Розділ 2
ВЛАСНІ ДОСЛІДЖЕННЯ
2.1. Матеріали і методи дослідження. Загальна характеристика досліджуваного
матеріалу. Об'єктом для дослідження стали ділянки пухлини легень, отримані
після оперативного втручання (12 спостережень), матеріал бронхобіопсії (9
випадків), а також аутопсійний матеріал померлих від плоскоклітинного раку
легень (24 спостереження).
Забір матеріалу робився на базі Полтавського обласного патологоанатомічного
бюро.
Серед всіх спостережень, плоскоклітинний рак легень спостерігався у 35
чоловіків і 10 жінок.
Розподіл матеріалу для вивчення морфологічних особливостей плоскоклітинного
раку легень за віком і статтю поданий в таблиці 2.1.
Достатня кількість матеріалу, дозволило нам визначити гістологічні,
гістохімічні, а також морфометричні особливості плоскоклітинного раку легень.
Таблиця 2.1
Кількісний розподіл матеріалу морфологічного дослідження плоскоклітинного раку
легень за віком і статтю
Вік
Стать
Бронхо-біопсія
Операційний матеріал
Секційний матеріал
30-39
5 – ч; 2 – ж
40-49
6 – ч; 1– ж
50-59
10 – ч; 3 – ж
60-69
9 – ч; 3 – ж
70-79
5 – ч; 1 – ж
Гістологічні і гістохімічні методи дослідження. Мікроскопічне вивчення
матеріалу плоскоклітинного раку легень проводили після фіксації шматочків
тканини в 10 % розчині нейтрального формаліну, а також фіксатора Карнуа з
наступною парафіновою проводкою. Зрізи фарбовувалися гематоксиліном і еозином,
фуксилін-пікрофуксином за Ван-Гізоном, на еластику за способом Харта з
дофарбуванням фуксилін-пікрофуксином, на нейтральні та кислі
глюкозаміноглікани.
Крім того, у процесі дослідження використовували нами модифіковане фарбування
ШИК + альціановий синій + фарбування за способом Бергмана. Модифікація полягала
в тому, що депарафіновані тонкі зрізи спочатку протравливались рідиною Боуена,
що містить 3-4% хромових квасців, при 37?С 24 години. Потім зрізи промивалися в
проточній воді до повного знебарвлення. Зрізи окислялися в продовж 2-3 хвилин у
суміші, що перебуває з 2,5% розчину KMnO4 (1 частина), 5% H2SO4 (1 одна
частина), і дистильованої води (6 частин). Після промивання в дистильованій
воді зрізи зафарбовувалися реактивом Шиффа по Детомазі, із наступною обробкою
сірчастою кислотою. Потім після промивання в дистильованій воді, зрізи
фарбувалися 1% водним розчином альціанового синього з диференціюванням
фарбування в 1% розчині соляної кислоти. Після прояснення в ксилолі,
пофарбовані зрізи укладали в канадський бальзам. Запропоноване комбіноване
фарбування дозволяє виявити нейросекреторні гранули, забарвлені в коричневий
колір, ШИК- позитивні гранули, що мають червоний колір, і нарешті,
альциан-позитивні гранули, що забарвлюються в блакитний колір.
У всіх 23 померлих від плоскоклітинного раку легень у кожному спостереженні
проводили сегментарний розтин легень за методом А.І. Струкова і І.В. Кодолової
(1969). При цьому відзначали локалізацію пухлини в часткових і сегментарних
бронхах, її розміри ( дрібновузлова – до 6 см і великовузлова – понад 6 см, а
так само переважно периваскулярний або перибронхіальний ріст пухлини.
На підставі аналізу власних досліджень, а так само класифікацій А.І. Абрикосова
(1940), И. В. Давидовского (1957), А. Насту із співавторами (1967) у залежності
від клініко-морфологічної форми росту пухлини, виділені наступні групи:
вузлувата, медіастинальна, поліпозно-ателектатична, інфільтративно-пневмонічна,
пахіплевральна, гематогенно-дисемінована, ацинозно-нодозна та кавернозна.
У кожному спостереженні для гістологічного дослідження забирали шматочки
тканини з периферії і центру пухлини.
Типові гістоструктурні типи плоскоклітинного раку легень встановлювали
відповідно до Міжнародної класифікації ВООЗ (1984). При цьому гістогенетичну
належність пухлини визначали за наявністю альціон- і ШИК-позитивнх гранул,
глікогену, нейросекреторних гранул. Крім того, визначали кількість судин,
інвазованих пухлинними клітинами, із встановленням, після фарбування по Харту,
відсоткового співвідношення уражених легеневих вен і артерій, а так само
бронхіальних вен і артерій.
Методика морфологічного підрахунку ступеня інвазії плоскоклітинного раку судин
легені і його аппозиційного росту в різних відділах бронхіального дерева. В
основі визначення ступеня інвазії раковими клітинами лімфатичних і кровоносних
судин легені встановлене комбіноване забарвлення за способом Харта з
дофарбуванням фуксилін-пікрофуксином шматочків плоскоклітинного раку легені
взятих в центрі та по периферії пухлини. Виготовлені парафінові зрізи завтовшки
10-15 мкм, спочатку забарвлювалися впродовж 18-24 годин в концентрованому
розчині фукселіна, потім забарвлення на еластичні волокна стабілізувалося
зануренням зрізів спочатку в 10% розчин фосфовольфрамових , а потім в 10%
розчині фосфомолібденових квасців. Потім проводилося забарвлення зрізів
фуксилін-пікрофуксином і полягали в канадський бальзам. В результаті
вищеописаного комбінованого забарвлення еластичні волокна забарвлювалися в
темно-фіолетовий колір, колагенові – в червоний, м'язові – в зелений, а ядра
клітин – в чорний колір. Запропоноване забарвлення дозволяє диференціювати
окремі кровоносні судини легені. Так, бронхіальна артерія містить дві еластичні
мембрани між якими розташовується товстий м'язовий шар. У той час гілки
легеневої артерії мають добре виражену зовнішню еластичну мембрану. Бронхіальні
вени мають товстий середній м'язово-еластичний периваскулярний фуксинофільний
шар слабо виражений. Нарешті, в лімфатичних судинах еластичні волокна майже
повністю відсутні і містить середній гл
- Київ+380960830922