ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛ, МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ
2.1. Материал и методы исследования
Работа проведена на базе детского гастроэнтерологического отделения 2 детской
городской клинической больницы г. Симферополя и основана на результатах
клинико-лабораторно-инструментальных исследований 128 детей в возрасте от 6
до15 лет с хроническим гастритом (78), поверхностным гастродуоденитом (29) в
периоде обострения и после проведенного комплексного лечения в периоде неполной
ремиссии, а также 21 ребенок с функциональным расстройством желудка. Жалобы,
давность заболевания, факторы риска, наследственность, основные клинические
проявления, динамика течения заболевания, результаты проводимых лабораторных и
инструментальных исследований, а также характер и объем терапевтических
мероприятий были внесены в специально разработанные карты.
Для уточнения диагноза и оценки эффективности лечения у больных с ХГ, ХГД и ФРЖ
использовали общепринятые методы клинико-лабораторного обследования: анализ
анамнестических данных; объективный осмотр; динамику клинических синдромов
(болевого, диспепсического, астено-вегетативного, хронической неспецифической
интоксикации); общий анализ крови и мочи, копрограмму, анализ кала на скрытую
кровь, яйца глистов, цисты лямблий, посев кала на дисбиоз, биохимическое
исследование крови с изучением синдромов цитолиза, холестаза, недостаточности
синтетической функции печени, изучение концентрации общего белка, амилазы крови
и диастазы мочи, ультразвуковое обследование органов брюшной полости с
определением функции. Проводилась консультация ЛОР-врача, аллерголога.
С целью верификации диагноза проведены инструментальные, гистологические и
биохимические методы исследования, которые проводились при поступлении и при
выписке больного. У детей с ФРЖ исследования проводились при поступлении в
стационар.
Состояние СО пищевода, желудка и ДПК изучали методом эндоскопии с помощью
гибкого волоконного эзофагофиброгастродуоденоскопа («Olympus» ХР-20).
Эндоскопическое исследование проводилось натощак, за двенадцать часов до
манипуляций отменялся прием пищи и лекарств. После введения гастроскопа
проводился осмотр верхних отделов пищеварительного тракта с целью выявления
эзофагита, оценки количества слизи и жидкости в желудке, рельефа слизистой,
распространенности и интенсивности гиперемии отделов СО желудка и ДПК,
локализации и размера эрозий. Оценивали данные, опираясь на описания нормы и
патологических изменений по данным Мазурина А.В. и др. [304, 305]. Нами
отобраны больные со следующими эндоскопическими формами хронического гастрита
(гастродуоденита): поверхностный гастрит (гастродуоденит)- первая, вторая
группа (1, 2); гипертрофический гастрит - (3); эрозивный гастрит- (4).
С целью выявления геликобактерной инфекции в работе использовался биохимический
метод - уреазный экспресс-тест, основанный на высокой уреазной активности НР.
Выделяемая НР фермент уреаза интенсивно разлагает мочевину с выделением аммиака
и углекислого газа, изменяя рН среды в щелочную сторону. Полученные изменения
рН регистрируются с помощью индикатора. В качестве диагностической среды
использовали следующий тест-раствор: в стерильные лабораторные пробирки вносили
1 мл 10 % раствора мочевины, приготовленного на буферном растворе с рН 6,8 ед.
Затем туда же добавлялось 2 капли индикатора –1% раствор фенолового красного.
Тест-раствор готовился утром перед проведением эндоскопии. Биоптаты, взятые из
наиболее воспаленных участков СО, помещали в тест-раствор сразу после
проведения гастроскопии. Результаты оценивали в течение 1 часа, последующего 2
часа и через 24 часа по изменению окраски тест-раствора с желтого на
малиново-красный, свидетельствующие о наличии НР в исследуемом кусочке СО
желудка [306]. Результаты исследования оценивались как “положительные”, если
окрашивание появлялось в течение 1 часа, “слабоположительные”, если изменение
окраски наступало в течение 2 часа и “отрицательные”, если изменение окраски не
наступало через 24 часа.
Нами проведено морфологическое исследование СО желудка и ДПК путем взятия
биоптатов через инструментальный канал эндоскопа во время
эзофагогастродуоденоскопии для изготовления гистологических препаратов.
Морфологическое изучение СО желудка и ДПК и гистологическое выявление НР
проводились на базе патологоанатомического отделения республиканской детской
клинической больницы г. Симферополя (заведующий отделением – Кравченко Н.Г.)
г.Симферополь и кафедры патологической анатомии КГМУ им. С.И.Георгиевского
(зав.кафедрой – профессор Загорулько А.К., консультант - доцент Филоненко
Т.Г.).
Метод основан на возможности при использовании специфических красителей
визуализации НР и гистологической структуры СО желудка. Объектом исследования
является препарат, приготовленный путем получения гистологических срезов. В
настоящей работе гистологические срезы готовились по стандартной методике.
Биоптат, полученный во время гастроскопии, сначала фиксировался в 10% растворе
формалина, затем его обезвоживали путем проводки через спирты возрастающей
крепости. Затем зафиксированный и обезвоженный гастробиоптат заливался в
парафин. Далее на микротоме из полученных парафиновых блоков делались срезы
толщиной 2-4 мкм.
Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином, а также по Гимзе.
Оценку препаратов проводили под световым микроскопом, изменения СО
расшифровывали в срезах окрашенных гематоксилином и эозином, выявление НР
проводилось в срезах, окрашенных по Гимзе. Наличие НР оценивалось по
обнаружению с