулентность после 30-минутной экспозиции при температуре +60°С (Shane S.M., JafFery M.S., 1997). Такой температурный режим обычно инактивирует аденовирусы, хотя могут встречаться и термостабильные штаммы. Так, штамм “93” аденовируса птиц 1 серотипа сохранял остаточную инфекционность после воздействия температуры +70° С в течение 30 минут. Однако вирус ССЯ-76 инактивировался полностью при температуре +60° С за то же время, а один из серотипов аденовирусов свиней инактивировался при температуре +60° С уже за 3-5 минут. Указанные различия в тсрмочувствительности аденовирусов могут объясняться вариабельностью защитных свойств белков капсида, а также способностью клеток различных систем к восстановлению денатурированных участков ДНК вирусов.
- Київ+380960830922